猪源戊型肝炎病毒基因IV型ORF3编码蛋白的表达及鉴定

通过PCR从已构建的猪源戊型肝炎病毒全基因克隆扩增ORF3全基因,将扩增产物插入到pMD18-T载体中,亚克隆至原核表达载体pET28a（+）,构建pET28a-ORF3表达载体,转入E.coli BL21 (DE3),IPTG诱导表达。Ni-NTA层析柱纯化表达蛋白,用SDS-PAGE、免疫印迹、ELISA等方法分析鉴定表达产物。结果成功扩增到345 bp的目的基因;构建了重组表达载体pET28a-ORF3;转化宿主菌E.coli BL21 (DE3)后表达产物的相对分子质量在6.50~16.5 kDa之间,与预期表达的目的蛋白相对分子质量相符;表达的目的蛋白能与阳性猪源和人源血清发生特异性反应,证实其具有较好的反应原性。     

不同温度下斜纹夜蛾感染核型多角体病毒的流行病模型及模拟

研究了温度对斜纹夜蛾核型多角体病毒病流行的影响.结果表明,温度在29 ℃以上时,感病幼虫大多在2～3 d开始死亡,4～5 d达到高峰.随着温度的升高,感病幼虫病死率增加,病死速度加快.在试验温度范围内,未发现该病毒的热抑制温度,但感病幼虫死亡速率存在恒定温区,在29～35 ℃之间.感病幼虫的每日病死率可用互补重对数模型较好地拟合,累计病死时间分布可用Gompertz模型拟合,生物物理模型经改进后可很好地描述幼虫病死速率与温度的关系,可用于模拟分析不同温度下的幼虫病死时间分布和幼虫病死速率.     

口蹄疫重组鸡痘病毒诱导猪特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性检测

目的:评价口蹄疫重组鸡痘病毒vUTAL3CP1诱导猪产生特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性的能力。方法:用PCR方法亚克隆O型FMDVVP1基因C末端部分片段(第130～213AA)。将其插入真核表达载体pDisplay中,构建质粒pDisplay-mVP1。将pDisplay-mVP1转染PK15细胞,经3次G418加压筛选,并用RT-PCR和IFA鉴定,证明获得表达目的基因的PK15/pDisplay-mVP1细胞。最后,利用该细胞作为靶细胞,用LDH法检测口蹄疫重组鸡痘病毒vUTAL3CP1免疫猪的特异性CTL杀伤活性。结果:vUTAL3CP1免疫组在效靶比25∶1和50∶1时,CTL裂解活性分别达到42.84%±32.1%和61.94%±42.8%,显著高于灭活疫苗组与其它对照组(p<0.01)。结论:vUTAL3CP1可以诱导猪产生高水平的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性,为进一步的FMDV基因工程疫苗的研究奠定了基础。     

大豆基因家族的结构和表达分析

KNOX基因家族编码同源异型盒蛋白,在植物生长发育过程中起重要调控作用。利用生物信息学手段在全基因组水平上对大豆（Glycine Max）KNOX）（家族基因进行鉴定和分类,并分析其基因结构、蛋白同源结构域特征以及基因表达方式。研究结果表明：大豆中的27个GmKNOX基因可以分为GmKNOXl和GmKNOXll两个亚类,其中GmKNOXl类可分为3个主要的进化支,GmKNOXll类分为2个主要的进化支：26个GmKNOX基因不均匀地分布在16条染色体上,GmKNOX27尚无法定位。不同组织表达谱的分析表明：GmKNOXl类基因表达部位比较集中,以茎顶端分生组织中表达量最高：而GmKNOXll类基因的表达特异性较GmKNOXl类低,表达部位更广泛。     

东北石竹属一新变种

东北石竹属一新变种张贵一１袁晓颖２（１．哈尔滨师范大学,哈尔滨１５００８０）（２．东北林业大学,哈尔滨１５００４０）关键词石竹属;新变种;镜泊湖石竹ＡＮＥＷＶＡＲＩＥＴＹＯＦＤＩＡＮＴＨＵＳＦＲＯＭＮＯＲＴＨＥＡＳＴＯＦＣＨＩＮＡＺｈａｎｇＧｕｉ－ｙ...     

重组毕赤酵母发酵生产S-腺苷甲硫氨酸培养条件优化

甲醇营养型毕赤酵母生产S-腺苷甲硫氨酸(SAM)是通过其表达的SAM合成酶催化L-甲硫氨酸(L-Met)和ATP反应而合成的。本文采用全合成培养基,在摇瓶上进行了培养条件的优化,确定了接种量、pH、PTM1、PO43-等初步条件。并根据SAM生物合成的特征,重点对其碳、氮源的影响作了进一步的分析优化。结果表明:当CaSO40.465g/L,K2SO49.10g/L,MgSO4.7H2O 7.45g/L,PO43-0.5mol/L情况下,生长阶段,甘油4%、硫酸铵4.00g/L为最佳;诱导表达阶段,L-Met1.0g/L,甘油与甲醇比例为0.5、硫酸铵8.00g/L为最佳。优化后,SAM产量诱导4d后达1.48g/L,诱导5d后可达1.70g/L(131mg/g干细胞),L-Met的转化率可达40.65%,既利于工艺放大又便于产品的分离纯化。     

欧共会提出管理遗传工程研究的草案

欧洲共同体委员会(欧共会)终于发表了人们盼望已久的管理遗传工程生物的规定。这些规定须由欧洲议会和成员国负责环境的部长批准。涉及实验室研究和经过改造的生物在封闭式工业生产过程中(例如在发酵罐和生物反应器中)的使用的这些规定,大多只要求提出通告。总的来说,对试验性工作和非病原生物,管得最少;而对工业规模的项目或使用致病生物的项目,则要求实施最严格的监督。     

蒙大拿州立大学和Cytoclonal公司从真菌取得紫杉醇

得克萨斯州的一家小公司已获得许多权利,帮助蒙大拿州立大学(MSU) (在蒙大拿博兹曼)的研究人员开发从一个真菌新种生产紫杉醇的新技术。通过双方合作,可能得到一种改进的方法,既能制造这种有前途的治癌药,又能不毁坏珍稀的紫杉树。 首先发现这种独特的真菌的,是MSU植物病理系有机化学家Andrea Stierle博士。13年前她在徒步