迷果芹根化学成分的研究

利用普通硅胶柱色谱技术和多种现代波谱技术,从迷果芹(Sphallerocarpus gracilis)的根中分离并鉴定了11个化合物,通过波谱学方法鉴定为:falcarinol(1)、(3R,8S)-falcarindiol(2)、diplaniol(3)、5-hydroxy-8-methoxy-2H-1-benzopyran-2-one(4)、esculetin(5)、东莨菪内酯(6)、xanthalin(7)、isoimperatorin(8)、胡萝卜苷(9)、β-谷甾醇(10)和豆甾醇(11),其中化合物1～6为首次从该植物中分离得到。     

油菜蜂花粉抗氧化活性研究

采用回流提取、大孔吸附树脂分离,得到8个油菜蜂花粉提取部位;利用H2O2诱导PC12细胞氧化损伤模型,评价各提取部位对PC12细胞氧化损伤的保护作用。在此基础上,采用HPLC法初步分析最佳抗氧化部位活性物质基础。结果表明,8个油菜蜂花粉提取部位中,部位B处理组细胞存活率最高,为90.0%,显著高于模型组53.6%(P<0.001),且高于VE阳性对照组85.0%(P<0.05)。通过对乙酸乙酯各提取部位进行HPLC分析,并用对照品标定色谱图中色谱峰,表明部位B含有3种主要黄酮:山奈酚-3,4’-双-O-β-D-葡萄糖苷(KMG)、山奈酚-3-O-β-D-(2-O-β-D-葡萄糖基)吡喃葡萄糖苷(KMP)和山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(KMC)。     

α-突触核蛋白和蛋白质降解系统的交互作用

α-突触核蛋白(α-synuclein)与帕金森病的发病机制有着紧密的联系。α-synuclein可通过泛素-蛋白酶体途径(UPS)和自噬-溶酶体途径(ALP)(主要是大自噬和分子伴侣介导的自噬)进行清除。而这两种主要蛋白质降解途径异常会导致α-synuclein清除受损从而大量沉积。反过来,大量沉积的α-synuclein也会引起其变体的产生,从而产生毒性,这将进一步损伤UPS和ALP功能,出现恶性循环导致神经元的死亡。本文将就以下方面的最新发现进行综述:α-synuclein的降解方式以及α-synuclein对蛋白质降解途径的异常作用。     

火鸡疱疹病毒细菌人工染色体的构建

火鸡疱疹病毒(HVT)为一种-疱疹病毒,因其与马立克氏病病毒(MDV)抗原相关性而被广泛用作预防马立克氏病(MD)的活疫苗.[目的]本研究的目的是构建HVT全基因组感染性细菌人工染色体(BAC).[方法]利用Eco-gpt(黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶)基因和BAC载体pBeloBAC11的基本功能序列,构建重组病毒转移载体Pgab-gpt-BAC11.通过将Pgab-gpt-BAC11与HVT感染细胞总DNA共转染原代鸡胚成纤维细胞(CEF),待出现病毒噬斑后,利用霉酚酸(MPA)阻断核酸代谢途径,经过筛选获得纯化的重组病毒purified-Rhvt.提取purified-Rhvt感染细胞总DNA电转化大肠杆菌DH10B感受态细胞,在氯霉素抗性平板上筛选阳性克隆,并用酶切和PCR方法对其进行鉴定.随机选取BAC克隆提取BAC DNA转染次代CEF,完成HVT重组病毒的拯救.[结果]经过6轮筛选后获得纯化的重组病毒,并筛选到25个BAC分子克隆化病毒.其中BAC6、BAC8和BAC10再次启动病毒感染,产生与野生型HVT感染CEF相似的病毒噬斑形态,说明已经获得拯救出的HVT重组病毒.[结论]本研究构建了HVT全基因组感染性细菌人工染色体,建立了HVT反向遗传操作技术平台.     

