土施多效唑对小桐子营养生长与生殖生长的影响

小桐子(Jatropha curcas)是一种具有多种用途的植物,其种子含油量高达40％,是一种很有应用前景的能源植物.小桐子在温度、湿度较高的地区,特别是其修剪后新萌发的枝条经常出现营养生长旺盛,成花量较少的现象,导致其种子产量较低.本研究采用多效唑(paclobutrazol,PAC)对小桐子进行土施处理,结果表明:多效唑的使用剂量为0.8g·m-1树冠直径时,可有效抑制小桐子的营养生长,降低株高;同时促进小桐子的生殖生长,增加开花和结果枝条数量,增加花序和果序数量,增加单个花序的总花数和雌花的比例,可将小桐子单株种子产量提高2.4倍.此外,多效唑处理使小桐子的开花期和结果期更加集中,便于田间管理和采收.多效唑作为赤霉素合成的抑制剂,可以有效地促进小桐子由营养生长向生殖生长的转变,对于了解赤霉素在调控小桐子花发育方面的作用具有重要意义;同时也有助于克隆有关功能基因,进一步采用转基因技术对小桐子进行遗传改良.     

经冠脉转染肝细胞生长因子促进猪梗死后心衰模型干细胞动员的研究

观察经冠脉转染腺病毒(adenovirus, Ad₅-)携带人肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor, HGF)对猪心梗后心衰模型中干细胞动员的作用. 12只苏中幼猪, 随机分成转染Ad₅-HGF组(治疗组)和转染未携带肝细胞生长因子的腺病毒载体组(mock-vector对照组), 每组6只. 结扎前降支制成心肌梗死模型, 手术后四周行冠脉造影时给药, 同时行门控心肌灌注显像评价心肌灌注及心功能情况; 给药三周时, 再次行门控心肌灌注显像, 然后处死动物取心脏组织, 酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测肝细胞生长因子蛋白表达; 免疫组化检测基因转染后梗死心肌中干细胞的动员情况. 经冠脉转染Ad₅-HGF后心肌高度表达人HGF蛋白; 治疗组心肌组织中CD117⁺细胞数明显多于对照组, 并且同时表达 c-Met; 治疗组心肌血流灌注及左室射血分数(LVEF)较对照组明显改善. 经冠脉转染 Ad₅-HGF 能使心肌高度表达 HGF 蛋白; HGF 能增加动员至缺血区的CD117⁺干细胞, 并且该类细胞表达c-Met; HGF改善心功能及心肌灌注的作用不仅仅是血管新生, 可能还涉及到对干细胞的动员召集作用.     

延龄草总皂苷对LPS诱导炎症大鼠的抗炎效果

为了探讨延龄草总皂苷对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导急性炎症大鼠的保护作用,将SD大鼠随机分成(2, 1, 0.5) g/kg剂量组、模型组、地塞米松磷酸钠(dexamethasone, DEX)对照组及空白对照组,每组10只。剂量组按(2, 1, 0.5) g·kg~(~(-1))·d~(-1)延龄草总皂苷灌胃一次,模型组、空白对照组灌胃等量蒸馏水。连续灌胃5 d,末次灌胃0.5 h后,剂量组、模型组按200μg/kg腹腔注射LPS;DEX对照组连续灌胃4 d,第5天腹腔注射DEX (100μg/kg),0.5 h后按200μg/kg腹腔注射LPS,空白对照组注射等量生理盐水。末次注射LPS 8 h后,处死大鼠,检测碱性磷酸酶(ALP)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、一氧化氮合酶(NOS)活性及总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、一氧化氮(NO)、白细胞介素6 (IL-6)、IL~(-1)0、IL~(-1)β、IL-4、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、5-羟色胺(5-HT)、组胺(HIS)、环氧化物酶(COX-2)、前列腺素E2 (PGE2)含量。结果显示:(2, 1, 0.5) g/kg组ALP、AST活性及IL-6、IL~(-1)β、IL-8、TNF-α、HIS、COX-2、PGE2含量降低;(1, 0.5) g/kg组ALT活性降低;2 g/kg组NOS活性与NO含量降低,IL~(-1)0含量升高;(2, 1) g/kg组5-HT含量降低。延龄草总皂苷能有效降低LPS所致炎症大鼠ALP、AST、ALT、NOS活性及TC、TG含量,减少NO生成,降低IL-6、IL~(-1)β、IL-8、TNF-α、5-HT、HIS、COX-2及PGE2过量分泌、提升IL~(-1)0、IL-4含量,抗炎效果明显。     

