SM22α:血管平滑肌细胞分化的分子标志

SM22α是一种分化型血管平滑肌细胞(VSMC)的标志基因,编码一种22kDa的收缩调节蛋白。由于SM22α基因结构短小,表达具有VSMC特异性、调控机制较为清楚,因而被广泛用于VSMC发育分化的研究。利用该基因的表达调控特征,设计可在VSMC中高表达目的蛋白的人工启动子,是心血管病基因治疗的新策略。     

hhlim促进DMSO诱导的P19细胞向心肌分化

为了确定hhlim是否参与胚胎期的心肌分化和发育过程,用可表达hhlim蛋白和hhlim反义RNA的真核表达质粒转染P19胚胎干细胞,经G418筛选得到稳定表达hhlim和hhlim反义RNA的P19细胞克隆后,观察hhlim对P19细胞向心肌分化和发育的影响.结果显示,Nkx2.5和GATA-4在未被外源性hhlim基因转染的P19细胞中不表达.DMSO刺激细胞2天后,GATA-4开始表达,3天后Nkx2.5的表达活性显著升高.hhlim的过表达不但有利于P19细胞的存活和生长,而且还可以使Nkx2.5和GATA-4的表达比对照细胞提前1天.反义hhlim细胞株被DMSO诱导5天后,细胞仍呈集落化生长.同时,Nkx2.5和GATA-4开始表达的时间明显延滞.结果表明,hhlim能促进P19细胞向心肌细胞分化,其作用是通过促进转录因子GATA-4和Nkx2.5的表达而实现的.     

重组人EPO真核表达质粒在大鼠骨骼肌中的表达及其对贫血的治疗作用

目的和方法构建ＥＰＯ真核细胞表达载体（ｐｃＤ２ＥＰＯ）,用缝线法和注射法将其直接导入肾性贫血大鼠股四头肌,观察ＥＰＯ在骨骼肌细胞中的表达及其对贫血的治疗作用。结果：ｐｃＤ２ＥＰＯ导入股四头肌２周后,骨骼肌细胞内出现ＥＰＯｍＲＮＡ,提示被导入的ＥＰＯ基因在肌细胞内得到表达。贫血动物被治疗１周后,缝线组和注射组动物的ＨＧＢ和ＲＢＣ均显著升高;在第３周,缝线组的ＨＧＢ和ＲＢＣ接近健康大鼠的水平;至第４周,两个治疗组的ＨＧＢ和ＲＢＣ仍显著高于对照组。结论：经缝线法导入的ｐｃＤ２ＥＰＯ在骨骼肌中的表达效率及对贫血的治疗效果明显高于直接注射法,而两种治疗方法对改善肾性贫血动物肾脏清除ＢＵＮ的功能无明显差异     

红细胞生成素基因在大鼠体内的表达及表达产物的生物学效应

红细胞生成素（ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ,ＥＰＯ）是一种由胎儿肝脏和成人肾脏产生的多肽类生长因子,在体内的表达具有严格的组织特异性,因此,慢性肾病所引起的贫血常常难以得到有效的治疗．随着基因治疗技术的不断成熟与完善,尤其是近年一些实验室先后发现质粒...     

血管再狭窄发生过程中MMP-2基因表达与胶原转换的动态变化

建立主动脉内皮剥脱后血管再狭窄大鼠模型,用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 印迹分析、含明胶ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、羟脯氨酸含量测定及流式细胞术动态观察血管再狭窄发生过程中ＭＭＰ－２基因表达与胶原转换及血管细胞增殖之间的关系．实验结果表明,血管内皮剥脱后,ＭＭＰ－２基因表达被显著诱导,ＭＭＰ－２活性及胶原转换明显增高,在第７ ｄ,ＭＭＰ－２表达活性及胶原合成与降解均达到峰值;第２１ ｄ,ＭＭＰ－２表达恢复正常,胶原合成和降解仍维持在较高水平．流式细胞分析结果显示,血管内皮剥脱后进入增殖状态及发生凋亡的细胞显著增加,增殖细胞所占比例高于凋亡细胞,且两者均随内皮损伤后的时间延长而增加．     

医学院校中生物化学与分子生物学实验课教学的改革实践

为进一步提高生物化学与分子生物学实验课的教学质量,培养学生的综合素质和创新能力,在生物化学与分子生物学实验教学中开展了一系列改革,取得了很好的效果。对改革教学法、丰富教学内容、编订新教材、开放实验室及建立完善综合考核制度等方面改革的必要性及近年来在这些方面实施改革的特色性进行总结,为医学院校实验课教学提供参考。     

