细胞dNTP库的稳态维持与基因组稳定性

作为DNA合成的重要前体,细胞中4种脱氧核糖核苷三磷酸(dATP、dTTP、dGTP和dCTP)是DNA复制、重组和修复所必需的原材料,而DNA的正确合成及其完整性则是基因组稳定性的重要体现,因此dNTP库状态的稳定对维持基因组的稳定进而保证细胞的稳定至关重要.从dNTP库的质量上讲,一些异质dNTP如氧化的dNTP掺...     

猪链球菌谷氨酰胺tRNA合成酶的原核表达产物的小鼠免疫试验

【目的】猪链球菌谷氨酰tRNA合成酶(Glutamyl tRNA Synthetase,GtS)是一种催化谷氨酰胺与对应的tRNA发生酯化反应形成谷氨酰tRNA的蛋白酶。本研究通过小鼠免疫保护力实验来评价Gts的免疫原性。【方法与结果】使用clustalX对GenBank中链球菌属的GtS进行同源性分析,结果显示GtS的氨基酸序列在链球菌属内同源性达到95%以上。利用原核表达系统在大肠杆菌BL21中表达(His)6-GtS融合蛋白。SDS-PAGE和Western blot结果表明该融合蛋白在BL21菌株中高效表达,并且具有良好的免疫原性。融合蛋白经过组氨酸标签纯化试剂盒(Novagen)纯化后获得纯度为93.3%、浓度为433μg/mL的重组蛋白rGtS。在小鼠免疫保护试验中,使用rGtS混合弗氏佐剂免疫Balb/c小鼠。免疫过后用4倍LD50剂量的SC19菌株(1.2×109CFU)攻毒,rGtS免疫组小鼠的存活率达50%(4/8),高于空载体对照(1/8)。【结论】本研究证实rGtS融合蛋白具有良好免疫原性,能够提供部分的保护,是一种非常有潜力的亚单位疫苗候选蛋白。     

毛栓菌(Tramets trogii)液体培养产漆酶的研究

实验研究了碳源、氮源和综合因素对毛栓菌(Tramets trogii)液体培养产漆酶和生长情况的影响。碳源为玉米面、氮源为豆饼粉时,菌株的产漆酶酶活最高;碳源为可溶性淀粉,氮源为麦麸时,对菌株的生长有利;在液体条件下,菌株产漆酶的最佳培养基组成为玉米面3.5%,豆饼粉4.0%,KH2PO40.3%,MgSO40.15%,VB10.04%。     

产漆酶真菌的筛选及其固态发酵条件研究

用愈创木酚平板法对14株白腐真菌进行初筛,通过测定漆酶活力进行复筛,筛选出1株生活力较强,产漆酶活力高的菌株MZ-1,经ITS-5.8S rDNA序列分析,初步鉴定为Trametes versicolor。在固态发酵培养基的基础上,对该菌株产漆酶的培养基组成进行正交优化,得到最优发酵培养基:麸皮∶秸秆粉∶豆粕∶玉米粉为3∶3∶2∶1,可溶性淀粉2%,(NH4)2SO4+蛋白胨1%,KH2PO40.1%,料水比1∶2。接种4个菌塞,温度为30℃,发酵8 d后酶活可达到1 555.57 U/g。     

HPLC法测定病毒性疫苗中EDTA二钠残余量

实验中用高效液相色谱法测定病毒性疫苗中乙二胺四乙酸二钠残余量。EDTA二钠与FeCl3反应生成的络合物NaFeEDTA在257nm波长处有明显吸收,以C18柱将它与其余组分分开后,用外标法建立五级校正曲线可测定制品中EDTA-2Na含量。该方法准确,快速,可用于检测病毒性疫苗中残余乙二胺四乙酸二钠。     

