丙型肝炎病毒北京株NS3基因的克隆及测序

用ＲＴ－ＰＣＲ方法从北京株丙型肝炎病毒中扩增出ＮＳ３区基因片段,该片段经ｐＧＥＸ－Ｔ载体克隆到大肠杆菌ＤＨ５α菌株中．经自动序列分析仪测出ＮＳ３基因的７２８ｂｐ长的核酸序列．发现在该片段中第３１位核苷酸发生Ａ→Ｔ突变,产生一个终止突变．这表明,丙型肝炎病毒北京株存在一定的变异,产生缺陷型病毒,这类缺陷型病毒的出现可能是丙型肝炎病毒持续性感染的原因之一．     

重组葡激酶中试工艺研究

采用大肠杆菌表达重组葡萄球菌激酶（Ｓｔａｐｈｙｌｏｋｉｎａｓｅ,Ｓａｋ）表达产物与细菌菌体蛋白的５０％左右,通过包涵体抽提,离子交换和凝胶过滤层析,每升发酵液可得到１．５ｇ的纯品Ｓａｋ,其理化性质和Ｎ末端１５个氨基酸序列与报道一致,我们成功地进行了连续三批中试产品的研究,三批中试结果相似,产品回收率在７０％左右,纯度在９７％以上。     

小生物.大世界

广阔的盐城沿海滩涂,一望无垠。在这貌似平静的滩面上,蕴藏着一个巨大的、热闹非凡的泥沙下的世界。种类繁多,形态百出,行为各异的滩涂小生物在这里永不停息地忙碌着,为南来北往的候鸟,更为世代繁衍在这块土地上的鸟类,提供赖以生息的条件。如果您有机会来到这片湿地,相信您一定能从中感受到生物世界的奇趣,感受到食物链所体现的自然界的法则。只要你用心观察,一定会深深地为这个小生物的大世界所吸引。 小蟹 小蟹是当地人对滩涂蟹类的总称。滩涂上共有30多种蟹生存,它们喜营穴居生活,其洞穴遍布滩涂,在一平方米的面积内就有2～3个。洞穴深浅不一,但一般每穴往往具备2个洞口。小蟹冬季深藏在洞穴的最底部进行冬眠,直到春暖大地之时,它们再度爬出洞穴,准备繁殖后代。蟹类一般食腐殖质和低等小动物,     

人α干扰素基因在家蚕细胞中的高表达

用家蚕核多角体病毒(NPV)为载体,使人α干扰素基因正确装配到NPV多角体蛋白基因启动子控制下,构成重组质粒,又与NPVDNA共转染家蚕细胞。反复病毒空斑纯化后,得到重组病毒。     

大别山白及多糖制备及其吸湿保湿性能研究

目的：研究大别山白及多糖的吸湿和保湿性能。方法：以大别山紫花三叉白及为实验原料，通过水提、Sevage法脱蛋白、乙醇沉淀的方法制备白及多糖，通过红外光谱分析其结构；应用干燥器控制湿度对白及多糖进行体外吸湿和保湿性能研究。结果：白及多糖最优提取条件为：浸提1次，浸提时间1.5 h，固液比1:35 (g/mL)，浸提温度80℃；在此条件下进行验证实验，三次平行测定结果得到白及多糖得率为（26.22±0.32）%;Sevage法脱蛋白5次，多糖保留率约为85.42%，蛋白脱除率约为91.66%。红外光谱分析表明脱蛋白白及多糖结构可能含有α-类型和β-类型糖苷键，或存在β-D-型吡喃甘露糖。在相对湿度为43%和81%的环境下，吸湿能力为丙三醇>白及多糖>壳聚糖>透明质酸>海藻酸钠；体外的保湿能力为壳聚糖>白及多糖>透明质酸>海藻酸钠>丙三醇。结论：白及经过水提、Sevage法脱蛋白、乙醇沉淀制备的大别山白及多糖具有优越的吸湿保湿性能，为其在护肤产品方面的进一步开发利用提供科学合理的依据，也为增加大别山白及产品的附加值提供基础性实验研究。     

丙型肝炎病毒Core与NS3基因的不同融合方式及其表达

丙型肝炎病毒(简称HCV)是危害人类健康的传染性疾病,预防该病的传播主要借助于HCV血清学诊断来筛选献血员和检测临床标本.从国内外已分离到的HCV株得知,HCV核心蛋白(Core)和非结构蛋白NS3含有较强的优势抗原表位,其相应的抗体出现早,阳性率高,已成为目前第二、第三代HCV免疫诊断试剂的重要成份[1,2].通常Core蛋白和NS3蛋白分别用基因工程方法表达,然后作为固定化抗原,检测人体内HCV的抗体.我们对Core和NS3的两种不同组合方式及其表达的研究,对于发展新的HCV诊断试剂很有帮助,现将结果报道如下.     

东方蜜蜂微孢子虫侵染意大利蜜蜂工蜂过程中nce-miR-10660及其靶基因表达谱

【目的】本研究旨在为探究nce-miR-10660调控东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae侵染的作用机制提供理论和实验依据。【方法】采用Stem-loop RT-PCR对前期鉴定到的东方蜜蜂微孢子虫nce-miR-10660进行表达验证，再通过Sanger测序验证nce-miR-10660的序列。利用相关生物信息学软件预测和分析nce-miR-10660的靶基因。通过RT-qPCR检测nce-miR-10660及其靶基因在东方蜜蜂微孢子虫侵染意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂过程中中肠中的表达谱。【结果】Stem-loop RT-PCR和Sanger测序结果分别证实了nce-miR-10660在东方蜜蜂微孢子虫孢子中的表达和真实存在。靶向预测结果显示nce-miR-10660共靶向RRDRP和RCDP 42等9个基因；分别有2和6个靶基因可被分别注释到KEGG数据库中的4条通路和GO数据库中的23个条目。RT-qPCR结果显示，相较于东方蜜蜂微孢子虫侵染后1 d时意大利蜜蜂工蜂中肠中nce-miR-10660的表达量，东方蜜蜂微孢子虫侵染后2 d时意...     

原核表达系统T7RNA聚合酶/启动子在真核细胞中表达目的基因的实验研究

将目前高表达水平强大的原核表达系统之一T7 RNA聚合酶/启动子表达系统通过一系列改进引入真核细胞.通过转染真核细胞实验表明,采用真核启动子CMV调控T7 RNA聚合酶的表达和在T7启动子下游插入EMCV IRES序列两种解决方案能使该原核表达系统在真核细胞高效表达目的基因,且能适应不同的真核细胞环境,是一良好的细胞类型非依赖的表达体系.