飞机草花蕾中Beclin1基因的克隆与表达

以入侵植物飞机草的不同时期花蕾为材料,利用RT-PCR法扩增得到了与PCD相关的类Beclin1基因的部分cDNA序列（大约700bp）,与烟草叶片中的基因序列（AY701316）同源性为95％;Northern blotting结果表明类Beclin1基因。在花蕾发育中期的表达量高于初期和后期;通过DNA ladder检测表明在花蕾发育过程中伴随着PCD的发生,这些结果表明花蕾发育中期是PCD初期发生的活跃期,是绒毡层逐渐退化和花粉不断形成的过程。通过对生殖过程中的细胞程序性死亡的分子生物学研究,初步揭示了飞机草入侵过程与PCD的相互关系。     

大豆疫霉根腐病菌的rDNA ITS序列分析

采用真菌核糖体基因转录间隔区(ITS)通用引物,PCR扩增了大豆疫霉根腐病菌具有差异的17个菌株的ITSI与ITS2,经过与DL2000的标准分子量DNA进行比较,得到了大约800~1000bp左右的片段,并对PCR产物进行了序列测定。以USA为外类群利用最大简约法构建了大豆疫霉根腐病菌的系统发生树,并分析了菌株之间的遗传进化关系。结果表明:不同菌株ITS1和ITS2在碱基构成上有很大差异,17个菌株大致分为4个谱系中,且来自于同一地区的菌株大都分布在同一谱系中,显示出地理上的差异。     

藏花素对H_2O_2诱导PC12细胞Bcl-2、Bax和Caspase-3的影响

本文通过观察藏花素对H2O2诱导的PC12细胞的保护作用和对Bcl-2、Bax和Caspase-3的影响,探讨藏花素对阿尔茨海默病细胞模型保护作用的机制。MTT法及LDH活性测定观察藏花素对PC12细胞模型的影响,RT-PCR检测Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA表达水平,Western blot检测Bcl-2、Bax和Caspase-3的蛋白表达。藏花素预保护浓度在0.625μM和5μM之间,细胞存活率随着藏花素浓度的升高而升高;藏花素组和VE组与模型组相比,Bcl-2 mRNA和蛋白表达增加(P0.05),Bax和Caspase-3 mRNA和蛋白表达降低(P0.05)。研究结果表明:藏花素可能是通过上调Bcl-2的表达,从而介导PC12细胞发挥抗氧化和细胞凋亡的生物学功能。     

透明颤菌血红蛋白的结构功能和应用进展

透明颤菌血红蛋白(VHb)是科学家发现的第一种微生物血红蛋白,它的结构、生化功能以及表达调控机制都已经得到广泛的研究。VHb可以在很多宿主细胞中表达,通过促进氧的输送增强呼吸和能量代谢,以提高许多有用的代谢产物(抗生素、蛋白质、聚合物等)的产量和宿主抗逆性,还能降低有害化合物的毒害。重点从VHb的功能与结构、在提高微生物代谢产物的产量,以及对动植物某些特性的影响和增加生物修复能力等方面的应用进展进行了综述,并对VHb在植物代谢和动物代谢中具有很大的发展空间进行了展望。     

基于压力-状态-响应和物元可拓模型的城市河流健康评价

城市河流作为人类活动和自然过程相互作用强烈的区域,承受着人类资源开发利用和污染物排放的压力,但近些年来随着对河流健康的重视,针对城市河流实施了大量的生态治理措施。综合考虑人类正负面影响对河流健康状态的影响,进行河流健康状态的评价,对于城市河流的修复效果检验和管理保护具有重要意义。以南京市鼓楼区典型城市河流西北护城河为研究区,根据河流周边土地利用类型、物理形态差异及城市管网分布将其划分为6个河段,考虑人类修复措施对河流健康水平的影响,构建了基于压力-状态-响应(Pressure-State-Response,PSR)模型的城市河流健康评价指标体系,采用物元可拓模型确定了河段健康等级,并根据各等级综合关联度之间的距离判断河流健康水平的发展趋势。结果表明:压力、状态以及响应准则层的权重分别为0.458、0.311、0.231,压力指标为影响城市河流健康水平的主要因素;西北护城河6个河段的健康水平表现出较强的空间异质性,河段A-F的健康等级分别为中等、健康、亚健康、中等、亚病态和病态,流经公园绿地的河段健康水平明显高于流经居民住宅区的河段,河段B、C、D的健康水平有进一步提升的趋势,而河段A、E、F的健康状态则有进一步恶化的趋势,需要进行重点关注。     

