一种改进的构建杂交扣留cDNA文库的方法

介绍了一种改进的利用减法杂交构建λ噬菌体cDNA文库的方法,该方法利用处理的sscDNA减去两种对照的mRNA富集目的sscDNA并用磁珠法分离杂交单体,结果表明其增加了杂交单体的产量、简化了实验步骤,而且更有利于富集所需基因,是构建cDNA文库的一个有效改进.     

大鼠壁细胞基底膜容积致敏感氯通道电流

为研究胃粘膜壁细胞容积致敏感氯通道电流的定位、电生理特征及药物效应并推断其在壁细胞病理生理过程中所起作用,对急性分离的大鼠胃粘膜壁细胞进行全细胞膜片钳记录,将电极液设置为高渗（Δ≈７０ｍＯｓｍ）,使细胞出现稳定的体积增大后,在其基底膜上记录到容积致敏感氯通道电流（ｖｏｌｕｍｅ－ｓｅｎｓｉｔｉｖｅｃｈｌｏｒｉｄｅｃｈａｎｎｅｌｃｕｒｅｎｔ,ＶＳＣｌＣＣ）,该电流具有外向整流性及电压和时间依赖性,可被１０μｍｏｌ／Ｌ花生四烯酸（ａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃａｃｉｄ,ＡＡ）可逆性抑制（７１．３±１０．９％）。细胞外液ｐＨ值由７．４降低至４．０,ＶＳＣｌＣＣ的幅度显著下降（６３．１±１４．０％）,而其激活及失活动力学无改变;ｐＨ升高至９．０对ＶＳＣｌＣＣ无影响。壁细胞ＶＳＣｌＣＣ对细胞内外钙离子浓度均呈现明显的依赖性。结果表明,壁细胞基底膜上存在本底氯通道和容积致敏感氯通道两种不同的氯离子通道。ＶＳＣｌＣＣ可能参与某些胃粘膜疾病的病理生理过程。     

核磁共振波谱方法在顺磁金属蛋白-紫色震颤菌血红蛋白中的应用

金属蛋白由于其所带金属离子具有未配对电子而具有顺磁性,致使弛豫时间缩短、谱线加宽（～５０Ｈｚ）以及谱范围变大（～１００ｐｐｍ）,因而具有与抗磁蛋白不同的谱特征。这时一些常用的２ＤＮＭＲ实验方法将失效。本文探索顺磁金属蛋白的几种ＮＭＲ实验方法,如溶剂峰抑制、２ＤＭＣＯＳＹ、ＮＯＥＳＹ、１ＤＮＯＥ差谱及ＳＵＰＥＲＷＥＦＴ等,并精心设计实验条件使之适用于顺磁金属蛋白的结构研究。这些实验方法成功地应用于紫色震颤菌血红蛋白（ｍｅｔ－ＶｔＨｂ－ＣＮ）。通过这些实验找到了与血红素Ｆｅ３＋配位的组氨酸,并完成了该金属蛋白的顺磁位移的共振峰的识别、活性中心质子间距离的测量、抗磁性化学位移及电离常数ｐＫａ值的确定。     

低频、低压交变电场对成骨细胞增殖的影响

低频、低压交变电场能够促进成骨细胞的增殖。成骨细胞受交变电场作用以后,运用ＭＴＴ方法和流式细胞术,检测细胞的增殖情况。结果表明：电场作用后的细胞,与对照组细胞相比,细胞数目增多,Ｓ期细胞百分比增高。运用荧光标记技术检测细胞膜流动性以及胞内游离Ｃａ２＋浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）的变化,初步探索电场对细胞增殖影响的作用机制。     

黑龙江省鸟类三种新纪录

在我国统一进行的陆生野生动物普查中,黑龙江省调查队小兴安岭分队在１９９７年对黑河地区的逊克县、孙吴县调查中,观察到了池鹭（Ａｒｄｅｏｌａｂａｃｈｕｓ）、红胸田鸡（Ｐｏｒｚａｎａｆｕｓｃａ）、黑嘴鸥（Ｌａｒｕｓｓａｕｎｄｅｒｓｉ）。这３个种类都为黑龙江...     

蝮蛇抗栓酶治疗Ⅲ期高血压病36例

１９９４年２月至１９９５年１０月,我院采用蝮蛇抗栓酶治疗Ⅲ期高血压病３６例,效果满意,现报告如下：１一般资料１．１病例选择３６例病例均为本院住院病人和脑卒中门诊康复治疗的病人,有明确的高血压病史５～２０年不等,长期服用降压药物,血压不稳定。其中合并脑...     

