“双一流”背景下非生物专业生命科学实践类系列特色通识课程的建设与探索

生命科学是与人类关系最密切的学科,也是众多科学领域中发展迅速且交叉性强的实验性学科。“双一流”建设背景下,人才培养以全面发展为导向,这对大学生生命科学素养和综合能力的培养提出了迫切需求。以通识课程体系改革为契机,积极探索并成功建设面向非生物专业学生的8门生命科学实践类系列通识课程,课程内容涵盖生命科学的各个分支学科或方向,培养具有生命科学知识和素养并具有一定实践能力和创新能力的复合型人才,可为高校实验教学中心通识课程开设和实验教学改革提供参考和借鉴的经验。     

基于纳米抗体CDR3区抗原表位展示制备生存素抗体及其鉴定

目的:通过纳米抗体CDR3区展示生存素N端表位的方式,探索纳米抗体在抗原表位展示中的作用。方法:通过基因合成方法将生存素N端起始表位(氨基酸序列1~15)插入纳米抗体CDR3区,再构建到原核表达载体pET24a中,IPTG诱导表达,用带His标签的填料纯化,获得高纯度的目的蛋白,免疫雌性BALB/c小鼠,间接ELISA检测5次免疫后的效价,用抗原偶联纯化介质纯化免疫多抗,Western印迹检测多抗特异性。结果:IPTG诱导后,目的蛋白主要以包涵体形式存在,亲和层析获得纯度大于96%的目的蛋白,包涵体经复性后免疫小鼠,效价可达1∶512000,West?ern印迹特异性检测显示免疫多抗能够特异性结合生存素。结论:纳米抗体CDR3区生存素抗原N端表位展示的方法可用于抗生存素抗体的制备,并为今后纳米抗体表位展示相关研究奠定基础。     

检测环境污染物的适配体生物传感器研究进展

适配体生物传感器可利用适配体作为识别元件,将适配体的优良特性和目前先进的检测技术进行结合,例如光学、电化学纳米集成技术或生物膜干涉测量法,为其在有毒有害物质检测和环境实时监测领域构筑了良好应用前景。然而,适配体传感器的进一步应用仍有许多问题亟待解决,比如:环境的复杂性会对其应用产生限制;适配体固化到传感器表面的方式会影响适配体的结构和功能,从而影响检测效果。本文将主要研究适配体筛选策略的最新进展并对适配体传感器检测环境中小分子污染物的应用展开综述。     

茵栀黄汤对新生儿黄疸血清总胆汁酸浓度变化的影响

目的:探究茵栀黄汤对新生儿黄疸血清总胆汁酸浓度变化的影响。方法:选取我院2014年1月到2014年11月收治的新生儿黄疸患者72例,根据应用药物不同而分成实验组与对照组。对照组给予蓝光治疗,实验组在对照组基础上予以茵栀黄汤。比较两组患者的黄疸消退时间、因黄疸再住院率、肝功能酶检测、血清总胆汁酸、血清总胆红素及间接胆红素水平。结果:与对照组相比,实验组患者黄疸消退时间明显缩短,再住院率明显降低,P0.05;两组肝功能均有所恢复,与对照组相比,实验组患者的肝功能酶水平恢复更明显,P0.05;两组患者的TBA、TBIL、DBIL水平均下降,与对照组相比,实验组下降更明显,P0.05。结论:茵栀黄汤能有效缓解新生儿黄疸症状,降低肝功能酶及TBA、TBIL、DBIL水平。     

