全文获取类型
收费全文 | 445篇 |
免费 | 64篇 |
国内免费 | 184篇 |
出版年
2024年 | 5篇 |
2023年 | 15篇 |
2022年 | 10篇 |
2021年 | 23篇 |
2020年 | 13篇 |
2019年 | 20篇 |
2018年 | 23篇 |
2017年 | 12篇 |
2016年 | 18篇 |
2015年 | 18篇 |
2014年 | 24篇 |
2013年 | 15篇 |
2012年 | 24篇 |
2011年 | 28篇 |
2010年 | 13篇 |
2009年 | 21篇 |
2008年 | 23篇 |
2007年 | 24篇 |
2006年 | 29篇 |
2005年 | 27篇 |
2004年 | 22篇 |
2003年 | 23篇 |
2002年 | 26篇 |
2001年 | 17篇 |
2000年 | 8篇 |
1999年 | 16篇 |
1998年 | 13篇 |
1997年 | 22篇 |
1996年 | 13篇 |
1995年 | 11篇 |
1994年 | 17篇 |
1993年 | 10篇 |
1992年 | 15篇 |
1991年 | 10篇 |
1990年 | 13篇 |
1989年 | 12篇 |
1988年 | 2篇 |
1987年 | 6篇 |
1986年 | 3篇 |
1985年 | 10篇 |
1984年 | 6篇 |
1983年 | 3篇 |
1982年 | 4篇 |
1981年 | 7篇 |
1980年 | 3篇 |
1979年 | 4篇 |
1975年 | 2篇 |
1964年 | 2篇 |
1955年 | 1篇 |
1954年 | 2篇 |
排序方式: 共有693条查询结果,搜索用时 15 毫秒
51.
辽宁省猪弓形虫感染地理分布调查 总被引:9,自引:0,他引:9
本文报告了辽宁省12市34县猪弓形虫感染的调查结果。以IHA共检测猪血清1391份,阳性539份,全省平均感染率为38.7%。按地理区划统计,辽西丘陵区(7县)感染率最高,达54.6%(131/240);辽南沿海区(8县)最低,为29.0%(99/341);辽河平原区(11县)和辽东山地区(8县)居中,感染率分别为39.6%(197/497)和35.8%(112/313)。在我省,猪弓形虫感染率高 相似文献
53.
54.
目的通过对二种血瘀证大鼠模型的内皮素(ET)、一氧化氮(NO)和血液流变学指标进行比较,探讨其在血瘀证量化诊断中的意义。方法SD大鼠50只,分别建立气虚血瘀证和气滞寒凝血瘀证动物模型,测定二种模型血浆ET和NO水平,用LBY-N6B全自动自清洗血流变仪对二种模型进行血液流变学的分析。结果(1)与模型对照组比较,气虚血瘀模型组全血黏度低切变率、毛细管血浆黏度均明显增加(分别为P〈0.05),血浆ET水平显著升高(P〈0.01),NO水平显著降低(P〈0.01);(2)与空白对照组比较,气滞寒凝血瘀模型组全血黏度低切、中切、高切以及毛细管血浆黏度均明显增加(分别为P〈0.01),红细胞聚集指数增加(P〈0.05),血浆ET水平显著升高(P〈0.01),NO水平显著降低(P〈0.01)。结论内皮细胞损伤,ET和NO比例失衡可能是血瘀证量化诊断的重要指标。 相似文献
55.
