小分子靶标的核糖开关生物传感器研究进展

小分子化合物种类繁多，在众多生化过程中发挥关键作用，具有重要的检测意义与价值,其快速灵敏可视化检测技术的开发是当前的研究热点。基于核糖开关的生物传感器因具有识别特性高、操作简便、成本低等优势，为小分子检测提供了一条新途径。对核糖开关的来源、构成、调控机制、体内外筛选，特别是对基于小分子靶标的核糖开关生物传感器分类进行了介绍，并从核糖开关的筛选、裁剪、理性设计、核糖开关无细胞传感器的应用等几个方向提出了展望，以期为小分子靶标的核糖开关生物传感器的发展和应用提供理论依据。     

2009-2019年中国大陆柯萨奇病毒A14型基因特征分析

柯萨奇病毒A14型属于肠道病毒A组，可引起手足口病和无菌性脑膜炎等疾病，但目前全球对CVA14的分子流行病学研究较少，尚无对CVA14基于全长VP1区进行明确分型的相关研究。因得到中国手足口病监测网络的技术支持，本研究获得2009-2019年在中国大陆分离到的15株CVA14，应用RT-PCR对其全长VP1区进行扩增、测序和分析，并与GenBank中下载的22条CVA14全长VP1序列共同构建系统发育树。结果显示，2009-2019年中国大陆分离的15株CVA14与原型株G-14的核苷酸与氨基酸相似性分别为81.8%～82.9%与95.6%～96.9%,15株CVA14之间的核苷酸与氨基酸相似性分别为91.7%～99.7%与98.3%～100%。中国大陆所有的22条CVA14序列之间的核苷酸与氨基酸相似性分别为91.7%～100.0%与98.3%～100.0%。中国大陆所有的CVA14与国外8条CVA14序列之间的核苷酸与氨基酸相似性分别为80.7%～86.0%与94.9%～97.9%。基于全长VP1系统发育树，全球CVA14可划分为A-G七个基因型，目前全球范围内流行的CVA14的基...     

马铃薯StCIPK11的克隆及响应干旱胁迫分析

明确马铃薯StCIPK11在响应干旱胁迫信号传导中的功能和作用机制，为深入研究StCIPK11响应马铃薯抗旱调控的分子机制提供理论依据。利用同源重组法和人工microRNA技术构建马铃薯StCIPK11过表达载体和干扰表达载体，通过根癌农杆菌介导法分别将其转入马铃薯栽培品种‘大西洋’中。RT-qPCR结果表明，过表达植株StCIPK11的表达量是非转基因植株（NT）的11.59和21.76倍，干扰表达植株StCIPK11干扰程度达到78%。经PEG模拟干旱胁迫，过表达植株叶片中丙二醛含量显著高于NT植株，脯氨酸含量、抗氧化酶（超氧化物歧化酶、过氧化物酶）活性均低于NT植株；StCIPK11干扰表达植株则表现出相反的趋势。StCIPK11参与了干旱胁迫应答过程，StCIPK11干扰表达可以降低马铃薯植株对水分胁迫的敏感性。     

金黄色葡萄球菌肠毒素A、B、C、D、E重组载体的构建及表达

金黄色葡萄球菌肠毒素（Staphylococcal enterotoxins，SEs）是一组结构毒力相似、血清型不同的可溶性小分子蛋白质，平均分子质量为26~30 kD，是引起细菌性食物中毒及肠胃炎的主要因素之一。为了制备金黄色葡萄球菌肠毒素的纯品，首先合成了SEA、SEB、SEC、SED和SEE的基因序列，然后构建了5种肠毒素的原核表达载体，分别转入BL21（DE3）细胞中进行诱导表达。通过SDS-PAGE和Western blot验证，5种肠毒素蛋白均被成功表达，并且在较低的诱导温度（16 ℃）获得一定量的可溶性蛋白。成功制备了5种金黄色葡萄球菌肠毒素的可溶性蛋白，为今后更好地解决因SEs引起的食品安全问题奠定了基础。     

