夹竹桃麻素对双酚a诱导的成年雄性小鼠精子损伤作用的实验研究

目的:研究NADPH氧化酶抑制剂夹竹桃麻素(Apocynin)对双酚a(Bisphenol a,BPA)诱导的成年雄性小鼠精子损伤过程中的作用。方法:成年雄性小鼠给以BPA刺激,给以Apocynin(1 mg/kg/day和10 mg/kg/day,分别处理7 day)进行治疗,观察其对BPA诱导的成年雄性小鼠精子损伤的作用。结果:BPA处理组小鼠附睾精子数目和活力明显降低,血清中睾酮和黄体生成素水平明显减少;Apocynin治疗明显增加BPA处理组小鼠附睾中精子数目和活力,但是对血清中睾酮和黄体生成素水平没有明显影响。另外,BPA处理组小鼠睾丸中丙二醛(Malonaldehyde,MDA)水平明显增加;Apocynin治疗明显抑制了BPA处理组小鼠睾丸中MDA水平。结论:NADPH氧化酶抑制剂Apocynin减轻BPA诱导的成年雄性小鼠精子损伤。     

斜带石斑鱼PACAP的原核表达及活性分析

自1989年从绵羊下丘脑提取物发现垂体腺苷酸环化酶激活多肽（Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP）以来（Miyata et al．,1989）,已证明它能促进垂体激素释放,同时还具有神经递质、神经调质和神经营养等作用,使对PACAP的研究成为十分活跃的领域。PACAP属于血管活性肠肽（VIP）-胰高血糖素-生长激素释放因子-分泌素家族（Campbell and Scanes,1992）成员,已鉴别出包含27和38个氨基酸两种类型。对原索动物（McRory et al．,1997）、两栖类（蛙）（Alexandre et al．,2000）、爬行类（蜥蜴）（Pohland Wank,1998）、鸟类（鸡）（McRory et al．,1997）,啮齿类（鼠）（Ghatei et al．,1993）等脊椎动物PACAP的研究多集中在结构与进化方面,对功能了解甚少。     

不同施肥方式对温室樱桃番茄果实和土壤硝酸盐含量变化的影响

主要研究了不同施肥处理(肥料种类不同和施肥量配比不同)对温室樱桃番茄果实和土壤硝酸盐含量变化的影响.结果表明:不同施肥处理果实中硝酸盐含量随追肥次数的增加,逐渐加大,到采收中期达生育期内最大值,最终略有累积;果实中硝酸盐含量为49.6~273.0 m g.k-g 1,亚硝酸盐含量为0.011~0.054 m g.kg-1.第4次追肥后果实与土壤(0~40 cm土层)中硝酸盐含量在追肥后6~9 d达最大值,以后开始下降.果实内硝酸盐的累积量与土壤硝酸盐含量成显著正相关.合理的氮肥施用量不会造成果实内硝酸盐含量的过量累积;有机肥配施适量化肥对改善果实品质、提高果实产量、调节土壤硝酸盐含量变化有着很好的效果.     

降水变化和养分添加对呼伦贝尔草甸草原土壤呼吸的影响

土壤呼吸是陆地生态系统碳循环的重要组成部分,研究土壤呼吸对降水变化和养分沉降的响应有助于评估全球变化对生态系统碳循环的影响.然而,目前降水变化和养分沉降对土壤呼吸的交互影响研究相对较少.本研究以呼伦贝尔草甸草原为对象,通过增减雨和养分添加,模拟研究降水变化和养分沉降及其交互对草甸草原土壤呼吸的影响及其机制.结果表明:增...     

苏云金芽胞杆菌4.0718菌株中杀虫晶体蛋白基因的定位及鉴定

[目的]对苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)4.0718菌株中的杀虫晶体蛋白基因(insecticidal crystal protein gene,简称cry基因)进行定位和鉴定,系统分析高毒力Bt4.0718菌株的杀虫基因背景.[方法]采用脉冲电泳(PFGE)分离Bt 4.0718菌株的基因组DNA,确定该菌株的PFGE图谱和质粒图谱;采用Southern杂交分析该菌株中cry基因的定位,并使用PCR及PCR产物限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法鉴定该菌株染色体和质粒上含有的cry基因类型.[结果]确定了Bt 4.0718菌株的PFGE图谱和质粒图潜,鉴定到Bt4.0718菌株的染色体和质粒上均定位有cry基因,且分别包含crylAa、crylAc、cry2Aa和cry2Ab 4种基因成分.但染色体上含有的cry基因可能不如质粒上含有的cry基因具有完整的开放阅渎框.[结论]首次在Bt 4.0718菌株的染色体上发现有丰富的cry基因,且与质粒上含有的cry基因类型一致.     

