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改进了一种分析磷酸酶活性的终止酶反应方法.该方法通过在酶反应进行到一定程度时,在反应混合物中加入酶反应终止液(1mol/L NaOH-0.2mol/L EDTA),从而使测定更简捷、精确. 相似文献
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从海洋细菌中筛选到一株产3-脱氧葡糖醛酮代谢酶活力较高的菌株Fs-4-C-3,并对其进行了最适产酶条件的研究。实验证明:以鱼肉蛋白胨为氮源、蔗糖为碳源,在培养基起始pH值为7.8~8.0,温度为28℃,盐度为5%的情况下,培养96h,产酶最高,3-DG可以诱导产酶。 相似文献
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目的:Aspergillus niger(CU-1)菌株α-葡萄糖苷酶基因(agdA)克隆并对其序列进行分析,构建该基因的真核表达载体。方法:设计合成的一对特异性引物,采用PCR以总DNA为模板,扩增得到DNA片段(D1);采用RT-PCR方法扩增得到DNA片段(D2)。将DNA片段D1和D2转入大肠杆菌中并进行了序列测定,序列进行BLAST比对分析。将α-葡萄糖苷酶基因的cDNA片段与表达载体pGAPZαA连接,构建重组表达载体。结果:基因agdA大小为3 127bp,含有3个外显子和4个内含子。该基因的cDNA序列大小为2 958bp,包含完整的编码框,编码985个氨基酸。agdA基因序列与已发表的α-葡萄糖苷基因序列同源性达99%,其中有6个位置的碱基发生了变化。已成功构建重组表达载体pGAPZαA-agdA。结论:Aspergillus niger(CU-1)菌株α-葡萄糖苷酶基因序列分析及重组表达载体pGAPZαA-agdA的构建为在毕赤酵母中表达Aspergillus niger(CU-1)菌株的α-葡萄糖苷酶奠定基础。 相似文献
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豆豉纤溶酶高产菌株的筛选研究 总被引:5,自引:0,他引:5
以中国豆豉为材料,取6个不同来源的样品经富集培养后,用自制血纤维蛋白平板进行初筛;利用LB纤维蛋白平板复筛与血琼脂平板进行体外溶血试验相结合的方法,筛选出安全性良好并有一定纤溶活性的菌株。再对复筛得到的菌株进行摇瓶培养,用纤维蛋白平板法测定并比较不同菌株发酵液的纤溶活性。结果成功地筛选出5株纤溶活性高和通过溶血性实验的芽孢杆菌菌株,其中菌株DC-C4粗酶液的酶活稍高,达到280IU/mL。采用16S-23S rDNA序列分析法及传统的生理生化特征鉴定法对该菌株进行鉴定,确定菌株DC-C4为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)。本实验为开发新型溶栓药物及保健食品提供了实验参考依据。 相似文献
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锌指蛋白ACEI和Xyrl是里氏木霉中调控纤维素酶和木聚糖酶形成的两个调控因子,它们能竞争性结合木聚糖酶基因xynl的启动子.为进一步研究ACEI和Xyr1调控纤维素酶基因表达的机制,本研究利用PCR技术扩增康氏木霉ACEI和Xyr1 DNA结合区的基因序列,并使其在大肠杆菌中得到表达.凝胶迁移率移动试验表明ACEI和Xyrl的DNA结合区均可与纤维素酶基因cbh1启动子的287 bp序列特异性结合.提示ACEI与Xyr1不仅能竞争性结合xynl启动子,也能竞争性结合cbhl启动子. 相似文献
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