黑曲霉催化雄甾-4-烯-3,17-二酮16β-羟基化

为进一步确定黑曲霉菌株TCCC41650的生物转化能力,以雄甾-4-烯-3,17-二酮(Androstenedione)为底物,利用黑曲霉菌株TCCC41650进行催化,产物经纯化、重结晶后,通过单晶衍射鉴定为16β-羟基雄甾-4-烯-3,17-二酮。转化条件为:培养液pH 6.0,乙醇添加量为2%,投料浓度为1‰时,72 h转化率为85.8%。目前甾体研究领域对于C16β-羟基化的微生物转化未见报道,研究结果为C16β-羟基甾体药物的研发奠定了基础。     

人白介素12亚基p40和p35基因串联在毕赤酵母中的表达及表达产物活性分析

摘 要 利用毕赤酵母系统表达有活性的人单链白细胞介素12（hscIL-12）,PCR法从质粒pBI121-IL-12中扩增hscIL-12基因,经酶切、连接构建重组表达载体pPIC9K-hscIL-12,SacI线性化后,PEG1000法转化毕赤酵母GS115,经G418筛选和菌落PCR鉴定,经甲醇诱导,hscIL-12在酵母中获得分泌表达,表达产物经Western Blot检测,显示该蛋白相对分子质量为70KDa,可与鼠抗人IL-12单克隆抗体特异性结合;定量分析结果表明,重组酵母培养上清中hscIL-12约占总蛋白的26％,表达量约为60mg／L;生物学活性实验表明,重组蛋白能促进人外周血淋巴细胞增殖。为利用rhscIL-12进行基因治疗奠定了基础。     

外源甜菜碱对水分胁迫下桃树生理响应的影响

以4年生盆栽“庆丰”桃树为试材,研究了水分胁迫下桃树叶片中甜菜碱含量的变化规律及叶面喷施甜菜碱对水分胁迫下桃树生理响应的影响.结果表明：正常供水情况下,桃树叶片中甜菜碱含量为75.9～80.5 μg·g^-1FM , 随着水分胁迫程度的加深,甜菜碱含量逐渐增加,停水第16 天时达278.9 μg·g^-1FM ;正常供水时桃叶片细胞质膜透性为8.06%～8.61%,水分胁迫下增至28.62%,叶面喷施100和500 mg·L^-1甜菜碱16d后分别为26.25%和21.79%;过氧化氢(H₂O₂)含量由正常情况下的27.2～32.5 μmol·g^-1FM 增至胁迫后的76.4 μmol·g^-1FM,叶面喷施100和500 mg·L^-1甜菜碱后分别为73.2和68.5 μmol·g^-1 FM;水分胁迫下,抗坏血酸过氧化物酶(AsA-POD)活性峰值为0.435 mg·g^-1 FM,甜菜碱处理后峰值达到0.490 mg·g^-1 FM;游离脯氨酸与可溶性糖在干旱胁迫下逐渐累积, 500 mg·L^-1甜菜碱处理分别为2.878 mg·g^-1 FM和37.6 mg·g^-1 FM,均低于单纯胁迫及100 mg·L^-1甜菜碱处理;可溶性蛋白质含量在水分胁迫下呈下降趋势,甜菜碱处理后最小值为4.03 mg·g^-1 FM,较单纯胁迫下的最低值（3.14 mg·g^-1 FM）高20.3%.表明叶面喷施甜菜碱能在一定程度上减轻桃树的受害程度,提高其抗旱性.     

两品系萼花臂尾轮虫摄食强度的比较研究

对广州和芜湖两品系萼花臂尾轮虫的摄食强度及其与食物浓度、食物种类和培养时间之间的关系进行了比较研究.结果表明,食物浓度、食物种类和培养时间均对轮虫滤水率和摄食率有显著影响.两品系轮虫滤水率和摄食率均随培养时间的延长而减小;20 h内,两品系轮虫的总滤水率均与食物浓度呈曲线相关,而两品系轮虫总摄食率均与食物浓度呈直线相关.广州和芜湖两品系轮虫均在以小球藻为食物时有较大的滤水率,分别为0.0029±0.0001和0.0039±0.0008ml·ind.^-1·h^-1;广州品系轮虫以小球藻为食物时的摄食率(0.3992×10⁴±0.00850×⁴ cell·ind.-1·h^-1)显著地大于以栅藻为食物时的摄食率(0.170×⁴±0.0370×⁴ cell·ind.^-1·h^-1),而它们均与以混合藻为食物时的摄食率无显著差异;芜湖品系轮虫摄食率不受食物种类影响.轮虫滤水率和摄食率因食物浓度、食物种类和培养时间的不同而在品系间存在着差异.     

崇明东滩围垦堤内植被快速次生演替特征

崇明东滩湿地98大堤内的生态示范区由于人工排水而干涸,芦苇塘成为次生裸地,土壤条件发生变化,呈明显的旱化和盐渍化,植被群落结构呈典型的次生演替,适宜旱地的耐盐植物獐茅和碱蓬等先锋植物出现.文中分别于2003年秋季、冬季和2004年春季沿植被带对塘内各种植物的生物量、高度、密度等指标进行取样分析.结果表明,堤内植被群落已形成明显的带状獐茅草-獐茅草/碱蓬-碱蓬/芦苇-芦苇旱生植被群落.碱蓬在裸地中2003年秋季平均生物量达到415.4 g·m^-2、2004年春季为391.53 g·m^-2,成为裸地的优势种,并向芦苇中扩散,生物量和高度逐渐增加,密度逐渐稳定,表现出良好的生长趋势.     

