网络教学在研究生细胞培养实验中的应用

细胞培养技术是研究生开展科研工作的基础技术。充分利用网络教学的优势,以丰富的知识体系,多样的授课形式、生动形象的表现手段,有助于学生创造性理解和掌握,同时教师自身素质也得到相应的提高,达到教学相长的目的。     

腺病毒介导的Wnt10b对HaCaT细胞迁移的作用及机制

目的:探讨Wnt10b对Ha Ca T表皮细胞迁移的影响及机制。方法:分别用重组腺病毒Ad-GFP、Ad-GFP-Wnt10b感染Ha Ca T表皮细胞,利用细胞免疫荧光技术检测腺病毒Ad-GFP-Wnt10b感染细胞后的过表达情况;采用细胞划痕实验,于不同时间点观察并记录经Wnt10b处理后,Ha Ca T细胞体外迁移功能的改变;进一步采用Westen blot技术检测不同腺病毒处理后,Ha Ca T细胞中Wnt信号关键分子β-catenin、细胞粘附分子E-cadherin表达的改变情况。结果:1Ad-GFP-Wnt10b感染Ha Ca T细胞48 h后,细胞内GFP表达上调,细胞免疫荧光染色显示Wnt10b处理组高表达Wnt10b蛋白;2Ha Ca T细胞经Ad-GFP-Wnt10b处理后,细胞创面愈合速度明显增快;3Wnt10b处理组细胞β-catenin蛋白表达水平显著高于对照组,而E-cadherin蛋白表达水平显著低于对照组。结论:Wnt10b能促进Ha Ca T细胞迁移,且该效应涉及经典Wnt/β-catenin信号的激活及由E-cadherin介导的细胞粘附性的减弱。     

高核心岩藻糖基化母乳促进子代肠道双歧杆菌和乳杆菌的优势生长

目的探究母乳蛋白核心岩藻糖基化水平对新生儿肠道菌群结构的影响。方法采用凝集素(aspergillus oryzae lectin,AOL)检测不同母乳样本的蛋白核心岩藻糖基化水平,按照蛋白核心岩藻糖基化水平的高低将母乳样品分为高核心岩藻糖基化组和低核心岩藻糖基化组,采集两组母乳样品对应喂养的婴儿的粪便,利用PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)的方法检测两组婴儿粪便中菌群的组成。利用Fut8~(+/-)和Fut8~(+/+)模型小鼠作为母代让其分别哺育野生型子代仔鼠,以进一步阐明核心岩藻糖基化对新生儿肠道菌群的影响。结果母亲/母鼠母乳蛋白岩藻糖基化水平高组与低组相比,婴儿肠道中双歧杆菌菌群丰富度增加,仔鼠肠道内乳杆菌定植增加。结论高核心岩藻糖基化的母乳可以促进子代肠道中双歧杆菌和乳杆菌等益生菌的生长。     

人胚胎角膜上皮细胞系的建立和生物学特性

为构建角膜基础研究的稳定载体和操作平台,通过合法渠道获得人胚胎,并对角膜上皮细胞进行了分离培养。经反复传代,初步建立了人胚胎角膜上皮细胞系,并对其生物学特性进行了研究。结果显示,培养细胞具有较典型的上皮细胞特征。细胞生长较快,最快时两天可传代一次。K19和PCNA在各代胚胎角膜细胞均有表达,K19的表达部位位于胞浆,而PCNA的表达部位位于胞核。处于细胞周期中S期的细胞比例大约为11%￣23%。染色体核型分析表明各代细胞染色体的数目和形态相似。因此,人胚胎角膜上皮细胞适合于建立相对稳定的细胞系。培养细胞具有分化上的幼稚性和较强且稳定的增殖能力,细胞生长状态良好,而且该细胞系的遗传特征较为稳定。     

降水变化和养分添加对呼伦贝尔草甸草原土壤呼吸的影响

土壤呼吸是陆地生态系统碳循环的重要组成部分,研究土壤呼吸对降水变化和养分沉降的响应有助于评估全球变化对生态系统碳循环的影响.然而,目前降水变化和养分沉降对土壤呼吸的交互影响研究相对较少.本研究以呼伦贝尔草甸草原为对象,通过增减雨和养分添加,模拟研究降水变化和养分沉降及其交互对草甸草原土壤呼吸的影响及其机制.结果表明:增...     

母乳蛋白核心岩藻糖基化有利于新生儿肠道双歧杆菌增长

目的探究母乳蛋白核心岩藻糖基化水平的高低对新生儿肠道双歧杆菌丰富度的影响。方法采用凝集素印记(Lectin Blot, LB)检测不同母乳样品的母乳蛋白核心岩藻糖基化水平,根据蛋白核心岩藻糖基化水平的高低将母乳样品分为两组;采集两组母乳样品对应喂养的新生儿的粪便,通过16S RNA高通量测序的方法检测两组婴儿粪便中菌群的构成。结果母亲母乳蛋白核心岩藻糖基化水平高组相对于低组,其对应的新生儿肠道中双歧杆菌丰富度显著增高。结论高核心岩藻糖基化的母乳可以促进子代肠道中双歧杆菌的优势生长。     

人胚胎肠道肽能神经发育的定量研究

采用免疫细胞化学 PAP 技术,对不同胚胎龄(8～40周)的53例人胚胎小肠的亮氨酸—脑啡肽(L-ENK)、降钙素基因相关系肽(CGRP)、神经肽 Y(NPY)、P 物质(SP)和血管活性肠肽(VIP)等五种肽能神经的发生发育过程进行了观察,并应用形态计量方法和显微分光光度计对阳性神经元及神经纤维进行了定量测定,发现肽能神经元属“小神经元”,肽能神经发育的峰值在胚胎期四～六月。     

血小板反应蛋白2的结构、功能以及在创伤愈合中的作用

本文主要介绍近年来针对血小板反应蛋白2结构和功能(尤其在创伤愈合方面)的研究进展。     

尿激酶型纤溶酶原激活物的表达与毛囊细胞增殖关系的研究

为了研究毛囊外根鞘(outer root sheath,ORS)细胞尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase plasmino-gen activator,uPA)的表达与其细胞周期的关系,并探讨uPA对毛囊生长的调控作用,本文应用流式细胞仪对不同代龄的ORS细胞的细胞周期进行了 检测,并用免疫细胞化学和RT-PCR手段对相应代龄ORS细胞的uPA mRNA及蛋白质的表达进行了检测。结果显示,原代ORS细胞增殖旺盛,而3代ORS细胞增殖水平显著下降,增殖旺盛的ORS细胞uPA mRNA及蛋白表达较强,而增殖缓慢的ORS细胞uPA mRNA及蛋白的表达明显下降或不表达。说明ORS细胞的增殖水平与其uPA mRNA及蛋白的表达密切相关,uPA在毛囊生长早期的表达可以促进毛囊细胞增殖,利于毛囊发育。