家族性肥厚型心肌病一家系的调查分析

目的:分析一家族性肥厚型心肌病的特点。方法:对我院就诊的一肥厚型心肌病大家系进行临床调查研究,分析其临床特点,绘制家系图谱。结果:该家系为连续四代遗传,家系成员共35例,患者11例,猝死3例,死亡2例。有1例患者房颤及脑梗塞,2例患者行永久性起搏器植入术,猝死年龄最小3岁,符合肥厚型心肌病高发病率、高猝死率、发病年龄早等特点。结论:家族性肥厚型心肌病详细的家系调查有助于了解疾病全貌,更好地揭示其遗传规律。     

经皮介入封堵冠状动脉-肺动脉瘘治疗分析

目的:分析冠状动脉-肺动脉瘘(coronary artery-to-pulmonary artery fistula,CPAF)行经皮介入封堵治疗的可行性、安全性及疗效。方法:回顾性分析长海医院心内科于2009年7月至2016年2月之间接受经皮介入封堵术的58例CPAF患者的临床资料,排除合并其他复杂心脏病变而需要外科手术治疗的患者。结果:58名CPAF患者经介入封堵均获成功,平均植入封堵材料(2.35±0.87)枚。24名(41.38%)患者成功封堵后残余分流立即消失,34名(58.62%)患者仍有少量分流。未出现手术相关并发症。术后随访2~61个月,无出血、缺血等并发症。随访造影显示,其中3名(5.17%)患者出现了大量再通,后者随后均接受了再次封堵术并成功封堵。结论:经皮介入封堵CPAF切实可行,但应选择适宜患者,且需要经验丰富的术者操作。经治疗后冠状动脉瘘可能出现再通,因此对这些患者应进行随访造影或其他影像学检查。     

阿托伐他汀治疗冠心病的临床疗效及机制研究

目的:探讨阿托伐他汀治疗冠心病的临床疗效及其可能机制。方法:按照抽签法将170例冠心病患者分为对照组(n=85)及研究组(n=85),对照组予以常规治疗,研究组在对照组基础上使用阿托伐他汀治疗,比较两组治疗前后血清炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、C反应蛋白(CRP)]水平、氧化应激水平[血清丙二醇(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平]、血管内皮功能[血清一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)水平]、血脂水平及心功能的变化。结果:治疗后,研究组患者血清TNF-α、MMP-9、CRP、MDA、ET-1、总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)水平均显著低于对照组,而血清SOD、NO、高密度脂蛋白(HDL-C)左心室射血分数(LVEF)水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:阿托伐他汀可显著提高冠心病患者的心功能,可能与其有效抑制炎症、氧化应激和降低血脂水平有关。     

血浆脑钠肽对不同年龄急性冠脉综合征患者介入治疗术后临床预后的意义

目的：探讨并比较血浆脑钠肽（BNP）对不同年龄组急性冠脉综合征（ACS）患者经皮冠脉介入（PCI）术后临床主要不良心脏事件（MACE）的预测价值。方法：回顾分析2007年12月至2010年3月因ACS在我院行PCI的患者,分为260岁和〈60岁两组,入院常规检验BNP,随访住院期间及出院后6个月内MACE（包括死亡、心源性休克、再发心绞痛、非致命性再次心肌梗死、非致命性心力衰竭、心律失常、靶血管血运重建、再次入院复合终点）的发生情况。结果：随访269例260岁患者,失访7例（2．6％）,118例〈60岁患者,失访3例（2．5％）,262例≥60岁患者的年龄与BNP水平显著正相关（r=0．368,P〈0．01）,而115例〈60岁患者无显著相关性（r=-0．014,P〉0．05）。年龄≥60岁患者BNP水平与〈60岁患者比较,差异显著（P〈0．01）,年龄260岁患者MACE与〈60岁患者比较,差异显著（P〈0．01）,两组患者BNP水平与LVEF呈显著负相关（P均〈0．01）。多因素logistic回归分析显示：BNP可独立预测两组患者住院期间及出院后6个月内MACE（≥60岁OR=4．369P〈0．01;〈60岁OR=7．773P〈0．01）发生率。两组患者BNP水平对MACE预测的ROC曲线结果比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：不同年龄患者BNP水平及MACE发生率存在差异,但年龄并不影响BNP对ACS患者临床预后的预测价值。     

NGAL对直接PCI术后对比剂肾病的早期诊断价值

目的:评价NGAL在急性心肌梗死患者直接PCI术后预测CIN的诊断作用.方法:选择2009.01～2009.12我科收治的65例行直接PCI的急性心肌梗死患者,测定介入治疗前和术后8～12h、48h的血清肌酐变化情况,确定发生对比剂肾痛的患者.分别收集术前、术后8～12h血清标本置于-80℃冰箱,采用ELISA法测定各组血清中NGAL表达水平,观察术后NGAL浓度对CIN的诊断价值.结果:①145例术前肌酐正常的PCI患者,术后共有14例患者被诊断为CIN,其中研究组有8例(12.3%)、对照组有6例(7.5%)诊断为发生了CIN.②研究组中被诊断为CIN的患者术后8～12h血清NGAL的浓度与术前比较[(9.21±0.18 vs 4.05±1.30)ng/ml,p＜0.01]有显著差异,而术后8～12h Scr、BUN、GFR等指标与术前比较差异无统计学意义,血清NGAL较Scr提前至少24h诊断CIN.ROC曲线下的面积为0.851±0.052,AUC 95%的可信区间为(0.748,0.953).根据ROC曲线结果分析,NGAL预测CIN的临界点为9.04ng/ml,对应的灵敏度为78.6%,特异度为85.2%,③单变量分析示术前NGAL水平与GFR呈负相关,与Scr、BUN、舒张压(DBP)呈正相关;术后NGAL水平与GFR呈负相关,与Scr、对比剂用量呈正相关;多元Logistic回归分析显示Scr、GFR、对比剂用量是NGAL水平的独立影响因子.结论:NGAL对于AMI患者直接PCI术后发生的CIN具有良好的预测诊断作用,为早期诊断CIN提供了新思路.     

