外源基因对精子的影响及其在山羊早期胚胎中的表达

摘要: 在前期实验中发现, 山羊精子可自发结合外源DNA, 但结合能力在不同动物个体之间差异显著。挑选结合能力明显不同的3只公羊, 进一步探讨了外源DNA对精子的影响及其在早期胚胎中的表达, 结果发现: 外源基因与精子共同孵育后, 精子的活率、顶体反应发生率和受精能力均呈下降态势, 其降幅与精子的结合能力密切相关。利用与DNA共育后的精子进行体外受精, 外源基因可被导入卵母细胞并在早期胚胎中获得表达, 但胚胎阳性率因精子供体不同而差异显著(P<0.05); 其中来源于高、中结合能力供体生产的胚胎, 分别有16.2%(25/154)和5.3%(4/76)可检测到外源基因存在, 但表达仅见于高结合能力供体生产的早期胚胎, 表达率为6.5%(10/154); 低结合能力供体生产的胚胎无外源基因。研究表明, 在以精子载体方法生产转基因动物的实验过程中, 筛选对DNA结合能力较强的精子供体是提高转基因效率的前提, 但需要考虑外源DNA对精子受精能力的影响。     

德氏乳杆菌DM8909冻干工艺及产品稳定性研究

益生菌制剂的生产 ,除菌种的遗传特征影响其产品稳定性因素外 ,发酵、分离、冻干、分装等多个生产环节都会影响其产品稳定性。本文介绍德氏乳杆菌 DM890 9菌株冻干保护剂的筛选及产品稳定性及菌种稳定性的研究。1　材料与方法1 .1　菌种　德氏乳杆菌 DM890 9( L actobacillus de-brueckii subsp.lactis) ,由大连医科大学微生态学研究所提供。1 .2　设备　离心机采用日立公司生产的 CR- 2 2连续流式离心机 ;冷冻干燥设备采用美国 FTS sys-tems公司生产的 Dura- stopμp型冷冻干燥机。1 .3　保护剂　脱脂奶粉、谷氨酸钠、海藻糖、乳糖等…     

对德氏乳杆菌DM8909菌株的微生物学研究

通过对阴道正常菌群定性、定量研究表明 ,乳杆菌在阴道正常菌群中的检出率和数量都占有绝对优势 ,并对致病菌有拮抗作用。乳杆菌对维持阴道微环境 ,保持其健康状态具有重要意义 ,乳杆菌作为阴道病防治的微生态调节剂应用具有广泛的应用前景。本文就阴道乳杆菌的分离、生化反应特征、代谢产物分析及菌种鉴定等微生物学研究工作报道如下。1　材料与方法1 .1　菌种的分离方法　根据文献及本课题的阴道菌群与微生态疗法的研究结果 [1] ,确定乳杆菌为选种对象。用阴道拭子取阴道分泌物 ,接种于 Lbs培养基上 ,37℃培养 72 h。根据乳杆菌的特征筛…     

乳杆菌活菌制剂对滴虫性阴道炎治疗效果的临床观察

辽宁省计划生育研究院女性门诊部于 1 997年4月初至 7月底共接收 30例滴虫性阴道炎患者 ,全部给予大连医科大学科达药业有限公司生产的乳酸菌活菌制剂 (定菌生胶囊 )进行治疗。现将临床治疗效果及安全性进行综合评价如下 :1　材料与方法1 .1　诊断标准　按实用妇产科诊断标准诊断 :1分泌物滴虫镜检阳性 ;2分泌物为稀薄泡沫状 ,白带增多 ,外阴瘙痒 ;3p H5 .1～ 5 .4。1 .2　接纳对象标准　 1女性 ,已婚 ,未绝经 ,月经正常 ,并经上述检查确认为滴虫性阴道炎患者 ;2非妊娠者 ,非经期 ,非哺乳期者 ;3一周内未应用抗生素 ,半月内无阴道用药 ,首…     