两粤黄檀乙醇提取物化学成分分析及抗炎活性研究

为了研究壮药两粤黄檀的化学成分及其抗炎活性,阐明其药理作用机制,该研究采用小鼠二甲苯致炎耳廓肿胀法、角叉菜胶致炎足肿胀急性炎症模型,观察不同剂量两粤黄檀乙醇提取物对小鼠耳廓肿胀度、肿胀率及足肿胀度的影响,并利用液相色谱-质谱(LC-MS)、热裂解气相色谱-质谱(PY-GC/MS)等技术分析提取物的化学成分,结合网络药理学方法对其抗炎活性成分以及作用机制进行初步研究。结果表明:(1)两粤黄檀乙醇提取物具有良好的抗炎活性,高剂量组(8 g·kg~(-1))可以显著抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀度、角叉菜胶致炎足趾肿胀,其抑制率均高于50%;(2)从两粤黄檀乙醇提取物中共鉴定得到60个化合物,包括毛蕊异黄酮、芒柄花黄素、血根碱、胡椒碱、β-谷甾醇等多种抗炎活性成分;(3)网络药理学分析显示,两粤黄檀发挥抗炎作用的核心靶点为PIK3CA、EGFR、MAPK、SRC、STAT3、CYP19A1、IL2、MAOA等,涉及c GMP-PKG、cAMP、Focal adhesion、Rap1等信号通路。该研究结果为两粤黄檀的进一步开发利用提供了重要参考。     

定向进化改造酪氨酸解氨酶提高大肠杆菌合成对香豆酸产量

对香豆酸是一种具有多种药理活性的天然酚类化合物,也是多种天然药用产物生物合成的前体物质,广泛应用于食品、化妆品、医药等领域。通过微生物合成对香豆酸相对于化学合成和植物提取工艺具有节能减排等优势。但是,目前微生物合成对香豆酸产量较低,难以满足大规模工业发酵生产的要求。为了进一步提高对香豆酸产量,对粘红酵母酪氨酸解氨酶 (Tyrosine ammonia-lyase,TAL) 进行定向进化改造,利用高通量筛选方法从随机突变体文库中筛选TAL催化活性提高的突变体。通过初筛和复筛两轮筛选,从大约10 000个突变体中获得1个TAL催化活性提高1倍的突变体。该突变体包含3个氨基酸突变位点,分别为S9Y、A11N、E518A。进一步通过单点氨基酸饱和突变验证,当S9位点突变为Y、I、N和A11位点突变为N、T、Y时,TAL的催化活性提高1倍以上。通过对S9和A11位点3种类型突变进行组合突变验证,S9Y/A11N和S9N/A11Y突变体的TAL催化活力显著高于其他组合。将S9N/A11Y突变体质粒转入酪氨酸高产菌株CP032。通过摇瓶发酵,该菌株在48 h时的对香豆酸产量达到394.2 mg/L,比对照菌提高2.2倍。本研究工作对促进微生物合成对香豆酸的代谢工程研究具有一定的参考价值。     

医院空气中细菌与临床感染的关系研究

医院感染已列为国家质量管理的一个重要组成部分,感染菌的来源,主要分内源性菌,即患者自身带的菌又感染了自己。另一种是外源性菌,即外环境包括空气中的细菌、各种物品中的细菌、人员接触等。医院内感染;以呼吸道感染占首位(59％),空气传播是引起感染的重要方面,空气中病原性微生物的污染程度直接决定感染率的高低。为了弄清医院空气中菌群分布情况及从空气中和临床患者中分离出同一类菌的关系,进行了对比实验及耐药性分析,现将结果报告如下。     

臭灵丹中四个新的倍半萜酸

从云南省芒市产臭灵丹［Ｌａｇｇｅｒａｐｔｅｒｏｄｎｔａ（ＤＣ．）Ｂｅｎｔｈ］中,分离得以４个新的桉烷型倍半萜酸,结构鉴定为５,１２－二烯－桉烷－１３－酸（１）;１β－式－５,１２－二烯－桉烷－１３－酸（２）;３β－羟基－５,１２－二烯－桉烷－１３－酸（３）。     

微波—吸附法提取朱砂玉兰鲜花香气成分

朱砂玉兰(Magnolia soulangeana)鲜花经微波处理,用XAD-4吸附提取头香物质。该方法不仅可以较快速地得到挥发性成分,而且提取的精油能保持原鲜花的香气香味。本文还讨论了用微波处理与不处理朱砂玉兰鲜花样品以及用水蒸汽蒸馏3种方法得到的精油在收率及化学成分上的差异及变化。