化工厂生产废水致突变性研究

本文就合肥某化工厂生产用水、氯乙烯工段生产废水、化工厂总排污渠污水、南淝河化工厂下游水、化工厂深井水及阴性对照双蒸水进行了有机浓集物的致突变性研究,Ａｍｅｓ试验结果表明：南淝河水在化工厂用于生产之间已受到致突变性污染,ＴＡ９８＋Ｓ９和ＴＡ９８－Ｓ９均出现阳性,化工厂总排污渠污水ＴＡ９８＋Ｓ９呈阳性且有增强趋势,氯乙烯工段生产废水和南淝河化工厂下游水ＴＡ９８＋Ｓ９也呈阳性。深井水和双蒸馏水ＴＡ９８＋     

"叶绿素的提取和分离"实验的一种方法

我们以灯芯柱纸层析法为基础,进行该实验,取得了较好的效果,现介绍如下。　　具体的方法是：①取洗净、揩干的天竺葵叶片５ｇ剪碎,加８５％丙酮５ｍｌ研成匀浆;②取滤纸一张剪成２．５ｃｍ×５．５ｃｍ的长方形,从一端开始卷起,卷成柱状,卷时将两边对齐,捻紧备用;③将纸芯插入滤纸中央并立放于培养皿上,培养皿内装有四氯化碳（不用汽油）,纸芯下端浸入四氯化碳中;④用尖镊夹取研好的色素匀浆均匀堆于纸芯周围,盖上皿盖,静置观察。１５ｍｉｎ左右色素可充分扩展,分离结束。此实验方法具有以下特点：①克服了提取液中色素量少…     

大型和小型萼花臂尾轮虫的遗传和生活史特征比较研究

近年来，有关生物个体大小变异规律的研究已经成为生活史对策研究的重要内容之一。研究发现，大小相似的萼花臂尾轮虫（Brachionus Calyciflorus）母体所产休眠卵孵化出的不同克隆后代个体大小变化显著，其中，最大个体是最小个体体积的6.25倍。推测种群内产生不同大小的后代个体是轮虫应对环境变化的一种适应性进化策略，然而目前对上述不同大小轮虫克隆的遗传和生活史特征的研究尚未见报道。以mtDNA COI基因和rDNA ITS序列作为分子标记，比较了个体大小差异显著的不同克隆萼花臂尾轮虫的遗传分化程度和分类地位，并在不同温度（20℃、25℃、30℃）和不同斜生栅藻（Scenedesmus obliquus）食物密度（1.0×10⁶、3.0×10⁶、5.0×10⁶个/mL）下比较了它们的生活史特征。结果表明，萼花臂尾轮虫种群内个体大小变异并非由于遗传特征的明显分化所导致，大型和小型个体轮虫克隆在两种分子标记上并不构成姐妹种，且两种形态型间还存在共享单倍型。温度、食物密度、轮虫形态型，以及温度和食物密度各自与轮虫形态型之间的交互作用，均显著影响轮虫的生活史特征。小型轮虫在1.0×10⁶个细胞/mL食物密度下显著延长了胚胎和幼体的发育时间，缩短了生殖期历时；大型轮虫在1.0×10⁶个细胞/mL和3.0×10⁶个细胞/mL食物密度下显著延长了幼体的发育时间，但是其用于胚胎发育和生殖的时间却不随食物密度的变化而变化。各温度和食物密度条件下，大型轮虫的生殖期历时、平均寿命和世代时间均显著延长，或有延长趋势；而两者的种群增长能力之间的差异却因温度和食物密度的不同而异。20℃、25℃以及3.0×10⁶个细胞/mL和5.0×10⁶个细胞/mL食物密度下两种形态型轮虫的生殖能力相似；30℃条件下小型轮虫的生殖能力更强；1.0×10⁶个细胞/mL食物密度下大型轮虫的生殖能力更强。小型轮虫在各温度和各食物密度下均未产生混交雌体后代，而大型轮虫在20℃低温下有较高的后代混交率。因此，大型和小型个体轮虫克隆具有显著不同的生活史策略，且利用有性生殖直接产生个体体积明显变异的不同克隆后代是萼花臂尾轮虫适应不可预测环境变化的一种"赌注策略"。     

人膀胱癌转化生长因子α的研究

应用Northern印渍杂交和放射免疫分析技术证明了膀胱癌组织和细胞中TGFαmRNA的表达,并发现TPA能提高人膀胱移行上皮癌BIU-87细胞中TCFαmRNA和TGFα活性分子的水平,但对TGFα的功能受体(EGF受体)具有负调节作用。提示TGFα在膀胱肿瘤细胞的恶性增殖过程中起一定作用,蛋白激酶C的激活可能是调节TGFα基因表达的途径之一。