SHR和WKY大鼠主动脉hsp 70mRNA水平的比较研究

本工作应用热激蛋白70KD(hsp 70)核酸分子杂交方法,检测了:1.自发性高血压(SHR)主动脉和离体培养的主动脉平滑肌细胞受热激后hsp 70mRNA水平的变化;2.不同细胞培养时间(3个月与6周)的SHR、WKY主动脉hsp 70mRNA水平。结果提示SHR主动脉hsp mRNA水平增加,SHR细胞培养受热激(42℃,15min)后2h,hsp 70mRNA水平明显高于WKY鼠者,6周较3个月的SHR细胞hsp 70mRNA水平高;6周的SHR细胞较同期和3个月的WKY细胞hsp 70mRNA高。推论SHR血管平滑肌细胞对热敏感,原癌基因c-myc和抗癌基因p~(53)可能参与hsp 70表达调控,并共同参与SHR细胞增殖的调节。     

逆转录病毒介导的HSV－tk在肿瘤基治疗中的应用

本实验将ＨＳＶ－ｔｋ基因构建在逆转录病毒载体ＰＬＸＳＮｎｅｏ上,经ＰＡ３１７包装后,筛选出５ｘ１０￣５ｐｆｕ／ｍｌ的ＴＫ包装细胞。用该细胞培养上清感染体外培养细胞,并用Ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ－ＧＣＶ处理,可以对增殖的细胞产生细胞毒害作用。细胞增殖速度越快,细胞毒害作用越强。在体内实验中,将ＴＫ细胞直接注射到移植瘤中或与瘤组织悬液混合接种同种小鼠。再用ＧＣＶ治疗,对肿瘤有较强的生长抑制作用。     

FOS／JUN介导佛波酯对内皮素基因表达的诱导作用

利用凝胶电泳迁移率改变实验、RNA印迹和蛋白质印迹分析分别检查了c-jun抗体对内皮素-1(ET-1)基因AP-1位点与核蛋白结合的影响及肿瘤促进剂佛波酯(TPA)对c-fos/c-jun基因表达的作用.结果发现,c-jun抗体可使AP-1位点-核蛋白复合物的电泳迁移率发生改变,TPA显著促进c-fos/c-jun基因表达和血管内皮细胞的AP-1结合活性.实验表明,TPA对ET-1基因表达的诱导作用是通过促进AP-1转录因子c-fos/c-jun合成来介导的.     

心钠素分子生物学的研究

应用分子生物学技术,已将心钠素基因克隆出来,它由2500多个碱基对组成,其中包括三个外显子和二个内含子。最近,又将心钠素基因与α因子、2μ环基因和 LEU-2基因重组,在酵母菌中表达出具有生物活性的心钠素。这些研究为揭示心钠素的合成、代谢和调节开辟了一条新途径。     

Preliminary investigation of sequence-independent DNA binding proteins in rat skeletal muscle sarcoplasmic reticulum and their function

To observe the binding of plasmid DNA to non-nuclear DNA binding proteins in sar-coplasmic reticulum (SR) and the effects of this binding on SR function, sarcoplasmic reticulum proteins in rat skeletal muscle were isolated by differential centrifuge and sucrose density-gradient centrifuge. The results showed that there are two sequence-independent DNA binding proteins in SR proteins, the molecular weights of which are 83 and 58 ku, respectively. Ca2 uptake and release of SR were remarkably promoted by the binding of plasmid DNA to DNA binding proteins in SR, the mechanism is probably through increasing of Ca2 -ATPase activity in SR and changing of character of Ca2 release channel ryanodine receptors induced by the binding. These results suggest that there exist DNA binding proteins in SR and its binding to DNA may affect Ca2 transport of SR.     

抗SARS 人源单链抗体H12的表达及复性

从SARS免疫抗体库获得的一株抗SARS-CoV人源单链抗体H12,亟待鉴定.为了快速制备大量具有生物活性的单链抗体H12,构建了pET28a-H12原核高表达载体,表达量占菌体总蛋白质30%以上.采用稀释复性和分子筛柱复性两种方法对包涵体蛋白进行复性与纯化,结果显示两种方法都能使得单链抗体复性.与稀释复性法相比,柱复性效果更好,其抗原结合活性是稀释复性法的1.51倍.柱复性后的单链抗体亲和力测定的解离常数Kd为73.5nmol/mL.为进一步研究单链抗体H12的功能奠定了基础.     