控氧发酵对干酪乳杆菌合成苯乳酸的影响

在静置、搅拌及通气搅拌3种不同控氧条件下,分别用干酪乳杆菌Lactobacillus casei B3发酵及全细胞转化合成了苯乳酸,考察菌体生长、葡萄糖消耗及其发酵与转化合成苯乳酸的规律。结果表明:在转速100 r/min的搅拌条件下,L.casei B3发酵合成苯乳酸的浓度比静置发酵条件下提高了41.4%;但在空气流量2 L/min及转速100r/min的通气搅拌下,发酵合成苯乳酸的浓度较静置发酵时下降了60.3%;以8 g/L苯丙酮酸为底物,以相应静置、搅拌及通气搅拌条件下所得的菌体为全细胞催化剂转化合成苯乳酸,其摩尔转化率分别为67.2%、62.7%和35.9%。此结果说明:适度的搅拌促进了发酵过程的底物和产物传质,但充足或过量供氧会影响细胞内的转化合成酶系,不利于苯乳酸的全细胞转化合成。     

生物工程类课程“半自助式”教学模式的探索与实践

介绍“半自助式”教学模式提出的背景、涵义和研究理念,明晰该模式的实施方案和考核评分体系.以《生物工艺学》课程的教学组织为典型案例,分四个阶段介绍如何通过实践题目的布置引出课程内容体系,如何安排基础知识学习,如何将基础知识应用于具体生物工程产品生产以及如何做生产工艺的工厂设计,分析成效,以期为生物工程类课程教学提供一种新型教学模式,提高学生工程实践能力.     

人呼吸道合胞病毒F-Fc蛋白不同免疫方案对小鼠免疫效果的比较

人呼吸道合胞病毒（Human respiratory syncytial virus,hRSV）是全球婴幼儿和老年人严重呼吸道疾病的主要原因。hRSV感染主要局限于呼吸道，当鼻黏膜中特异性IgA抗体滴度较低时容易引起hRSV反复感染，理想的hRSV疫苗应诱导全身免疫应答，尤其是黏膜免疫。本研究应用CHO细胞表达融合蛋白F-Fc（含有hRSV F蛋白和人IgG1抗体的Fc片段），F-Fc蛋白结合CpG佐剂两次免疫小鼠，比较滴鼻免疫（Intranasal,in）和肌肉注射（Intramuscular,im）免疫安全性和有效性的差异。与佐剂对照组（CpG）相比，四种免疫方式（CpG+F-Fc/in+im,CpG+F-Fc/im+in,CpG+F-Fc/im+im和CpG+F-Fc/in+in）均能诱导高滴度中和抗体，高水平及Th1偏向的细胞免疫应答，减少肺脏病毒的滴度，但是两次滴鼻免疫组小鼠效果是最好的。同时，两次滴鼻免疫组小鼠诱导的IgA抗体最多，小鼠体重恢复速度最快，并且可以显著降低肺脏病理损伤。综上所述，在以上四种免疫方案中，两次滴鼻免疫诱导产生的免疫效果最优。     

长白山园池沼泽湿地碳源/汇沿湖岸至高地环境梯度变化

湖泊湿地具有长期储碳能力，对区域碳循环具有重大贡献，但有关湖泊湿地碳源汇对气候变化如何响应尚不清楚。为探究高海拔区湖岸湿地碳源/汇对气候变化的响应规律，利用静态箱-气相色谱法及相对生长方程法，研究长白山园池沿岸5种天然沼泽类型(芦苇沼泽、苔草沼泽、杜鹃沼泽、柴桦沼泽、落叶松沼泽)的土壤异养呼吸碳排放(CO₂和CH₄)、植被固碳及其相关环境因子(温度、水位等),依据生态系统净碳收支平衡，量化各沼泽类型的碳源/汇和全球增温潜势(GWP),分析其沿湖岸至高地水分环境梯度变化规律及形成机制。结果表明：处于湖岸至高地水分环境梯度下部生境的草类沼泽(芦苇沼泽和苔草沼泽)为弱源(-1.018和-0.090 t C·hm^-2·a^-1),中部生境的灌丛沼泽(杜鹃沼泽和柴桦沼泽)为强汇或弱汇(1.956和0.239 t C·hm^-2·a^-1),上部生境的森林沼泽(落叶松沼泽)为强源(-3.214 t C·hm^-2·a^-1),且其空间...