17-AAG对大鼠颈总动脉球囊损伤后内膜增生的影响及其作用机制

目的:研究17-丙烯胺-17去甲氧格尔德霉素(17-Allylamino-17-emethoxy-geldanamycin, 17-AAG)对球囊损伤后大鼠颈总动脉内膜增生的影响及可能作用机制。方法:将清洁级雄性SD大鼠36只按照随机数字法分为假手术组(Sham组)12只、球囊损伤组(Balloon injury, BI组)12只及17-AAG治疗组(17-AAG组)12只。采用2F Fogarty球囊建立大鼠颈总动脉球囊损伤组模型,17-AAG治疗组大鼠在建模后腹腔注射17-AGG(20 mg/kg 2d)。各组大鼠于球囊损伤3周后取损伤段颈总动脉,通过HE染色观察血管内膜形态学改变并评估内膜增生情况,免疫组化染色(Immunohistochemical staining,IHS)法检测血管壁增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达,评估血管平滑肌细胞的增殖情况。流式细胞术检测血管平滑肌细胞的凋亡情况。结果:BI组、17-AAG组大鼠球囊损伤后颈总动脉内膜出现不同程度增生,内膜/中膜面积比(Intima area/Membrane area,I/M)均较Sham组显著升高(P0.05);17-AAG组的I/M较BI组明显下降(P0.05)。BI组、17-AAG组颈总动脉PCNA表达水平较Sham组明显升高(P0.05),较BI组显著降低(P0.05)。BI组、17-AAG组大鼠血管平滑肌细胞凋亡率较Sham组显著升高(P0.05);17-AAG组大鼠血管平滑肌细胞凋亡程度较BI组明显升高(P0.05)。结论:17-AAG对球囊损伤后颈总动脉内膜增生存在抑制作用,其机制可能是通过提高血管平滑肌细胞凋亡率影响其增殖程度。     

2型糖尿病患者血糖漂移水平与动脉脉搏波速度的相关性研究

目的:研究2型糖尿病患者血糖漂移水平与动脉脉搏波速度的关系。方法:共入选82例2型糖尿病患者作为研究对象。所有研究对象应用自动脉搏波速度测定仪测定颈动脉-股动脉脉搏波速度(CFPw V);采用动态血糖检测系统(CGMS)及全自动生化分析仪进行检测,收集空腹血糖(FBG)、餐后2小时血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血糖水平标准差(SDBG)、平均血糖波动幅度(MAGE)、最大血糖波动幅度(LAGE)、昼间血糖漂移幅度(MODD)等血糖参数。根据CGMS检测结果将82例2型糖尿病患者分为血糖低漂移组(47例)和血糖高漂移组(35例),比较两组中各血糖参数及CFPw V水平,计算两组动脉硬化发生率,并将各血糖参数与CFPw V进行Pearson相关性分析。结果:与血糖低漂移组比较,2hPG、SDBG、MAGE、LAGE、MODD、CFPw V在血糖高漂移组中升高(P0.05);血糖高漂移组中动脉硬化的发生率高于血糖低漂移组(P0.05);Pearson相关性分析分析显示2hPG、MAGE、LAGE、MODD与CFPw V相关(P0.05)。结论:本研究中,82例2型糖尿病患者存在不同程度的动脉硬化;2hPG、MAGE、LAGE、MODD是2型糖尿病患者CFPw V升高的相关因素,提示血糖漂移进一步加重动脉硬化,参与动脉硬化的发生发展。应该重视对血糖漂移的控制,减少动脉硬化的发生率,延缓动脉硬化的发展。     

姜黄素预处理通过上调miR-21缓解多柔比星心肌毒性

目的:探究miR-21是否介导姜黄素(Cur)预处理抗多柔比星(DOX)心肌毒性作用。方法:体外分离培养大鼠原代心肌细胞,用DOX处理24 h建立心肌毒性离体模型。姜黄素于DOX处理前12 h加入心肌细胞培养液中。实验分组如下:Control组;Cur组;DOX组;Cur+DOX组;miR-21i(miR-21抑制剂)+Cur+DOX组;miR-21i+DOX组。DOX处理24 h后检测miR-21表达情况、细胞活力、凋亡和氧化应激相关指标。结果:与DOX组相比,姜黄素预处理可呈剂量依赖性地提高DOX处理后心肌细胞活力,且浓度为5μM时效果最佳。此外,姜黄素预处理可以明显提高Bcl-2和miR-21表达,降低心肌Bax和cleaved Caspase-3表达、凋亡率以及心肌细胞活性氧(ROS)产量和丙二醛(MDA)含量。而用miR-21i下调miR-21表达可明显削弱姜黄素预处理对DOX心肌损伤的上述保护作用(均P0.05)。结论:姜黄素预处理可通过上调miR-21表达,缓解心肌凋亡和氧化应激损伤,进而缓解DOX心肌毒性。     