一株新型抗46 ku-细胞角蛋白的单特异性单克隆抗体

利用杂交瘤技术制备了一株单克隆抗体 T2-2,对其生化性质的研究及其与抗细胞角蛋白多克隆抗体完全重合的定位表明,该抗体特异性识别一种分子质量为 46 ku 的角蛋白. 对 68 例正常组织和 65 例肿瘤组织的免疫组化结果显示,单克隆抗体 T2-2 具有上皮细胞特异性. 与其他多数抗细胞角蛋白抗体常与一种以上细胞角蛋白多肽表现出交叉反应不同的是,该抗体只识别 46 ku 细胞角蛋白多肽上的某一单特异性表位. 另外,单克隆抗体 T2-2 适用于多种免疫实验技术,包括 ELISA、免疫组化、细胞免疫荧光及蛋白质印迹等,而且适用于多种固定剂. 以上结果表明,单克隆抗体 T2-2 将成为细胞角蛋白功能研究和肿瘤诊断的有力工具.     

粘附分子CD146是影响滋养层细胞侵入行为的关键分子

前期研究观察到一种现象, 在正常妊娠的胎盘中细胞粘附分子CD146选择性地表达在侵入性滋养层细胞中, 而在滋养层细胞侵入不足的先兆子痫病人的胎盘中CD146表达降低或缺失.本文进一步研究了CD146分子影响滋养层细胞侵入行为的作用机理.免疫荧光实验显示CD146分子选择性地表达在具有侵袭能力的中间滋养层细胞,而在非侵入性的细胞滋养层细胞和合体滋养层细胞中不表达.细胞功能实验表明,影响滋养层细胞侵入性的两个关键要素,即细胞迁移和基质金属蛋白酶的分泌,都受到CD146特异抗体的显著抑制.这些研究结果提示,粘附分子CD146是影响细胞侵入行为的关键分子.这为深入研究胚胎植入和肿瘤浸润的分子调控机理提供了一个关键的分子模型.     

粘附分子CDl46是影响滋养层细胞侵入行为的关键分子

前期研究观察到一种现象,在正常妊娠的胎盘中细胞粘附分子CDl46选择性地表达在侵入性滋养层细胞中,而在滋养层细胞侵入不足的先兆子痫病人的胎盘中CDl46表达降低或缺失．本文进一步研究了CDl46分子影响滋养层细胞侵入行为的作用机理．免疫荧光实验显示CDl46分子选择性地表达在具有侵袭能力的中间滋养层细胞,而在非侵入性的细胞滋养层细胞和合体滋养层细胞中不表达．细胞功能实验表明,影响滋养层细胞侵入性的两个关键要素,即细胞迁移和基质金属蛋白酶的分泌,都受到CDl46特异抗体的显著抑制．这些研究结果提示,粘附分子CDl46是影响细胞侵入行为的关键分子．这为深入研究胚胎植入和肿瘤浸润的分子调控机理提供了一个关键的分子模型．     

心肺—肾反射

心肺—肾反射(cardiopulmonary—renal reflex)亦称心肺压力感受器反射(cardiopulmo-nary baroreceptor reflex)。它是机体内心、肺和肾之间相互联系的一种特异性反射,对于机体循环血量的调节具有一定作用。其反射路径如附图所示:一、感受部位 Ledsome 1968年发现在心房和肺静脉内有许多不同类型的感觉神经末梢,它们主要位于左心房心内膜下的组织内或左心房—肺静脉的连接处。以后,Hakumki又进一步发现,在心房内可能有 A、B 两种类型感受器,均由迷走神经传入:A 型传入冲动主要与左心房收缩时房内压变化(a 波)有关;B 型传入冲动则与静脉血回流入心房,房内压持续增加(v 波)有关。A 型和 B 型传入冲动各反映不同的功