大肠杆菌脂蛋白与CTB-pres2抗原基因的融合及表达

首次采用基因融合方式,在乱毒素B亚基-乙型肝炎病毒Pres2抗原融合基因（ctxB-Pres2）的5’端了引入编码大肠杆菌脂蛋白信号肽及N端九个氨基酸的核苷酸序列,分别置于ctb及lpp／lac启动子下在大肠杆菌中获得分泌性表达．表达的融合蛋白均定位于膜上,并且可以和GM1、抗-CTB抗体及抗HBVPreS2单克隆抗体结合,说明该融合蛋白保留了CTB的基本高级结构及CTB、PreS2抗原的抗原性．3H-棕榈酸标记实验证实该融合蛋白发生脂肪化,为免疫原性研究奠定了基础．此外,还研究了不同信号肽和宿主菌对该蛋白表达的影响．     

丙型肝炎病毒(河北定州株)C33c基因的克隆、序列分析及在大肠杆菌中的表达

本研究通过RT-PCR从河北定州地区献血员血清中克隆了丙型肝炎病毒的C33c抗原基因,序列分析结果表明,该株的C33c基因和中国泰安株DNA同源性为91.0％,氨基酸序列同源性为92.2％;和HCV河北株的同源性分别为91.3％和96.2％;和日本JK1株的同源性分别为91.6％和94.8％。克隆的基因在大肠杆菌中得到表达和纯化,并可用作抗-HCV ELISA试剂的抗原组分。     

恶性疟原虫多抗原表位基因的融合与表达

以霍乱毒素Ｂ亚基（ＣＴＢ）基因为载体,构建了含不同抗原表位的恶性疟原虫的融合基因ＣＴＢ／ＡＴＥ和ＣＴＢ／ＡＷＴＥ。前者除含有恶性疟原虫裂殖子表面主要抗原表位杂合多肽基因ＳＰｆ６６外,还含有很强的Ｔ辅助细胞表位ＣＳＴ３和Ｔｃ细胞表位;后者在此基础上将我国发现的Ｂ细胞表位ＮＫＮＤＤ基因经８次串联后融合其中。两种形式的融合基因经测序正确后转入大肠杆菌ＴＫ１０４６中,产量分别为１０ｍｇ／Ｌ及５ｍｇ／Ｌ。表达产物ＣＴＢ／ＡＷＴＥ经亲和层析纯化双抗夹心ＥＬＩＳＡ测定表明,该融合蛋白在保留了与抗ＣＴＢ抗体结合的同时,与抗ＮＫＮＤＤ单抗的结合效价达１：８０００。     

有机盐对基因启动子的σ因子选择性的影响

用σ＾７０或σ＾３８和核心酶（Ｅ）组成的大肠杆菌ＲＮＡ聚合酶全酶（Ｅσ）对四种启动子进行了体外转录,结果表明,ｌａｃＵＶ５,ｒｐＩＪ主要被Ｅσ＾７０识别,ｋａｔＥ主要被Ｅσ＾３８识别,ｆｉｃ在低盐浓度时被Ｅσ＾７０识别,在高浓度盐时被Ｅσ＾３８识别,Ｅσ＾３８转录特异性启动子所需酶量大于Ｅσ＾７０转录特异性启动子的酶量,在含有分别对σ＾７０或σ＾３８亲和性大的混和启动子的体外转录中,启动子之间不存     

β－内啡肽对巨噬细胞释放IL－1的直接及间接刺激作用

本实验从体内、体外两个方面初步探讨β内啡肽（βＥＰ）刺激ＩＬ１释放的机制。给正常大鼠静注不同浓度的βＥＰ,血浆ＩＬ１活性显著升高,呈剂量效应关系;给正常大鼠静注βＥＰ及ＬＰＳ,血浆ＩＬ１活性显著高于二者的单独作用;将不同浓度的βＥＰ与巨噬细胞一起培养（不加ＬＰＳ）,培养液中呈现ＩＬ１活性,并在一定范围内与βＥＰ浓度有剂量效应关系;以低浓度的βＥＰ与巨噬细胞孵育１ｈ后去除βＥＰ,再加入ＬＰＳ,发现βＥＰ预处理组上清液ＩＬ１活性显著高于未加βＥＰ的对照组。结果提示：βＥＰ既能直接刺激巨噬细胞产生ＩＬ１,又能提高巨噬细胞对ＩＬ１诱生物ＬＰＳ的敏感性。     

乙肝前S2抗原决定簇串联体与核心抗原的基因融合与表达

乙肝前Ｓ２（ＨＢＶＰｅｒＳ２）肽段由５５个氨基酸组成,其Ｎ端肽段含Ｔｈ和Ｂ细胞抗原决定簇,为增强ＰｒｅＳ２的抗原性,本实验采用将化学合成的ＰｒｅＳ２ｅｐｉｔｏｐｅ（１２０－１４５）基因以串联方式与ＨＢｃＡｇ的基因进行了融合,融合基因在大肠杆菌中获得表达,并通过ＥＬＩＳＡ比较研究了融合蛋白中ＰｒｅＳ２ｅｐｉｔｏｐｅ单体及串联体的抗原性差异。     

人胰岛素样生长因子－ⅡcDNA的PCR扩增及序列分析

人胰岛素样生长因子(Hurman insulin-1ike growth factor,简称h IGF)是一类既有细胞分化和增殖活性,又有胰岛索样作用的多肽,包括IGF—Ⅰ和IGF—Ⅱ两种。其中IGF—Ⅰ的功能比较清楚。而IGF—Ⅱ的作用正在研究中,可能在胎儿的生长发育及脑组织和神经系统中起重要作用。IGF－Ⅱ能刺激一些细胞系的生长,对不同的肿瘤起自分泌和旁分泌生长因子的作用〔1－6〕,最近又发现IGF—Ⅱ能刺激神经及肌肉的再生。由于天然IGF—Ⅱ的分离困难,我们利用基因工程方法克隆表达IGF—Ⅱ c DNA,以获得大量重组蛋白,为研究和应用打下基础。     

漫话三叶虫

“三叶虫”名字是怎么来的? 三百多年前的明朝崇祯年间,有一个名叫张华东的人,在山东泰安大汶口发现了一种生在石头中的怪物。他当时还不清楚这究竟是什么东西,单凭外形容貌看,颇似蝙蝠展翅,于是命名为“蝙蝠石”。直到本世纪的20年代,我国的古生物工作者才给以科学的解释和描述,指出这是三叶虫的尾部,它是生活在晚寒武世海洋中的一种节肢动物,距今已有5亿年了。为了纪念这位世界上第一个给三叶虫取的名字,因此我们也就将拉丁学名翻译为“蝙蝠石”或“蝙蝠虫”(图1)。     

DL-胱氨酸的合成

<正> 1.绪言到现在为止,有关DL-胱氨酸合成方法的许多报导。一般是把天然的L-体用适当的方法外消旋化。我们是以DL-丝氨酸为原料,按式1所示的路线合成。从丝氨酸出发用N-苯甲酰及N-乙酰化合物进行研究的结果:其收率分别为35％和20％。S-乙酰、N-苯甲酰化合物[5a]是根据分析值及IR光谱(-S-COCH_3在1695cm~(-1)NHCOPh在1655cm~(-1))的结果鉴定的。另外,由于N,S-二乙酰化合物[5b]不能单独分离,系直接水解粗制的油