室间隔缺损介入封堵和外科手术对瓣膜功能影响的对比研究

目的:通过对介入封堵治疗的室间隔缺损患者进行中长期临床随访,并和同期行外科修补手术的室间隔缺损患者进行对比,分析两种术式对心脏瓣膜功能的影响。方法:选择行介入封堵治疗患者279例(介入组),行外科手术修补治疗患者243例(手术组)。利用超声心动图检查瓣膜反流发生情况及随访转归情况,并对两组瓣膜反流的发生率进行对比研究。结果:术后短期介入组二尖瓣反流发生率较手术组高(P0.05),三尖瓣和主动脉瓣反流发生率两组相比无统计学差异。中长期随访中,三尖瓣反流、主动脉瓣反流以及二尖瓣反流两组相比均无统计学差异。结论:室间隔缺损介入封堵治疗疗效确切,安全性高,创伤较小。术前利用超声心动图对患者的严格筛选,术中熟练轻柔稳定的操作和适合封堵器的选择是减少介入封堵术后发生瓣膜反流最重要的因素。     

17-AAG 对颈动脉球囊损伤大鼠血管平滑肌细胞增殖影响的实验研究

目的：研究17- 丙烯胺-17 去甲氧格尔德霉素（17-Allylamino-17-emethoxy-geldanamycin, 17-AAG）对球囊损伤后大鼠颈动脉 血管平滑肌细胞增殖的影响。方法：选取雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠30 只,随机数字法分为球囊损伤（Balloon injury,BI）组10 只、球囊损伤+17-AAG 低剂量治疗（Balloon injury+Low dose AGG,BIL）组10 只、球囊损伤+17-AAG 高剂量治疗（Balloon injury+High dose AGG,BIH）组10只。建立大鼠颈动脉球囊损伤模型,病理学评估血管内膜增生情况。各组于球囊损伤28 天后取 材,将损伤区域的血管段取材固定,苏木精- 伊红染色（HE）观察血管并测量内膜面积（Intimal Area, IA）、中膜面积（Membrane Area,MA）,计算内膜/中膜面积比（IA/MA）,以评估内膜增生情况;同时,利用免疫荧光染色（Immunofluorescence staining, IFS）观 察增殖细胞核抗原（Proliferating cell nuclear antigen, PCNA）表达的情况,以评价血管平滑肌细胞的增殖情况。结果：大鼠颈动脉球 囊损伤模型成功建立。HE 染色后计算血管I/M比值,结果表明BIL组与BI组血管I/M 比值无统计学差异（P>0.05）,BIH 与BI组 血管I/M比值有统计学差异（P<0.05）。IFS结果表明,BIL组血管壁PCNA 表达较BI组略有降低,但无统计学意义（P>0.05）。BIH 组血管壁PCNA表达较BI组明显减低,有显著统计学差异（P<0.05）。结论：一定浓度的17-AAG可明显的抑制球囊损伤后颈动脉 血管平滑肌细胞增殖;17-AAG可以成为球囊损伤后大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制剂。     

益生菌对稳定性冠心病患者血清TMAO水平的影响及 与血清炎性因子水平的相关性

目的探究益生菌对稳定性冠心病(SCAD)患者血清氧化三甲胺(TMAO)水平的影响及其与血清炎性因子水平的相关性。方法选取我院2017年6月至2018年1月间诊断及治疗的SCAD患者74例,采用随机数表法分为益生菌组(37例)与对照组(37例),对照组予以稳定型冠心病标准治疗,益生菌组在对照组的基础上口服益生菌制剂,金双歧,2 g/次,3次/d,疗程均为2个月,比较治疗前后患者血液中TMAO、TNF-α、IL-6、IL-8、CRP水平及大便中双歧杆菌载量,使用Pearson相关性分析模型探究细菌载量与TMAO、TNF-α、IL-6、IL-8、CRP水平的相关性。结果治疗前两组TMAO、TNF-α、IL-6、IL-8及CRP水平无明显差异(Ps0.05),治疗后两组上述指标均显著下降(Ps0.05),其中益生菌组TMAO、TNF-α及CRP水平显著低于对照组(t=2.702,4.301,2.632;P=0.009,0.000,0.010)。治疗前两组患者大便中双歧杆菌载量无明显差异(P0.05),治疗后益生菌组双歧杆菌载量显著提高(t=4.382,P=0.000),且显著高于对照组(P0.05)。Pearson相关性分析显示,双歧杆菌载量与TMAO、TNF-α水平存在显著负相关(r=-0.706,-0.427;P=0.000,0.017)。结论益生菌可有效改善SCAD患者TMAO水平,其与TMAO、TNF-α水平呈显著负相关。     