甲基对硫磷降解菌L1的分离、鉴定及降解酶基因的克隆

从农药厂的污水处理池中分离到一株能高效降解甲基对硫磷的菌株L1,L1能以甲基对硫磷为惟一碳源、氮源和能源生长;经生理生化实验和16s rRNA同源性分析,初步将L1归为节杆菌属（Arthrobacter sp.）。紫外分光光度法对L1的降解性能研究表明,L1能在12h内将50mg/L的甲基对硫磷完全降解;用PCR方法克隆其甲基对硫磷降解酶基因mpd,这是迄今首次从革兰氏阳性菌中克隆到的mpd基因。     

一种简易小鼠尾部皮肤移植教学实验改良方法的建立

目的 为本校生物工程系实验动物学课程小鼠尾部皮肤移植实验课提供一种合适的操作方法.方法 分别用0.7%、1%、1.5%戊巴比妥钠和10%水合氯醛对小鼠进行麻醉试验,选出合适的麻醉方法;再进行小鼠尾部皮肤移植,对比玻璃套管法和创可贴法2种包扎方法的效果,以选出合适的手术方法.结果 0.7%和1%戊巴比妥钠麻醉持续时间过短,1.5%戊巴比妥钠和10%水合氯醛能维持足够手术操作所需的时间,但1.5%戊巴比妥钠易导致动物死亡,故采用10%水合氯醛麻醉小鼠较合适;玻璃套管法包扎的效果较创可贴法为好且更简便.结论 10%水合氯醛麻醉结合玻璃套管法包扎进行小鼠尾部皮肤移植是一种有效、简便、经济的小鼠尾部皮肤移植手术实验方法;此方法技术失败率低,适合学生实验课采用.     

RP-HPLC法测定盾叶薯蓣细胞中薯蓣皂甙元的含量

本文采用KromasilC - 18柱 (2 5 0× 4 6mm ,5 μm ) ,甲醇∶水 =95∶5流动相 ,流速 1 0mL/min ,UV检测器 ,检测波长 2 0 8nm ,对培养的盾叶薯蓣细胞中的薯蓣皂甙元含量进行测定 ,能将薯蓣皂甙元与杂质分离开 ,薯蓣皂甙元在 3 876～ 19 38μg范围内峰面积与其浓度线性关系良好 (R =0 9993) ,样品平均回收率为97 83% ,精密度RSD为 0 2 1% (n =4 )。该法测定样品快速准确 ,重复性好     

兔单个植入前克隆胚胎cDNA文库的构建

人与小鼠和牛在正常胚胎植入前发育过程中基因活化的研究已经取得了长足的进展 ,但是还没有对同期克隆胚胎相关研究的报道 .利用单个家兔植入前移核重构胚胎成功地构建了MⅡ卵母细胞及发育至 4 、8 细胞期的胚胎和囊胚的特异性cDNA文库 .并用 β肌动蛋白和LAPTM4α证实这类文库是可靠的 .以 8 细胞期移核重构胚cDNA文库为例 ,随机挑取克隆进行测序分析 :其中 2 3的基因EST片段可以在GenBank或EST库中找到同源序列 ,约 1 3的EST片段属于未知的新片段 ,表明这是一类重要的新兴基因资源库 (期特异性EST库 ) .这种利用单胚胎构建cDNA文库的方法 ,解决了胚胎研究材料受限的问题 ,在时间上更加精确 ,更符合胚胎发育的规律 ,也能够更加准确地反映出一些克隆胚胎的异常表型 ,是研究早期胚胎发育基因表达以及克隆胚胎再程序化基因表达的一种有效手段 .     

海南温泉嗜热菌的16S rDNA分析

目的:确定24株海南温泉嗜热菌菌株的分类地位。方法:Blastn分析菌株16S rDNA序列同源性;邻接法构建菌株16SrDNA序列系统发育进化树并分析菌株的进化位置;Clustax比对分析菌株的相似度和进化距离。结果:菌株LY5和LY4的16SrDNA序列与Geobacillus pallidus strain B1,partial sequence(GenBank:HM030740.1)的16S rDNA序列同源性分别为98%和97%,其他菌株的16S rDNA序列与Geobacillus subterraneus,strain R-35641(GenBank:FN428689.1)的16S rDNA序列的同源性均大于96%。Clustax比对分析表明26株菌16S rDNA序列前段(1～70bp)、中段(70bp～1 420bp)、后段(1 420～1 484bp)的相似度分别为40%、100%和60%,进化距离分析表明菌株GT7、LY4和LY5与其他菌株进化距离较远,其余菌株之间进化距离差异不明显。综上所述,初步将24株温泉嗜热菌鉴定为土芽孢杆菌属(Geobacillus sp.)。结论:16S rDNA序列分析可用于温泉嗜热菌的鉴定。