两种分形维数在颞下颌关节音分析中的应用

颞下颌关节（TMJ）是人体最复杂的关节之一,有着复杂的生理功能,颞下颌关节音（颚开合时TMJ产生的声音）含有丰富的有关TMJ状态的信息。利用非线性动力学的混沌与分形理论对健康人和颞下颌关节内紊乱（TMD）患者的TMJ音信号进行了分析。分别计算其波形维和相关维。结果表明,健康人TMJ音信号的两种分形维数值都明显高于TMD患者。提示,以TMJ音信号的分形维数值作为TMJ损伤及病变的一个指标是有意义的。     

气相色谱-质谱法测定银杏叶中多种有机磷农药残留量

采用振荡离心法提取、柱层析法净化技术,成功建立了气相色谱-质谱法同时测定银杏叶中五种有机磷农药残留量的方法.结果表明,采用程序升温,所测定的五种有机磷农药在HP-5MS柱上得到了很好的分离,且方法简单、快速、灵敏,完全符合实际需要.方法回收率在88.8%～102%之间,相对标准偏差为1.6%～4.7%,最低定量检出浓度在0.01～0.05 mg/kg之间.     

猪口蹄疫病毒多抗原表位重组腺病毒的构建与鉴定

本研究设计构建了含有猪O型口蹄疫病毒VP1(21-60)-(141-160)-(200-213)位氨基酸的基因的重组腺病毒质粒pAd-VP,经PacⅠ酶切后转染HEK-293A细胞,3次噬斑纯化获得了重组腺病毒rAd-VP.该重组腺病毒于HEK-293A细胞连续传代至20代效价稳定,TCID50为10-10/mL.RT-PCR检测证明目的基因在mRNA水平上可有效表达;应用O型口蹄疫病毒标准阳性血清进行间接荧光抗体试验,在rAd-VP感染的HEK-293A细胞的胞质可见清晰荧光.证明该重组腺病毒对VP1(21-60)-(141-160)-(200-213)位氨基酸的基因进行了成功的表达,从而为FMDV多抗原表位腺病毒活载体疫苗的研究奠定了基础.     

菌寄生真菌的研究进展

菌寄生真菌能寄生在其他真菌并抑制其生长这一特性,在防治病原真菌时显示巨大潜力。综述了近年来菌寄生真菌在寄生过程中的识别、信号传导、侵染机制等方面的研究进展,并讨论菌寄生真菌的应用前景。     

bc1-2和bax及NF-kB在白藜芦醇诱导肝癌细胞凋亡中的作用

目的探讨白藜芦醇诱导肝癌细胞凋亡的途径.方法白藜芦醇体外处理HepG2肝癌细胞24 h后,以免疫组化检测凋亡调控基因bcl-2和bax及NF-kB的表达.结果白藜芦醇处理组HepG2细胞bcl-2的阳性积分和NF-kB的阳性细胞密度均明显低于对照组(P＜0.01);而bax阳性积分明显高于对照组(P＜0.01).结论白藜芦醇能下调HepG2细胞bcl-2基因的表达,上调bax的表达,同时抑制NF-kB的活化,这可能是其诱导HepG2细胞凋亡的途径之一.     

硫化氢对淹水平邑甜茶根系形态构型、叶片活性氧和光合特性的影响

以盆栽平邑甜茶为试材,分别将盆浸没于5种浓度硫化氢(H₂S)释放剂硫氢化钠(NaHS;0、0.02、0.05、0.1、0.2 mmol·L^-1)水溶液,以及添加有次牛磺酸(HT;H₂S清除剂)的NaHS水溶液中,10 d后调查根系形态构型、叶片活性氧生成和光合气体交换参数以及植株生长的变化.结果表明: 在淹水处理液中加入0.02～0.1 mmol·L^-1 NaHS,能增加土壤淹水时根系总长度、表面积、体积、直径、根尖数、分形维数、一级侧根数量和根系活力,降低叶片超氧阴离子(O₂^-·)生成速率和过氧化氢(H₂O₂)含量,提高叶片光合速率(P_n)、蒸腾速率(T_r)、气孔导度(g_s)、水分利用效率(WUE)和表观CO₂利用效率(CUE),还提高幼苗株高和植株生物量,其中NaHS在浓度0.1 mmol·L^-1 时作用效果最显著;当NaHS施用浓度达到0.2 mmol·L^-1或在0.1 mmol·L^-1 NaHS中加施次牛磺酸时,上述指标均降回到单纯淹水时的水平.这说明添加适量H₂S能够有效缓解土壤淹水对平邑甜茶根系生长的抑制,可以通过减少活性氧产生以及提高CUE,从而减轻淹水胁迫对叶片光合性能和植株生长的不利影响.