鞘鞍醇激酶-1抑制剂PF-543改善1型糖尿病心肌纤维化的实验研究

目的:研究鞘鞍醇激酶-1抑制剂PF-543对1型糖尿病心肌纤维化的影响及其机制。方法:取60只8周龄雄性C57BL6J小鼠,随机分为对照组、对照+PF-543组、1型糖尿病组及1型糖尿病+PF-543组。采用禁食后一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ,150 mg/kg)构建1型糖尿病模型。造模后每天通过腹腔注射给予溶媒或PF-543(1 mg/kg),持续至造模后第16周末。造模第16周末采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测心肌组织1-磷酸鞘鞍醇(S1P)浓度;采用心脏超声评估心脏收缩与舒张功能;Masson三色法染色以评估心肌纤维化情况;Western blot检测心脏转化生长因子-β1(TGF-β1)、I型胶原蛋白(Col I)、Ⅲ型胶原蛋白(Col Ⅲ)表达水平。结果:1型糖尿病+PF-543组小鼠血浆及心肌S1P水平显著低于1型糖尿病组(所有P0.05)。超声结果显示,1型糖尿病+PF-543组小鼠心脏左心室射血分数(LVEF)显著高于1型糖尿病组(65.7±3.3%vs 54.4±3.4%,P0.05),左心室舒张末期内径(LVEDD)显著小于1型糖尿病组(3.81±0.21mm vs 4.52±0.20mm,P0.05)。Masson三色法染色显示1型糖尿病+PF-543组心肌纤维化程度显著低于1型糖尿病组(7.13±0.32%vs 10.21±0.41%,P0.05)。1型糖尿病+PF-543组小鼠心脏TGF-β1、Col I与Col Ⅲ蛋白表达水平均低于1型糖尿病组(所有P0.05)。结论:鞘鞍醇激酶-1抑制剂PF-543可显著降低1型糖尿病小鼠血浆与心脏S1P水平,降低心脏TGF-β1表达与胶原蛋白沉积,改善1型糖尿病小鼠心脏纤维化与心功能。     

杭州市中青年健康体检人群甲状腺结节检出状况及影响因素分析

摘要 目的：调查研究杭州地区中青年健康体检人群甲状腺结节检出情况,分析发病影响因素。方法：回顾性分析2020年1月至2021年12月我院杭州市中青年健康体检者的体检资料,剔除体检信息不全及超声成像不满意者,共1920例纳入此次研究。设计结构化问卷收集体检人群人口学特征、生活方式资料。计算杭州市健康体检人群甲状腺结节检出率,分析甲状腺结节发病影响因素。结果：1920例杭州市中青年健康体检者中,共检出甲状腺结节632例（32.92%）。甲状腺结节发病影响因素的单因素分析发现,甲状腺结节组和非甲状腺结节组在性别、婚姻状况、饮食、运动、吸烟、饮酒、睡眠、体质指数、总胆红素、谷丙转氨酶、高密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖等方面比较,差异有统计学意义（P<0.05）。多因素Logistic回归分析显示,性别、婚姻状况、饮食、运动、吸烟、饮酒、睡眠、高密度脂蛋白胆固醇是甲状腺结节发病的独立影响因素（P<0.05）。结论：杭州市中青年健康体检人群甲状腺结节检出率较高,应加强筛查力度,提高健康素养,改变生活方式,降低甲状腺结节的发病率。     

PRKAG2-AS1通过AMPK抑制缺氧所致心肌细胞凋亡

目的:探讨PRKAG2-AS1在缺氧所致心肌细胞凋亡中的作用及其可能机制。方法:以人心肌细胞系作为主要研究对象,使用RNA核质分提的方法检测PRKAG2-AS1在细胞中的表达分布模式。将人心肌细胞系分为常氧对照组及低氧组,分别置于常氧环境(21% O2)和低氧环境(1% O2)培养12小时,构建心肌细胞缺氧模型,AnnexinV-FITC/PI流式细胞学检测细胞凋亡,Real-time PCR检测模型中SOD mRNA及PRKAG2-AS1基因表达。对常氧培养条件下心肌细胞通过siRNA及反寡义核苷酸方法分别靶向敲低胞质及胞核内PRKAG2-AS1的表达水平,AnnexinV-FITC/PI流式细胞学检测细胞凋亡,观察PRKAG2-AS1对心肌细胞凋亡的影响;Real-time PCR检测SOD mRNA表达,Western blot检测AMPKγ2亚基蛋白的表达,观察PRKAG2-AS1对SOD mRNA及AMPKγ2蛋白表达的影响。结果:PRKAG2-AS1在心肌细胞胞质及胞核中均有表达,且以胞核为主。PRKAG2-AS1基因表达水平在心肌细胞缺氧模型中明显降低(P<0.05)。对常氧培养条件下心肌细胞,敲低PRKAG2-AS1基因表达,将导致细胞凋亡增加(P<0.05),且敲低胞核中表达细胞凋亡更为明显,同时,敲低PRKAG2-AS1能够引起SOD mRNA表达水平改变(P<0.05),且AMPKγ2蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:PRKAG2-AS1可能通过AMPK途径影响SOD表达,从而调控心肌缺氧损伤中的细胞凋亡。