原发性高血压患者血压昼夜节律与靶器官损害的关系研究

目的:研究原发性高血压患者血压昼夜节律异常是否与靶器官损害存在关联。方法:将2015年2~11月份在我院治疗的94例原发性高血压病人按照血压昼夜节律是否正常分为节律正常组52例和异常组42例。比较两组患者的24h、白天、夜间的收缩压(SBP)与舒张压(DBP)及血压负荷,并且比较两组患者心脏、脑、肾损伤相关指标。结果:异常组全天24h、白天、夜间SBP及DBP,血压负荷均高于正常组,差异具有统计学意义(P0.05)。异常组患者左室重量(LVM)和左室重量指数(LVMI)、发生心肌缺血次数及持续时间、发生脑梗死几率均明显高于正常组,差异有统计学意义(P0.05)。异常组尿微量白蛋白(MAU)、尿酸(UA)水平均高于正常组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:原发性高血压患者出现昼夜节律异常,可能对相关靶器官造成损伤。     

孤儿核受体Nur77对缺/复氧损伤中心肌细胞自噬的调节

目的:研究孤儿核受体Nur77对缺/复氧损伤中心肌细胞自噬的调节作用。方法:差速贴壁法分离乳鼠心肌细胞,经免疫荧光染色鉴定纯度。缺氧(1%O_2、5%CO_2和94%N_2)培养12 h后,常氧培养2 h构建心肌细胞缺/复氧损伤。实时定量PCR和western blot的方法检测Nur77的表达变化。通过siRNA转染抑制心肌细胞nur77表达,通过自噬标志蛋白表达改变作为细胞自噬水平的变化。结果:原代分离的心肌细胞纯度95%以上。缺氧12 h和缺/复氧(12 h/2 h)刺激后,心肌细胞中Nur77表达都明显升高(P0.01)。与缺氧组相比,缺/复氧组细胞质中的水平明显增加(P0.01),细胞核中Nur77水平无明显变化。抑制Nur77后,缺/复氧组自噬水平明显降低,缺氧组心肌细胞自噬水平无明显变化。结论:Nur77参与缺/复氧损伤中心肌细胞自噬水平的调节。     

自噬在急性心肌梗死发病中作用的研究进展

自噬是生物细胞内普遍存在且高度保守的一种生理过程,其通过溶酶体融合降解细胞内的大分子组分、受损的细胞器以及侵入胞内的病原菌,以达到维持细胞稳态的目的。自噬在多种疾病的发生发展中也发挥十分重要的作用,尤其是心血管疾病。自噬对其病程的发展可以发挥两种截然不同的作用。适当的自噬作用可以降低炎症反应和氧化应激促进细胞的存活,以及通过减少泡沫细胞的形成而对维持心血管的正常功能起一个保护作用;但过度的自噬作用会对细胞造成不可逆的损伤,诱导细胞发生不依赖于caspase的自噬性细胞死亡,增加局部的炎症反应,从而促进动脉粥样硬化病变的发展。本文就自噬在急性心肌梗死发生发展中作用的研究进展进行了综述,探讨自噬成为预防及治疗心血管疾病新靶标的可能性。     

鞘鞍醇激酶-1抑制剂PF-543改善1型糖尿病心肌纤维化的实验研究

目的:研究鞘鞍醇激酶-1抑制剂PF-543对1型糖尿病心肌纤维化的影响及其机制。方法:取60只8周龄雄性C57BL6J小鼠,随机分为对照组、对照+PF-543组、1型糖尿病组及1型糖尿病+PF-543组。采用禁食后一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ,150 mg/kg)构建1型糖尿病模型。造模后每天通过腹腔注射给予溶媒或PF-543(1 mg/kg),持续至造模后第16周末。造模第16周末采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测心肌组织1-磷酸鞘鞍醇(S1P)浓度;采用心脏超声评估心脏收缩与舒张功能;Masson三色法染色以评估心肌纤维化情况;Western blot检测心脏转化生长因子-β1(TGF-β1)、I型胶原蛋白(Col I)、Ⅲ型胶原蛋白(Col Ⅲ)表达水平。结果:1型糖尿病+PF-543组小鼠血浆及心肌S1P水平显著低于1型糖尿病组(所有P0.05)。超声结果显示,1型糖尿病+PF-543组小鼠心脏左心室射血分数(LVEF)显著高于1型糖尿病组(65.7±3.3%vs 54.4±3.4%,P0.05),左心室舒张末期内径(LVEDD)显著小于1型糖尿病组(3.81±0.21mm vs 4.52±0.20mm,P0.05)。Masson三色法染色显示1型糖尿病+PF-543组心肌纤维化程度显著低于1型糖尿病组(7.13±0.32%vs 10.21±0.41%,P0.05)。1型糖尿病+PF-543组小鼠心脏TGF-β1、Col I与Col Ⅲ蛋白表达水平均低于1型糖尿病组(所有P0.05)。结论:鞘鞍醇激酶-1抑制剂PF-543可显著降低1型糖尿病小鼠血浆与心脏S1P水平,降低心脏TGF-β1表达与胶原蛋白沉积,改善1型糖尿病小鼠心脏纤维化与心功能。     

东方白鹳粪便总DNA五种提取方法的比较

本研究比较东方白鹳(Ciconia boyciana)粪便总DNA的5种提取方法,旨在为后续物种性别鉴定和DNA条形码鉴定提供合适的方法.采用十六烷基三甲基溴化铵法(CTAB法)、十二烷基磺酸钠裂解法(SDS法)、Tiangen试剂盒法、Qiagen试剂盒法和异硫氰酸胍法(GuSCN法)对取自天津动物园的东方白鹳新鲜粪...     