五鹤续断抗小鼠衰老的作用及其机制研究

目的：研究五鹤续断（WHDA）注射液对D-半乳糖所致小鼠衰老模型的抗衰老作用及其机制。方法：昆明种小鼠（雌雄各半）48只,随机分为对照组、模型组、阳性WHDA组、7．2g/kgWnDA组、3．6g/kgWHDA组及1．8g/kgWHDA组,每组8只。腹腔注射D-半乳糖造模,Morris水迷宫测量小鼠学习和记忆能力。检测各组小鼠皮肤羟脯氨酸、脑组织MDA、LP、SOD及GSH-Px含量,采用双抗体夹心ELISA法检测小鼠血清中IL-2及IL-6含量。结果：Morris水迷宫实验结果表明WHDA各组潜伏期与模型组相比较明显减少（P〈0．05）,模型组小鼠穿越平台的次数比其它各组小鼠少（P〈0．05）。脑组织氧化性指标（SOD、MAD、LP及GSH．Px）检测,对照组及WHDA各组MAD与LP含量低于模型组（P〈0．05）。对照组及WHDA各组SOD与GSH-Px的活性明显高于模型组（P〈0．05）。注射过D-半乳糖小鼠皮肤羟脯氨酸含量都明显低于对照组（P〈0．05）,WHDA组小鼠皮肤中羟脯氨酸的含量明显高于模型组（P〈0．05）。WHDA组小鼠血清中IL-2、IL-6含量显著高于对照组和模型组（P〈0．05）,模型组小鼠血清中的IL-2、IL-6比对照组要低（P〈0．05）。结论：WHDA能改善D．半乳糖所致的衰老小鼠的学习记忆能力,消除其体内自由基,增强机体免疫能力,具有较好的抗衰老作用。     

SIRT1siRNA 对胰岛素抵抗模型小鼠脂代谢和血小板功能的影响

目的:构建携带小鼠沉默信息调节蛋白1(SIRT1)siRNA的腺病毒载体,并检测其对胰岛素抵抗模型小鼠脂代谢和血小板功能的影响。方法:首先化学合成小鼠SIRT1 shRNA片断,并将目的片断亚克隆入穿梭质粒pShuttle-U6,用PmeⅠ线性化后与pAdeasy-1在BJ5183内同源重组,筛选、鉴定、测序后,在XL10-Gold中扩增重组腺病毒质粒,最后在293细胞内包装扩增为重组腺病毒Ad-SIRT1 SiRNA。用此重组腺病毒感染3T3-L1脂肪细胞,用RT-PCR和ELISA检测其SIRT1 mRNA和蛋白表达从而鉴定其有效性。然后再将重组病毒导入胰岛素抵抗模型小鼠,检测其对小鼠脂代谢和血小板功能的影响。结果:HF组血清胆固醇、甘油三酯、游离脂肪酸和低密度脂蛋白胆固醇显著高于正常对照组(P<0.05),而在HR组上述指标则显著低于HF组(P<0.05)。且HF组高密度脂蛋白胆固醇显著低于正常对照组(P<0.05),在HR组,高密度脂蛋白胆固醇则显著高于HF组(P<0.05)。血小板活化测定结果显示,与正常对照组相比,HF组血小板早期活化程度显著增强(P<0.05),而HR组血小板早期活化程度则比HF组显著减弱(P<0.05),三个组中血小板晚期活化程度无显著性差异(P>0.05)。结论:携带目的基因的腺病毒载体感染脂肪细胞后,能显著影响其SIRT1 mRNA和蛋白表达,并影响胰岛素抵抗模型小鼠脂代谢和血小板功能。     