miR-22心肌特异转基因斑马鱼的构建及心肌肥厚的评估

目的:构建miR-22心肌特异转基因斑马鱼系,在体评估miR-22对于心肌肥厚的作用。方法:构建pTol2-CMLC2-miR-22-IRES-EGFP表达载体。通过显微注射的方法将tol2重组质粒于一细胞期注射入斑马鱼受精卵胚胎中,荧光筛选获得心肌特异表达绿色荧光的斑马鱼胚胎,并稳定表达传代。然后对稳定传代的成年斑马鱼心脏进行心肌肥厚及心功能的检测。结果:成功建立了miR-22心肌特异转基因斑马鱼系,通过定量PCR确定心肌中miR-22表达升高,荧光显微镜观察发现斑马鱼心肌出现绿色荧光。miR-22心脏特异过表达的转基因鱼系的成年鱼与野生对照组相比,出现了心肌肥厚的现象,心肌肥厚分子标志物nppa、myh7明显升高。斑马鱼心脏病理切片结果同样显示出miR-22心肌特异转基因斑马鱼出现了心肌肥厚的现象。结论:成功构建了miR-22心肌特异转基因斑马鱼,为研究心肌中miR-22的生物学功能提供了重要的工具,并证明miR-22心脏特异过表达会引起斑马鱼心肌肥厚。     

启动子优化提高重组大肠杆菌PHA产量

聚羟基脂肪酸酯(PHA)是一类由微生物合成的高分子聚酯的统称,具有生物可降解性、生物可再生性和良好的生物相容性,应用前景广阔。PHA具有类似塑料的材料学性能,倍受到科学界和工业界的关注,但是生产成本较高等原因极大地限制了其大规模应用。本研究通过筛选优化在微氧条件下能够高效调控基因表达的启动子,能有效提高生产菌株在微氧条件下积累PHA的能力,减少生产能耗,降低成本。首先,在大肠杆菌基因表达库中筛选出5个在微氧条件下高效调控基因表达的启动子,与编码红色荧光蛋白的RFP报告基因相连,通过酶标仪检测RFP的荧光信号值,对5个不同的微氧启动子的表达强度进行评估,比较得到其中最高效的启动子Pslp。为进一步提高生产PHA的效率,将2个Pslp序列采用串联的方式构建得到一个新启动子P2slp,利用其调控PHA代谢合成途径中3个关键基因phbC、phbA和phbB的表达。通过发酵扩大生产,在启动子P2slp的调控下,重组大肠杆菌的细胞干重由22 g/L提高至29 g/L,PHA的产量由49.1%提高至81.3%。本研究通过筛选优化启动子提高了重组大肠杆菌生产PHA的产量,为PHA的产业化应用提供了一种有效的提高PHA产量的方法,具有实际价值。     

姜黄素预处理通过上调miR-21缓解多柔比星心肌毒性

目的:探究miR-21是否介导姜黄素(Cur)预处理抗多柔比星(DOX)心肌毒性作用。方法:体外分离培养大鼠原代心肌细胞,用DOX处理24 h建立心肌毒性离体模型。姜黄素于DOX处理前12 h加入心肌细胞培养液中。实验分组如下:Control组;Cur组;DOX组;Cur+DOX组;miR-21i(miR-21抑制剂)+Cur+DOX组;miR-21i+DOX组。DOX处理24 h后检测miR-21表达情况、细胞活力、凋亡和氧化应激相关指标。结果:与DOX组相比,姜黄素预处理可呈剂量依赖性地提高DOX处理后心肌细胞活力,且浓度为5μM时效果最佳。此外,姜黄素预处理可以明显提高Bcl-2和miR-21表达,降低心肌Bax和cleaved Caspase-3表达、凋亡率以及心肌细胞活性氧(ROS)产量和丙二醛(MDA)含量。而用miR-21i下调miR-21表达可明显削弱姜黄素预处理对DOX心肌损伤的上述保护作用(均P0.05)。结论:姜黄素预处理可通过上调miR-21表达,缓解心肌凋亡和氧化应激损伤,进而缓解DOX心肌毒性。     

栖土曲霉中性蛋白酶的研究

栖土曲霉(Aspergillus terricola)3.942经~60Co-v射线诱变处理,得到抗克念菌素变异株NK71,并对其培养条件进行了优化,使产酶提高了76%。用单宁酸沉淀法提取此酶,并用DEAESephadex离子交换层析法进一步纯化。纯化酶的最适反应温度40—50℃,最适pH7,在pH5—7.5、低于40℃时稳定。