高糖诱导内皮细胞损伤microRNA表达紊乱的体外研究

目的:研究高糖诱导的内皮细胞损伤微小RNA(microRNA,miRNA)的表达变化。方法:常规培养的人冠状动脉内皮细胞,利用不同浓度D-葡萄糖溶液(0 mmol/L、5 mmol/L、15 mmol/L和25 mmol/L),诱导刺激24 h后分别用CCK-8法和流式细胞术检测其生长活力和凋亡水平。收集细胞总RNA,利用实时定量PCR(Quantitative real-time PCR,q RT-PCR)检测miRNA的表达变化,同时利用TargetScan、PicTar等生物信息学预测软件预测可能的靶基因。结果:高糖溶液(25 mmol/L)刺激内皮细胞后,细胞生长活力明显降低,为对照组的67.5%(P0.01),凋亡水平为对照组的4.5倍(P0.01)。QRT-PCR结果显示miRNA的表达出现了明显的紊乱,其中miR-451、miR-504、miR-302d、miR-18b*、miR-198、miR-328和miR-517c明显下调,miR-29c、miR-100*、miR-137、miR-660和miR-217明显上调(P0.05)。靶基因预测发现miR-217和miR-451可能调控内皮细胞功能相关的多个基因的表达。结论:在高糖诱导的内皮细胞损伤中,miRNA表达紊乱提示其可能参与内皮细胞功能。     

一种限制性核酸内切酶的荧光测活方法

到目前为止,发现的限制性核酸内切酶已超过475种,它们都来源于原核生物。限制性内切酶是遗传工程等工作中的重要的工具酶,同时也为研究两类最重要的生物大分子蛋白质和核酸之间的相互作用提供了一个理想的模型。要深入开展酶的性质、动力学、化学修饰以及结构与功能的研究,定量测活方法的建立是一个前提。此类酶的定量测活方法已有十余种,它们各有其优缺点,但至今还没有一种方法能达到既准确灵敏、简单方便,又普遍适用的程度。     

人胰岛素基因的合成Ⅷ.表达型质粒的构建和在大肠杆菌内生产含胰岛素原的融合蛋白

我们已构建两组质粒,适合于在大肠杆菌内克隆基因和直接大量咸融合蛋白。这些质粒含有E.coli的lac启动基因和部分编码β-半乳糖苷酶的序列,编厔的蛋白长度约590或450个氨基酸殖基(原基因编码1023个氨基酸殖基)。被缩短的β-半乳糖苷酶基因的末端跟随一个多种限制性酶的接头序列;这个序列可被八种限制性酶中的任一种切断,然后插入任何蛋白基因。每组质粒有三种,可以满足所有三种不同的翻译读框。我们克隆了人工合成的入胰岛素原基因到这些质粒上去,在大肠杜菌内可以生产大量β-半乳糖苷酶残基—人胰岛素原融合蛋白。     

一步肝素琼脂糖亲和层析法分离纯化限制性核酸内切酶Pst1

Ⅱ型限制性内切酶是重要的工具酶。它的提纯方法,以前一般是破碎细胞,超速离心取得酶的粗提液后,先除去核酸,后用硫酸铵部分沉淀除去部分杂蛋白,再用各种柱层析法进一步纯化。Greene等人在1978年建立了直接用酶的粗提液,经过磷酸纤维素和羟基磷灰石两步柱层析提取酶的方法,所得酶制剂中不夹杂其它脱氧核糖核酸酶。此法较简便快速,已为国内外所采用。 Baksi等人报道用一步Cibacron Blue F3GA-琼脂糖亲和层析提取BamHl等酶。George等人报道Pstl的粗提液只经过这一步柱层析     

四膜虫S1株——上海四膜虫,新种

四膜虫S1是一株自接型四膜虫,根据形态特征应属梨形四膜虫复合种。本种除克隆内接合外,和其它十二种四膜虫均不接合。本种的异柠檬酸脱氢酶,四唑氧化酶,谷氨酸脱氢酶和乙酸酯酶的同功酶谱和其它十二种四膜虫相比,差异明显。此外,金亦石等(1987)所提供的S1和其它十种四膜虫的rDNA分子的四种限制性内切酶图谱也说明,S1株与除T.australis以外的其它九种的酶切图谱是显著不同的。据此,作者认为本种应是梨形四膜虫复合种中一新种,并定名为上海四膜虫。     

我国第一只全身CTX线管研制成功并通过鉴定

上海医疗器械九厂与协作单位上海交通大学、华东师范大学和核工业部九院六所经过三年多时间的努力,攻克了一系列技术难关,研制出“CT54型全身CTX线管”。最近在上海医药管理局主持下,通过鉴定。 CT54型全身CTX线管经中国上海医疗器械检测中心测试验证,其技术参数与指标均已达到西门子公司Optil51型管等国外同类产品水平。医院临床使用结果表明,摄片清晰,分辨率高,曝光寿命已达40000次以上,能够满足临床使用要求。该管不但能配套于“中华I型CT机”,而且还能配套     

广义向日葵方程的周期解

本文利用拓扑度理论,研究了一类广义向日葵方程周期解的存在性,获得了一些充分条件.     

一类时滞种群系统周期正解的稳定性

本文利用重合度论研究了一类时滞种群系统周期正解的存在性、唯一性及稳定性．     

具时滞的Hopfield型神经网络模型的全局渐近稳定性

本文研究了具时滞的Hopfield型神经网络模型平衡点的全局渐近稳定性,获得了一系列充分条件。     

山羊卵泡体外排卵的初步研究

山羊卵泡体外排卵的初步研究ＡＰＲＥＬＩＭＩＮＡＲＹＳＴＵＤＹＯＮＴＨＥＯＶＵＬＡＴＩＯＮＦＲＯＭＧＯＡＴＯＶＡＲＩＡＮＦＯＬＬＩＣＬＥＳＩＮＶＩＴＲＯ关键词山羊卵泡培养排卵ＫｅｙｗｏｒｄｓＧｏａｔ,Ｆｏｌｉｃｌｅ,Ｃｕｌｔｕｒｅ,Ｏｖｕｌａｔｉｏｎ１...