人PRKAG2全长基因的体外拼接及TA克隆载体的构建

目的:应用体外基因拼接及TA克隆技术构建含PRKAG2基因的载体.方法:通过商业途径购得PRKAG2基因的一个转录变体cDNA质粒(GenBank登记号BC 068598),其在N端缺失了44个氨基酸,根据已知的PRKAG2基因序列(GenBank登记号NM_016203),设计搭桥引物及序列扩增引物,通过PCR搭桥方法,合成完整全序列的PRKAG2基因,并将其克隆到TA载体,将得到的阳性克隆测序鉴定.结果:拼接出全长1759bp的PRKAG2基因,目的基因连接到载体后测序与设计的PRKAG2基因完全一致.结论:成功的构建了全长人PRKAG2基因的TA克隆,为进一步研究PRKAG2基因的功能提供了模板.     

慢性心力衰竭患者心脏再同步化治疗的疗效及其影响因素分析

目的:观察慢性心衰患者经心脏再同步化治疗(cardiac resynchronization therapy,CRT)的临床疗效,并分析CRT无应答的影响因素。方法:入选2010年1月至2015年7月上海长海医院心血管内科因心衰接受CRT的患者共47例,收集病史资料、手术资料、术后资料以及随访,比较CRT有无应答患者的临床特征,并通过多因素回归分析CRT无应答的危险因素。结果:纳入病例数共47例,其中CRT应答34例(72.3%),CRT无应答13例(27.7%)。CRT无应答组中心房颤动和冠脉问题发生率明显高于CRT应答组(P0.05);CRT应答组中左心房容积、右心房容积、左心室容积以及二尖瓣返流量均明显低于CRT无应答组(P0.05)。多因素回归分析显示患者合并心房颤动或冠脉问题是CRT无应答可以影响CRT的应答。结论:CRT对慢性心衰患者具有较好的疗效,而合并心房颤动或冠脉问题是预测慢性心衰患者CRT无应答的独立影响因素。     

高糖诱导内皮细胞损伤microRNA表达紊乱的体外研究

目的:研究高糖诱导的内皮细胞损伤微小RNA(microRNA,miRNA)的表达变化。方法:常规培养的人冠状动脉内皮细胞,利用不同浓度D-葡萄糖溶液(0 mmol/L、5 mmol/L、15 mmol/L和25 mmol/L),诱导刺激24 h后分别用CCK-8法和流式细胞术检测其生长活力和凋亡水平。收集细胞总RNA,利用实时定量PCR(Quantitative real-time PCR,q RT-PCR)检测miRNA的表达变化,同时利用TargetScan、PicTar等生物信息学预测软件预测可能的靶基因。结果:高糖溶液(25 mmol/L)刺激内皮细胞后,细胞生长活力明显降低,为对照组的67.5%(P0.01),凋亡水平为对照组的4.5倍(P0.01)。QRT-PCR结果显示miRNA的表达出现了明显的紊乱,其中miR-451、miR-504、miR-302d、miR-18b*、miR-198、miR-328和miR-517c明显下调,miR-29c、miR-100*、miR-137、miR-660和miR-217明显上调(P0.05)。靶基因预测发现miR-217和miR-451可能调控内皮细胞功能相关的多个基因的表达。结论:在高糖诱导的内皮细胞损伤中,miRNA表达紊乱提示其可能参与内皮细胞功能。     

不同地理纬度笼养狼肠道菌群多样性比较研究

动物肠道菌群关系其健康状态,而菌群组成受到生活环境等因素的影响,探究其中关系有利于更好地进行物种保护。本研究基于非损伤性取样,利用16S rDNA高通量测序技术,开展不同地理纬度笼养国家二级重点保护野生动物狼（Canis lupus）的肠道菌群结构比较和初步功能预测。针对取自天津市动物园（38°88′N）和南京市红山森林动物园（31°14′N）两地饲养的狼粪便样本（分别简称为天津样本和南京样本）进行高通量测序,利用生物信息学比较分析两组样本的微生物组成和多样性差异。结果表明：Student’s t和Welch’s t检验显示南京样本的α多样性显著高于天津样本。在门水平上,厚壁菌门（Firmicutes）和放线菌门（Actinobacteria）是两组样本中的优势菌门,天津样本中弯曲杆菌门（Campilobacterota）的丰度显著高于南京样本。在属水平上,两组样本的肠道菌群中优势菌属均包括艰难梭菌属（Peptoclostridium）、柯林斯菌属（Collinsella）和狭义梭菌属（Clostridium＿sensu＿stricto＿1）。基于Unweighted UniFrac距...     

栖土曲霉中性蛋白酶的研究*

栖土曲霉(Aspergillus terricola)3.942经~60Co-v射线诱变处理,得到抗克念菌素变异株NK71,并对其培养条件进行了优化,使产酶提高了76%。用单宁酸沉淀法提取此酶,并用DEAESephadex离子交换层析法进一步纯化。纯化酶的最适反应温度40—50℃,最适pH7,在pH5—7.5、低于40℃时稳定。