黑曲霉As3.4309发酵转化芦丁的研究

目的:利用黑曲霉As3.4309发酵产酶,对芦丁的二元糖苷链进行水解,以得到苷元槲皮素.方法:研究黑曲霉As3.4309的最佳产酶条件,对芦丁进行生物转化;用凝胶层析进行转化产物的分离纯化,核磁共振法鉴定其结构.结果:黑曲霉As3.4309发酵转化芦丁的最佳条件:pH为7.0,碳源为3%稻草粉、2%麸皮,氮源为0.5%硫酸铵、0.5%蛋白胨,KH2PO4 3.0mg/mL,MsSO4·7H2O 0.5mg/mL,FeSO4·7H2O 7.5mgL,MnSO4·H2O 2.5mg/L、ZnSO4 2.0mg/L、CoCl2 3.0mg/L,温度30℃,转速180r/min,接种量10%.主要转化产物经过鉴定为槲皮素.结论:该方法简单方便,有效地实现了芦丁的转化,转化产物槲皮素的转化率达到54.36%.     

繁茂膜海绵中可培养稀有放线菌的多样性

摘要：【目的】本文旨在尝试改进分离培养方法从大连海域繁茂膜海绵中筛选稀有放线菌,并对其多样性进行研究。【方法】根据繁茂膜海绵元素组成配制微量元素溶液,加入到放线菌分离培养基中,同时将部分培养基稀释成寡营养培养基,结合富集培养法,对繁茂膜海绵中放线菌进行分离培养。采用16S rDNA的限制性片断长度多态性(Restriction Fragment Length Polymorphism, RFLP)分析和序列分析,揭示其多样性。【结果】共获得可培养放线菌59株,通过形态、颜色观察,将其归为27个类群。RFLP分析表现为15种不同的图谱类型。16S rDNA序列分析表明：它们分别属于放线菌的10个属,其中布劳氏菌属（Prauseria）和糖单胞菌属（Saccharomonospora）是首次报道从海绵中分离培养。【结论】改进的分离培养基适合于繁茂膜海绵中稀有放线菌的分离培养,进一步揭示了该海绵中丰富的稀有放线菌,同样的方法有可能应用于其他海绵放线菌的分离培养。     

大鼠SR-BI胞外域与ApoA-I蛋白相互作用的确认*

先以含全长SR-BIcDNA序列的重组质粒pMD18-T-rS为摸板进行PCR反应扩增SR-BI得到胞外域cDNA片段,经测序证明正确后,定向克隆到酵母双杂交表达载体,然后与pGBKT7-ApoA-I质粒共转化酵母细胞,通过报告基因及酵母交配试验确认了SR-BI的胞外域部分和ApoA-I之间的确存,观察到ApoA-I与SR-BI胞外域间的相互作用力比与全长的SR-BI间的相互作用力提高了10%。     

CMO与BADH双基因表达载体构建及在烟草中的表达

本研究的目的是将甜菜碱合成关键酶CMO与BADH基因构建到同一表达载体中,利用转基因方法将该表达载体导入植物体内,完善植物体内的甜菜碱合成途径,提高植物的抗旱性和耐盐性。以pC1303质粒为基础,构建了均由35S启动子驱动的CMO基因和BADH基因的植物双基因表达载体pC35SC35SB1303。利用冻融法将其导入农杆菌LBA4404中,通过农杆菌介导法分别将CMO基因、BADH基因以及该双基因表达载体导入烟草中,PCR检测和Northern杂交分析表明,外源基因已整合到受体植物基因组中并正常表达。对转基因植株及对照植株甜菜碱含量的检测结果表明,转双基因植株的甜菜碱含量明显高于转BADH基因植株、转CMO基因植株及对照植株。     

羊肚菌原生质体制备与再生*

羊肚菌原生质体制备的最佳条件为以培养3d的菌丝体为材料,0.6mol/L蔗糖溶液为稳渗剂,1.5%浓度的溶壁酶30℃条件下酶解3个小时,可得原生质体产量最高为3.35×106个/100mg.以0.6mol/L的蔗糖溶液做稳渗剂,CYM再生培养基上得到原生质体再生率为0.171%.这一研究结果为羊肚菌通过原生质体技术进行菌株的遗传改良提供了重要技术参数.     