重组阳离子抗肿瘤肽AIK的原核表达、纯化及活性测定 总被引:2,自引:0,他引:2
利用Gateway克隆技术构建重组抗瘤肽AIK的原核表达体系,建立表达及纯化重组AIK的最优条件,为深入研究和利用AIK奠定基础。首先,设计含AttB重组位点的引物,通过重叠PCR技术扩增出Att B-TEV-FLAG-AIK序列,利用BP重组反应将目的序列TEV-FLAG-AIK克隆到供体载体pDONR223中,构建入门载体,再通过LR重组反应,将目的序列转移到目的载体pDEST15中,构建GST-AIK融合蛋白原核表达质粒。随后,在BL21(DE3)工程菌中优化诱导融合蛋白表达的条件。以谷胱甘肽磁珠纯化GST-AIK融合蛋白,再以rTEV酶切除GST,获得FLAG-AIK重组蛋白。最后以MTS法检测FLAG-AIK对白血病细胞HL-60的细胞毒性。菌液PCR验证和测序分析表明成功构建了重组抗瘤肽AIK的入门质粒和原核表达质粒。在BL21(DE3)工程菌中实现了GST-AIK融合蛋白的高效可溶性表达。并测得在37℃下以0.1 mmol/L IPTG诱导工程菌(OD600=1.0)4 h,重组蛋白表达量占菌体总蛋白的30%以上。经GST亲和层析、rTEV酶切除GST标签及二次GST亲和层析获得纯度高于95%的FLAG-AIK蛋白。MTS法测得所制备的FLAG-AIK蛋白抑瘤活性与化学合成的AIK相当。总之,本课题应用Gateway克隆系统成功构建了抗瘤肽AIK的原核表达质粒,实现了GST-AIK融合蛋白的高效可溶性表达,经亲和层析获得了有生物活性的重组AIK多肽,为后续深入研究和大规模制备奠定了基础。 相似文献
56.
57.
一种测定女贞子中齐墩果酸和熊果酸的新方法 总被引:1,自引:0,他引:1
为建立一种加速溶剂萃取-毛细管区带电泳测定女贞子中齐墩果酸和熊果酸的新方法.考察了萃取温度、萃取时间和萃取次数对目标物萃取效率的影响,并考察了硼砂浓度,β-环糊精浓度、pH及甲醇浓度对目标物分离的影响.结果表明:(1)萃取温度和萃取次数影响目标物的萃取效率,而萃取时间的影响很小;萃取压力影响萃取过程的重现性.(2)优化的萃取条件为:萃取压力6.9 MPa,萃取温度100℃,萃取时间5 min和萃取次数2次.(3)优化的缓冲体系为:40 mmol/L硼砂,1 mmol/Lβ-环糊精,pH 9.5及6%甲醇.(4)齐墩果酸和熊果酸分别在10~200、10~160 mg/L范围内线性良好,相关系数均大于0.996,检测限分别为3.2 mg/L和3.0 mg/L,加标回收率为93%~97%.对比了加速溶剂萃取、索氏提取以及超声提取的提取效率.(5)不同提取方法比较结果表明,加速溶剂萃取的提取效率与索氏提取法接近,但高于超声提取;加速溶剂萃取法的主要优点是消耗提取溶剂量少,提取时间短,样品用量小. 相似文献
58.
59.
目的:建立紫花地丁药材HPLC指纹图谱,提供药材质量控制的可靠方法。方法:采用HPLC方法,以Agi-lent C18(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,甲醇-0.5%醋酸水溶液进行梯度洗脱;检测波长353 nm,流速1.0mL/min。结果:检测了12批不同来源的紫花地丁药材,确立了18个共有峰,建立了紫花地丁对照指纹图谱,计算各被测样品的HPLC指纹图谱的整体相似度,并指认了菊苣苷、七叶内酯、东莨菪素、早开堇菜苷4个特征峰,比较了上述成分在不同药材中的含量。结论:所建立的指纹图谱具有良好的精密度、重现性和稳定性,可作为紫花地丁药材质量控制标准。 相似文献
60.
椿叶花椒叶挥发油化学成分的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
采用气相色谱-质谱联用仪分析,研究了用水蒸气蒸馏法提取的椿叶花椒叶挥发油的化学成分。结果表明:鉴定出33种成分,占挥发油总离子流色谱峰面积的99.99%。椿叶花椒叶挥发油的主要成分为2-壬酮,芳樟醇,β-水芹烯。 相似文献