基于金属有机沸石咪唑骨架的固定化细胞的制备及其在丙谷二肽制备中的应用

来源于鞘氨醇杆菌(Sphingobacterium siyangensis)中的α-氨基酸酯酰基转移酶(α-amino acid ester acyltransferase, SAET),是目前发现的丙谷二肽催化合成能力最高的酶之一,能够以非保护的L-丙氨酸甲酯盐酸盐、L-谷氨酰胺合成L-丙氨酰-L-谷氨酰胺[即丙谷二肽(L-alanyl-L-glutamine, Ala-Gln)]。为了解决其在催化过程中的稳定问题,本研究在水相体系中采用“一步法”快速制备固定化细胞(SAET@ZIF-8),在构筑金属有机沸石咪唑骨架结构(ZIF-8)的同时,将表达有SAET的大肠杆菌(Escherichia coli)包裹在其内部空间中。在此基础上,对其结构、催化活性和重复使用性及储存稳定性等催化性能进行探究。结果表明,通过该方法制备的SAET@ZIF-8纳米颗粒与文献报道的ZIF-8材料的形貌基本相同,细胞的引入没有明显改变ZIF-8的形貌。重复使用7次后,SAET@ZIF-8仍能保持67%左右的初始酶活;室温下放置4d时,固定化酶还保留有50%左右的初始酶活,表明SAET@ZIF-8具有较好的重...     

广西主要金花茶组植物的花粉形态及其分类学意义

金花茶组(Sect. ChrysanthaChang)植物分布狭窄,大部分野生金花茶资源仅分布于广西壮族自治区防城港市,具有较高的观赏价值、食用价值和药用价值。本研究应用光学显微镜和扫描电子显微镜对广西防城金花茶国家级自然保护区的18种(包括4变种)金花茶组植物的花粉进行了观察和研究,详细地描述了它们的花粉形态。结果表明,金花茶组植物的花粉平均大小为37.6μm×28.5μm,沟长为32.9μm,极轴/赤道轴(P/E)值为1.35。单粒花粉呈近球形或长球形,具三拟孔沟或三孔沟,内孔横长,外壁具有细微的瘤状、脑纹状或颗粒状纹饰,符合山茶属花粉形态的一般特征。花粉外壁纹饰在各个种间又存在较明显差异,可作为金花茶组植物进一步分类鉴定的依据。最后,结合聚类分析结果及花粉形态的演化规律分析研究了金花茶组植物花粉的演化规律和分类学意义,为探究金花茶组植物的迁移和演化提供重要参考依据。     

栝楼核糖核酸酶的性质研究

关于栝楼核糖核酸酶的性质已经研究.它对核糖核酸和多聚尿嘧喧核苷酸所显示的酶活性,有很大的相似性:(1)栝楼核糖核酸酶的最适度应pH在5左右;(2)稳定的pH范围在5-12之间;(3)最佳反应温度为55℃左右;(4) 热稳定性:在15分钟内,60℃以下酶活性基本稳定,在65℃左右时大约有50%的活性丧失;(5)金属离子中,除CU~(2+)和Ag~+有明显的抑制作用外、一般作用不明显.另外,酸对其它合成的多聚核苷酸的水解作用,显示有碱基特异性;对双链RNA(CPV RNA)也显有活性.实验中未发现该酶有磷酸单酯酶的活性及降解DNA的活性.因此,该酶可能是一种具有碱基特异性的核糖核酸酶.     

小肽激素调控植物生长发育及逆境生理研究进展

小肽激素通常是指含5-100个氨基酸长度的肽段。在植物体内小肽激素含量很低、分子量小、数量多、来源及加工成熟机制复杂,这赋予了小肽多种多样的生物学功能,能够在极低浓度下与受体结合,调节植物的细胞分裂与生长、组织与器官分化、开花与结实、成熟与衰老等生理过程,协调植物响应多种胁迫环境。小肽激素作为细胞间信号转导的重要介质,参与调控生长发育的分子机制是近年来植物学科研究的热点和前沿。本文系统综述了小肽激素的结构、分类及其功能研究进展,重点讨论了CLE、RALFs、PSK、CIF、SYS等家族调控植物生长发育及逆境生理的研究进展,并展望了植物小肽激素的应用前景,为植物小肽激素的深层次研究和开发应用提供了重要的理论基础。