MRI在喉癌术前分期中的临床应用价值

目的:探讨MRI在喉癌术前诊断、分期中的临床应用价值。方法:对114例行电子喉镜检查并经病理学证实为喉癌的患者行术前MRI扫描,根据图像资料判断肿瘤侵及范围及判断有无淋巴结转移;同时进行术前分期、分型,并与术后病理分期、分型对照研究。结果:术前MRI T1期27例,其中25例经病理证实为T1期,2例为T2期,准确率为92.6%;术前MRI T2期39例,其中经病理证实35例为T2期,3例T1期,1例T3期,准确率为89.7%;术前MRI T3期29例,其中经病理证实25例为T3期,4例T2期,准确率为86.2%;术前MRI T4期17例,其中经病理证实15例为T4期,2例T3期,准确率为88.2%;MRI术前T分期总准确率为87.7%。N1期准确率为81.8%,N2期准确率为94.1%。结论:MRI图像能很好地显示喉癌肿块的侵及范围及淋巴结转移等,对喉癌的术前分期、分型及制定合理的手术方案具有指导意义。     

基因差异转录表达验证方法研究进展

基因的差异表达与组织、细胞的生物学性状和功能密切相关,随着对组织、器官分化及细胞、生物个体生长发育等的深入研究,大量差异转录基因的验证分析变得越来越重要。为此,该领域基于核酸互补配对和PCR原理建立了Northern blot和荧光定量PCR等一系列基因差异转录分析技术,利用这些方法对不同处理、不同组织器官、不同发育时段的基因差异转录进行了验证分析,为后续的基因功能分析奠定了坚实基础,并且通过检测分析,使基因差异表达分析方法由定性到定量、由繁琐复杂到简单快速、由以大量RNA为前提到对少量RNA样品的检测,甚至建立了单细胞荧光定量PCR方法,基因差异转录验证方法正在向更高效、精准方向发展,并使成本逐步降低。但是,到目前为止,生殖细胞等样品取样较为困难、精子等RNA含量较少样品的基因差异表达验证挑战性还仍然很大。从验证方法发展历程的角度,对基因差异转录验证方法进行了总结,希望为取样难度较大、RNA含量较低样品的基因差异表达分析提供有价值的参考。     

潮霉素抗性转基因BDF1小鼠模型的建立

目的建立具有潮霉素（hygromycin）抗性转基因BDF1小鼠,用于制备携有hygromycin抗性筛选标志ES阳性细胞克隆的饲养层。方法通过显微注射的方法,将含有潮霉素B磷酸转移酶基因片段（5.1kb）导入BDF1受精卵雄原核中,共注射169枚受精卵,然后将129枚受精卵细胞植入同期受孕的受体母鼠输卵管内。结果共产生37只转基因小鼠,经PCR和Southern检测获得9只阳性小鼠,对一只子代鼠进行RT-PCR检测证明hyg基因已经在肾、肌肉、脾内表达。结论成功的建立具有潮霉素抗性的BDF1转基因鼠,该模型动物可以为基因敲除研究提供良好的基础条件。     

中药熏洗在肛瘘患者经挂线引流术后的临床应用

目的:探讨中药熏洗在肛瘘患者经挂线引流术后的临床应用效果。方法:收集我院收治的70例肛瘘挂线引流术后患者,随机分为实验组和对照组,每组35例,患者均行肛瘘经挂线引流术,术后对照组给予常规护理治疗,实验组患者给予自拟熏洗方进行中药熏洗。治疗结束后,比较两组患者的疼痛持续时间、恢复时间、创面愈合速度、症状评分并发症发生率以及复发率。结果:与治疗前相比,两组患者治疗后的症状评分均显著下降(P0.05),而实验组患者治疗后的症状评分、疼痛持续时间、恢复时间、并发症发生率以及复发率明显低于对照组(P0.05),创面愈合速度显著快于对照组(P0.05)。结论:中药熏洗能够有效促进肛瘘患者经挂线引流术后恢复并减少复发,且安全性较高。     

索利那新治疗双"J" 管置入后尿路感染症状的疗效观察

目的:观察琥珀酸索利那新对经皮肾镜碎石取石术患者术后留置双"J"管期间发生泌尿系统感染的疗效。方法:回顾性分析133例成功行经皮肾镜碎石取石术并常规留置双"J"管的患者,随机分为治疗组(n=67)和对照组(n=66)。治疗组给予索利那新片治疗,对照组仅给予饮水、休息等常规治疗。所有患者在置管5周后(拔管前一天)均随访并完成血、尿常规检验。结果:治疗组血、尿常规白细胞计数均低于对照组,治疗组均较对照组的泌尿系统的感染发生率低(P0.05)。结论:口服索利那新能有效降低泌尿系统感染的可能性,降低患者在置管期间出现尿频、尿急、血尿、腰部疼痛、发热等并发症的概率,提高患者的生活质量,值得临床推广应用。