恒定磁场对小鼠空间记忆形成的影响

目的：探讨不同照射时间的恒定磁场作用对小鼠空间记忆形成的影响.方法：应用水迷宫学习模型测定并对比4小时恒定磁场照射组、3小时恒定磁场照射组、2小时恒定磁场照射组和无磁场照射的正常对照组动物的空间记忆能力.结果：水迷宫学习训练的实验表明：第一个训练日中,4小时磁场处理组动物与正常对照组比较,动物到达水下平台所需时间延长,且具有显著性差异（P〈0.05）;3小时磁场处理组与正常对照组比较,动物到达水下平台所需时间缩短,且具有显著性差异（P〈0.05）;第二个训练日中,2小时或3小时磁场处理组与正常对照组比较,动物到达水下平台所需时间延长,且均具有显著性差异（P〈0.05）.第三、四、五连续3个训练日中,3组磁场处理组动物到达水下平台所需的时间与正常对照组相比较均不具有显著性差异（P〉0.05）.结论：一定时间的磁场处理对小鼠空间记忆的形成有促进或损伤作用,究竟是促进还是损伤有可能取决于一个作用“窗口”问题.     

丹参诱导鼠骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞优化方案及电生理研究

分离培养大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs), 采用丹参对4～5代MSCs进行反复多次诱导分化及再分化, 将其诱导分化为神经样细胞, 倒置显微镜下连续观察形态学变化, 通过免疫荧光细胞化学检测神经样细胞巢蛋白(nestin)、神经丝蛋白 (neurofiliament, NF)、突触(小)泡蛋白(synaptophysin) 的表达, 采用细胞膜电位特异的荧光探针DiBAC4(3)标记细胞, 激光扫描共聚焦显微镜动态监测细胞受高钾刺激前后的荧光强度变化, 观察细胞电生理反应.结果显示: MSCs第1次经过丹参诱导2 h后, MSCs伸出突起, 向神经性细胞形态转变, 此时巢蛋白表达率为 (95.1±2.1)% (x±s, n=3), 基本不表达NF; 随着诱导分化及去分化过程的次数增加, 细胞分化为神经样细胞的时间缩短, 突起拉长并交互缠绕呈复杂网状, MSCs第4次经过丹参诱导1 h后, NF表达率(95.3±1.6)% (x±s, n=3), 并表达突触(小)泡蛋白, 5 h后突触(小)泡蛋白表达更为广泛; 激光共聚焦扫描显微镜显示第4次诱导5 h后的细胞在高钾刺激下发生去极化, 胞内荧光强度瞬时增强, 而MSCs空白对照对高钾刺激无反应.本优化诱导方案可以高效率地诱导MSCs分化为具有电生理特性的神经样细胞.     

用HPLC法从中药中筛选血管紧张素转化酶抑制剂

本文发展了一种从中药中筛选血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂的高效液相色谱法.以马尿酰-组氨酰-亮氨酸为反应底物,人体血浆中内生的ACE作为反应用酶,反应所生成的马尿酸为检测指标,未加酶抑制剂的反应为空白对照.用阳性药物卡托普利对本方法进行了验证.应用本方法对中药提取物进行了ACE抑制活性的筛选,其中地龙的ACE抑制活性最强,其IC50值为2.57 mg/mL.用HPLC法筛选中药ACEI且有很好的精密度和准确性.     

六种沉香属植物叶片解剖结构研究

为比较沉香属不同种植物间的叶片形态解剖特征,将不同来源的六种沉香属植物在海南省兴隆南药园种植,运用石蜡切片法和撕片法对其成熟叶片的解剖特征进行观察,并对叶片的上下表皮,叶脉和叶横切面等12项数量性状进行统计分析。结果表明:六种沉香属植物叶片解剖结构基本一致,均为典型的异面叶,由表皮、叶肉和叶脉组成,表现出典型的旱生形态特点。表皮细胞单层,气孔微下陷,仅分布在下表皮,上下表皮上零星分布着表皮毛。叶肉组织发达,栅栏组织由1~2层排列紧密地圆柱状细胞组成,其间分布着大量的长方晶体,海绵组织内有一层排列较整齐,染色较深的异细胞组成的下皮层。主脉维管束双韧型,呈圆环状,内含大量异细胞。方差分析表明,除栅海比外,叶片厚度、叶脉条数、主脉厚度等其余11项数量指标在六种植物间差异均达到显著水平。聚类分析将这六种植物聚成3类,Aquilaria sinensis(白木香),A.crassna和A.banaensis聚为一类,A.baillonii和A.malaccensis聚为一类;A.yunnanensis(云南沉香)单独为一类。该研究结果为沉香属植物的物种鉴定提供了解剖学依据,同时对沉香属植物合理开发利用具有重要意义。