红脂大小蠹的发生和危害规律

采用标准地调查和单株调查的方法,研究了红脂大小蠹的发生和危害规律。结果表明：红脂大小蠹主要为害油松的基部和根部,多为胸径7．5cm以上、树龄30年生以上的树木,幼龄树受害很少;海拔850m以上的树木受害重,且随海拔的增高危害加重;路边树木受害最为严重,其次是山顶,林缘树木受害较轻,林内树木受害最轻;在不同坡向分布的树木,阴坡受害大于半阴坡,半阴坡大于阳坡;此外,该害虫一般侵害树势衰弱的林木,随着树势衰弱程度的增加,其危害程度加重,树体内害虫数量与树木的衰弱程度呈线性相关,其方程为Y=13．32X-16．25,此方程可以用来推断红脂大小蠹可能发生的程度。     

侧耳属核rDNA转录间区扩增产物的限制性酶切分析

对侧耳属18个形态种52个菌株和蘑菇属、香茹属、亚侧耳属各1个菌株的核糖体DNA转录间区进行PCR特异性扩增后,用7种限制性内切酶进行酶切分析。结果表明,BamH I对所有的菌株均无酶切位点;Alu I,Hae III,Hinf I,Hha I,MspI可分别将52个菌株分为6,5,5,4,2,2组,且可将金顶侧耳与其它侧耳区分开。基于限制性酶切多态性构建的聚类图表明,在93%相似水平,可将所有的侧耳分为七组,第一组：糙皮侧耳、佛罗里达侧耳、美味侧耳、裂皮侧耳、黄白侧耳、哥伦比亚侧耳、灰白侧耳、白阿魏蘑、阿魏蘑及一些未定名的侧耳;第二组：刺芹侧耳;第三组：肺形侧耳和凤尾茹;第四组：具核侧耳;第五组：鲍鱼茹和囊盖侧耳;第六组：红平茹和桃红侧耳;第七组：金顶侧耳。聚类图结果进一步表明,金顶侧耳与其它侧耳的关系较双孢蘑菇和香茹与其它侧耳的关系要远。     

维生素C衍生物对癌细胞浸润转移能力的抑制作用机理研究

前期研究表明Asc2P6P1m能够有效地抑制癌细胞的浸润转移。本文试图以Asc2P6P1m对人成纤维瘤细胞浸润转移作用探讨维生素C衍生物对癌细胞转移能力抑制的机理。对HT-1080细胞分别以50—300μmol/LAsc2P6P1m处理1h,随着Asc2P6P1m浓度的增大,细胞移动的数目明显减少,Asc2P6P1m对HT-1080细胞移动的抑制作用呈现出量效关系。Asc2P6P1m对ROS的清除作用,通过自旋捕集剂DMPO以电子自旋共振方法进行研究。HT-1080细胞经Asc2P6P1m处理后,细胞内的自由基水平与对照组相比有显著的降低。用F-actin的分子探针NBD研究表明,随处理时间延长,细胞内荧光强度与对照组相比显著降低。Western blots研究表明,细胞核内的RhoA蛋白量随Asc2P6P1m处理时间延长而逐渐增加。研究提示,Asc2P6P1m对癌细胞浸润转移能力的抑制作用是与抑制癌细胞内的ROS、提高细胞核内RhoA水平、降低细胞质内F-actin相关。     

中国上石炭统滑石板阶层型剖面的蜓

本文详细研究了贵州盘县滑石板村滑石板阶层型剖面的蜓?C0喽锶海?属26种及亚种,其中1未定种。滑石板阶包含2个蜓?B4籔seudostaffella antiqua-P．antiqua posterior带及Pseudostaffella composita-P．paracompressa带。滑石板阶底界以蜓?BB疎ostaffellina protvae—Pseudostaffella antiqua演化系列中Pseudostaffella antiqua首次出现为标志,具体位置在层型剖面的层1,层型点置于层1之底AAK56点上;顶界止于筵化石Profuslinella priscoidea带之底。滑石板阶的Pseudostaffella antiqua-P．antiqua posterior带可以和俄罗斯下巴什基尔阶Severoketmensky层的Pseudostaffella antiqua带对比;滑石板阶的Pseudostaffella composita—P．paracompressa带大致与俄罗斯下巴什基尔阶Prikamsky层的Pseudostaffella praegorski—Profusulinella staffellaeformis带的一部分对比。滑石板阶大致相当于国际地层表中的巴什基尔阶(Bashkirian)中部。     

杏鲍菇黄酮提取工艺的优化

研究了利用超声波辅助复合酶法提取杏鲍菇黄酮的最优条件。在单因素试验的基础上,固定其他影响因素,选择料液比、超声时间、酶解温度和酶解pH进行四因素三水平的正交试验。结果表明：料液比为1∶50 （g/mL）、超声时间为6 min、酶解温度为50℃、酶解pH为54的条件下,获得的黄酮提取率最高,可达3352%。