阴道乳杆菌活菌制剂研究论文系列报导摘要

阴道乳杆菌活菌制剂的研究在我国已有悠久的历史。大连医科大学 (前大连医学院 )微生物教研室早在 5 0年代初正当抗生素鼎盛时期 ,当时的教研室主任魏曦教授就指出抗生素的辉煌的背后必将带来破坏人体正常微生物群的生态平衡的阴影。此后一直连续进行该项研究 ,迄今已有 5 0余载。在微生态调节剂方面已取得了许多重大进展 ,为人类的健康长寿做出了重要贡献。阴道乳杆菌活菌制剂的研究成功是微生态调节剂系列研究的重要里程碑。阴道乳杆菌活菌制剂课题是在康白教授主持下完成的 ,本项研究历时 2 0年 ,1980～ 1985年是理论与资料准备阶段。 1985～ 2 0 0 0年进入正式计划实施日程时期。该课题从正式在省科委立项、菌种筛选、安全实验、毒性试验、药理实验、功能实验到临床观察 (1、2、3期 ) ,完成了大量的研究工作 ,经过数次在国家医药审评委员会上进行答辩 ,最后才获得批准 ,取得国家新药证书 ,确定可以进行工业化生产和应用于临床。该项研究过去已发表学术论文 31篇 ,分别就乳杆菌在阴道中的作用、粘附及定植、临床应用等方面进行了研究和论述。本刊此次又发表 12篇研究论文 ,将系统报导阴道乳杆菌活菌制剂的微生物学、药理学、微生态学、工艺学研究及临床研究总结等方面内容     

心血管发育中的分子调控及其相关疾病

在心脏发育中,心血管的发育至关重要,其中细胞增殖参与调控心脏的正常发育.细胞增殖是通过细胞周期而实现的.在细胞周期中,细胞周期调控分子(包括细胞周期蛋白,依赖于细胞周期蛋白的蛋白激酶及其抑制因子)和信号通道(包括丝裂激活蛋白、内皮素-1等)的调控表达的改变导致整个心血管系统的重塑,并常伴随着心血管系统的紊乱,引起如心肌梗塞、心肌炎、及充血性心力衰竭等相关疾病.     

转基因技术在果蝇及脊椎动物心脏基因研究中的应用

转基因技术是一项非常重要的生物工程新技术,主要应用于生产药物蛋白及异种器官移植,建立疾病基因模型,提高和改善家畜生产的产量和质量以及研究新基因的功能及表达调控.重点综述了几个新的转基因技术-UAS-Gal4系统,热休克启动子载体,RNAi技术,原核胚胎显微注射及基因敲除技术在研究果蝇及脊椎动物心脏基因中的应用.     

070幽门螺杆菌产物调节细胞因子反应

幽门螺杆菌(Hp)可导致胃炎、消化性溃疡、胃腺癌、粘膜相关淋巴组织淋巴瘤等多种疾病.Hp感染后胃粘膜中大量中性粒细胞和淋巴细胞浸润,并以Th1细胞免疫应答为主(Th1细胞极化),造成持续性组织损伤.为了确认以Th1细胞应答为主的胃粘膜免疫反应主要依赖于天然免疫应答,而非对Hp的抗原特异性识别.作者培养并收获Hp,裂解细菌,得到蛋白产物,并分离基因组DNA,另备重组失活尿素酶;从未感染Hp的志愿者抽取血液,分离外周血单个核细胞(PBMCs),体外培养并加入各种Hp产物或(和)丝裂原;同时培养Jurkat T细胞(CD4+);一些实验组中加入鼠抗人IFN-γ和羊抗人IL-12p40.用ELISA检测培养物上清液中各种细胞因子;用3H掺入法检测细胞增殖和DNA合成情况.     

灭活的青春双歧杆菌对人大肠癌细胞的粘附

针对灭活的青春双歧杆菌DM850 4与人大肠癌CCL 2 2 9细胞之间的粘附现象及粘附机制进行研究。结果发现灭活的双歧杆菌具有与活菌相同的粘附定植能力 ,两者粘附于体外培养的肠上皮细胞均依赖于耗尽培养上清 (SCS)的存在。青春双歧杆菌粘附素有可能是存在于细胞壁中及分泌至SCS中的脂磷壁酸 (LTA)。LTA与细菌细胞壁耐热蛋白相互粘连 ,并且伸出胞壁之外。此外 ,肠上皮细胞表面的粘附素受体可能为糖类或糖蛋白。     

NFBD1的生物学作用

NFBD1是一个参与DNA损伤应答的重要分子,在DNA损伤关卡、DNA损伤修复、细胞生长增殖及肿瘤发生中均有作用。研究NFBD1功能及其作用机制对生物医学基础知识的拓展以及肿瘤的防治将产生重要影响。