剑阁县2001-2010年法定传染病流行特征及防治对策分析

目的：通过分析10年法定传染病疫情的流行趋势和三间分布特征,为制定传染病预防控制策略和措施提供依据。方法：采用描述性流行病学方法分析疫情趋势和三间分布情况,数据资料用SPSS10．0和Excel2003进行统计分析。结果：2001～2010年共报告乙、丙类传染病25种26129例,年均发病率386．89／10万,年均死亡率0．15／10万,10年间报告法定传染病以血源及性传播传染病和呼吸道传染病为主,居第1位的是血源及性传播传染病,共报告5种12453例,占53．03％;其次是呼吸道传染病,共报告5种9828例,占41．85％,近3年发病居于各类传染病首位;第三位的是肠道传染病,共报5种1149例,占4．89％。发病居前5位的传染为乙肝、肺结核、流行性腮腺炎、痢疾、麻疹,主要传染病以乙肝、肺结核为主,近年性传播疾病呈快速增长趋势。结论：血源及性传播传染病和呼吸道传染病是今后重点防控传染病。     

利用甘蔗糖蜜酒精发酵液生产腐植酸的菌种鉴定及发酵条件研究

从土壤中筛选出一株适合用甘蔗糖蜜酒精发酵液生产腐植酸的菌株H812。单因素实验和正交实验结果表明,该菌株培养的最适酒精发酵液浓度为16°Bx,最适培养条件为:时间8d、温度34℃、摇床转速200r/min、初始pH7.0、接种量12%和装液量50ml/250ml,其中温度对发酵产品影响显著。在优化的条件下,腐植酸产量为38.12 g/L,较优化前提高了148.34%。对H812菌株进行形态特征分析以及ITS序列分析,推测该菌株为曲霉属真菌。     

TLR4 对人骨骼肌细胞炎症因子表达及胰岛素抵抗的影响

目的:研究TLR4对脂多糖(LPS)及Polymymin B(PMB)作用下的人骨骼肌细胞的炎症因子表达的影响及其在细胞胰岛素抵抗中的作用。方法:通过脂多糖(LPS)及Polymymin B(PMB)干预骨骼肌细胞24h,再用胰岛素刺激1h后,Real-time PCR检测检测骨骼肌细胞TLR4、MyD88、TNF-αmRNA的表达;Western blot检测TLR4,Myd88和CRP的表达;葡萄糖氧化酶法(GOD-POD法)检测细胞培养液中葡萄糖浓度。结果:TLR4高表达可以使炎症因子的表达增高,细胞培养液中的葡萄糖浓度增高;TLR4低表达可使炎症因子的表达降低,细胞培养液中的葡萄糖浓度没有明显变化。结论:TLR4调控了炎症因子的表达,继而可以引起胰岛素敏感性的改变,影响了胰岛素抵抗的发生。     

抑癌基因p53 在肝癌组织中的异常表达及临床意义

目的:探讨抑癌基因p53在肝癌组织中表达及临床意义,为肝癌的治疗提供新的思路。方法:回顾性分析了2006年1月～2009年8月收治的40例肝癌患者的临床资料,采用免疫组织化学法测定肝癌组织、癌旁组织和正常组织中抑癌基因p53的表达,并分析不同肿瘤分化程度患者p53的表达。结果:p53阳性表达率在在肝癌组、癌旁组分别为47.5%和2.5%,在正常组未检测到p53阳性表达,三组之间比较有显著性差异(x2=6.515,P=0.024);高分化癌P53蛋白阳性表达率低,中低分化癌P53蛋白阳性表达率高,组比较均有显著性差异(P<0.05),中、低分化组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在肝癌组织中存在p53基因的高表达,其阳性表达与肿瘤分化程度有关。     

伤寒带菌与胆囊癌形成

近年来,世界范围内伤寒发病人数有所上升,每年大约有2100万人感染,近5％感染者会发展成慢性带菌者.慢性带菌状态发展成胆结石的危险性很高,胆结石表面形成的生物膜有助于保持慢性带菌状态,进而可能发展成胆囊癌.胆囊癌比较少见,但在某些国家和地区发病率高,且女性胆结石和胆囊癌的发病率是男性的2倍多.慢性带菌状态不仅是胆囊癌发生的危险因素,也是其他癌症发生的危险因素.本文就伤寒带菌状态与生物膜和胆结石的形成及发展成胆囊癌的相关性研究进行综述.