腺病毒介导肝细胞生长因子基因转移治疗小型猪慢性心肌缺血的实验研究

血管生长因子基因转移诱导的血管新生已成为治疗心肌缺血的一种新的思路. 重组腺病毒介导的肝细胞生长因子基因转移能够有效诱导治疗性血管新生. 为评价重组腺病毒肝细胞生长因子基因(Ad-HGF)转移治疗冠心病效果, 本实验利用Ameroid 缩窄环建立了小型猪慢性心肌缺血的研究模型, 并评价了Ad-HGF对慢性心肌缺血的治疗作用. 18只小型猪随机分成3组: 手术对照组、模型组和治疗组. 模型组和治疗组分别在回旋支近端放置Ameroid缩窄环, 模型成功后分别直接注射安慰剂和Ad-HGF到缺血心肌部位进行治疗. 治疗4周后对心功能和血液供应的改善进行了评价. 结果表明, 与对照组和模型组相比, Ad-HGF组的心肌灌注有了明显改善. 在治疗后4周, Ad-HGF组新形成的血管密度和血管数量明显高于模型组. Ad-HGF组心肌缺血面积明显减少, 左心室射血分数显著改善. 这些结果为肝细胞生长因子基因治疗慢性心肌缺血提供了直接的证据.     

经冠脉转染肝细胞生长因子促进猪梗死后心衰模型干细胞动员的研究

观察经冠脉转染腺病毒(adenovirus, Ad₅-)携带人肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor, HGF)对猪心梗后心衰模型中干细胞动员的作用. 12只苏中幼猪, 随机分成转染Ad₅-HGF组(治疗组)和转染未携带肝细胞生长因子的腺病毒载体组(mock-vector对照组), 每组6只. 结扎前降支制成心肌梗死模型, 手术后四周行冠脉造影时给药, 同时行门控心肌灌注显像评价心肌灌注及心功能情况; 给药三周时, 再次行门控心肌灌注显像, 然后处死动物取心脏组织, 酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测肝细胞生长因子蛋白表达; 免疫组化检测基因转染后梗死心肌中干细胞的动员情况. 经冠脉转染Ad₅-HGF后心肌高度表达人HGF蛋白; 治疗组心肌组织中CD117⁺细胞数明显多于对照组, 并且同时表达 c-Met; 治疗组心肌血流灌注及左室射血分数(LVEF)较对照组明显改善. 经冠脉转染 Ad₅-HGF 能使心肌高度表达 HGF 蛋白; HGF 能增加动员至缺血区的CD117⁺干细胞, 并且该类细胞表达c-Met; HGF改善心功能及心肌灌注的作用不仅仅是血管新生, 可能还涉及到对干细胞的动员召集作用.