人TNFAIP1 基因在常见细胞系中的表达

TNFAIP1蛋白是第一个被鉴定受肿瘤坏死因子α诱导的蛋白,TNFAIP1 蛋白可能参与DNA复制、合成、细胞凋亡以及人类各种疾病的发生等重要过程,但对该基因确切功能和作用机制研究不多.该文利用实时定量PCR的方法检测该基因在几种常见细胞系的表达情况,发现在COS7以及NIH3T3细胞系中高表达,而在HeLa、HepG2、SW480、PanC1、MCF7等癌细胞系中低表达.由此推测TNFAIP1可能在癌症的发生中起到一定的作用.如果把TNFAIP1 基因克隆到真核表达载体pCMV-Myc中,转染到HeLa细胞系中,发现过表达TNFAIP1 可促进HeLa细胞的凋亡.     

中国东北样带羊草群落C3和C4植物功能群生物量及其对环境变化的响应

在全球动态植被模型的发展中,受限于人力、物力和财力使得在物种水平上的研究变得既不可能也无必要。植物功能群的划分是从生态学的,而不是系统发育的角度来相互比较地对待不同地区的植物,从而削减了植被变化研究中植物分类群的数量,已成为研究植被变化及生物多样性对生态系统功能作用的重要单位。植物的不同光合途径（C3、C4和CAM）从叶片组织结构到生理功能,从生态适应到地理分布均表现出对不同水、热、光环境的响应,是理想的植物功能群分类。为此,分析了中国东北样带以羊草（Leymus chinensis）为建群种或共建种的草原群落植物光合类型功能群生物量及其与群落初级生产力和环境变化的关系。结果表明：（1）C4植物生物量具有明显的变化规律,且对环境变化的响应显著,其变异性较高,更能反映样地问环境变化的差异;（2）C4与C3植物变化具有明显的互补性,并且多数C4植物常在逆境中起到更大作用,如干旱化、盐碱化和放牧干扰;（3）C4植物种类少,在所有调查样方中仅出现7种,占总出现种类的9．72％。这些特点说明C4植物可以考虑作为评估和预测我国温带草原植被及其生态系统变化的重要植物功能群。     

水分供给量对黄芩生长与光合特性的影响

在黄芩生长季节设4种供水处理,即严重干旱处理Ⅰ(150mm)、中度干旱处理Ⅱ(250mm)、轻度干旱处理Ⅲ(350mm)、充分供水处理Ⅳ(450mm)作对照,研究了水分供给量对黄芩生长与光合特性的影响。结果表明,水分供给量250mm和350mm处理,黄芩生长好,地上部、地下部和总生物量均较高,Pn日均值为13·24~12·76μmolCO2·m-2·s-1;水分供给量150mm和450mm处理,黄芩地上部、地下部和总生物量均较低;水分供给量350mm和450mm处理,黄芩Pn出现光合“午休”现象,呈不明显双峰曲线;水分供给量250mm和350mm处理,黄芩Pn与Ci呈显著正相关(p<0·05);WUE在150mm处理较高,与450mm处理差异达显著水平(p<0·05);黄芩Pn降低是气孔因素和非气孔因素共同作用,上午和下午气孔因素为主,中午非气孔因素为主;黄芩比较耐旱,适度的干旱提高黄芩Pn和药用部位根的生物量,提高黄芩根部黄芩苷的含量,吉林省黄芩规模种植区应选择黄芩生长季节降水量250~350mm的地区。     

整合素β3亚单位胞内区在骨桥蛋白诱导血管平滑肌细胞黏附和迁移中的作用

为阐明整合素β3亚单位胞内区及其不同保守序列在骨桥蛋白（OPN）诱导血管平滑肌细胞（VSMC）黏附和迁移中所起的作用, 构建了整合素β3亚单位胞内区肽段真核表达载体（p-EGFP-C3-β3CD）, 并人工合成了含有β3亚单位胞内区不同保守序列（NXXY）的寡肽（肽-747和肽-759）, 通过导入VSMC, 观察它们对OPN诱导VSMC黏附和迁移的影响.结果显示, 整合素β3胞内区在VSMC中强制性表达可使细胞在OPN上的黏附和迁移明显下降（分别为对照组的34.3%和31.7%）,导入肽-747、肽-759和肽-747+肽-759均可显著抑制VSMC的黏附和迁移, 其中肽-747+肽-759的作用更强(分别为对照组的36.4%和31.1%). 免疫荧光结果显示, 在转染p-EGFP-C3-β3-CD或肽-747+肽-759的VSMC中, 黏着斑蛋白的磷酸化水平降低, 黏着斑形成明显减少.研究结果表明, 整合素β3亚单位胞内区及其NXXY保守序列在黏着斑相关蛋白募集、黏着斑形成及VSMC黏附和迁移方面发挥重要作用.