利用白树脂进行植物电镜制样

电子显微镜的分辨率在实际应用中。一方面取决于电镜本身的分辨率,同时还取决于标本的结构和反差。标本的结构在很大程度上受标本制备技术的影响,标本制备工作是电镜工作中最繁重最艰难的工作,同时又是重要的环节。目前,我们在电镜制样中,多用环氧树脂618,Epon812和Spurr为渗透包埋剂。由于这三种包埋剂粘度较高,并需同其它药剂配合使用,因此,在电镜样品制     

科学出版社新书

病毒的电子显微学技术张景强著主要介绍研究病毒的各种电子显微学方法以及最新进展和取得的成果,内容包括:病毒样品的超薄切片技术,病毒的分离、纯化和病毒样颗粒的组装,病毒免疫电镜技术,生物材料的高分辨率电子显微技术,冷冻电镜单颗粒技术和冷冻电镜电子断层成像技术等。理论介绍尽量做到浅显易懂,书中示例也取自经典的或者最近几年的科研成果。此外,在绪论中简     

电镜原位分子杂交技术及其应用

原位分子杂交技术应用于电镜水平,观察标记的特定DNA、mRNA和RHA在细胞和/或组织内的超微结构定位的方法,称为电镜原位分子杂交技术。本文综述了电镜原位分子杂交技术的建立及其分类,并详细介绍了非放射性电镜原位分子杂交技术的基本操作程序及注意事项,最后对电镜原位分子杂交技术的应用做了简要介绍。     

免疫电镜法

免疫电镜法是把免疫化学技术与电镜技术有机地结合起来,研究抗原抗体相互作用的一种技术方法。随着电镜分辨率的提高和电镜对组织细胞及微生物超微结构研究的发展,为从超微结构水平或分子水平上研究免疫作用,提供了良好条件。现将最广泛应用的铁蛋白抗体法和酶抗体法简介如下。 (一)铁蛋白抗体法 铁蛋白性质随动物种类不同而有所不同,最常用的是马脾铁蛋白,在电镜下可见直径约100的蛋白壳,壳内有直径为55的铁核心。使用市售铁蛋白前要经过提纯。     

结构生物学研究方法的重大突破——电子直接探测相机在冷冻电镜中的应用

近年来,科学家应用冷冻电镜技术(cryo-EM)解析出了低对称性生物大分子的高分辨率(3~5魡)三维结构,并用其密度图直接进行了分子建模。与传统的X-射线和NMR方法相比,冷冻电镜技术具有适用于分子量较大的生物分子、样品不需结晶且用量很少等优势。尤其是电子直接探测相机(electron direct detection device,DDD)在冷冻电镜技术中的应用,使高分辨率的结构研究变得更加简单、应用更为广泛,是一个重大突破。文章介绍DDD相机的原理和技术优势,及其在解决冷冻电镜技术困难中的一些应用,进而展望了DDD相机可能给冷冻电镜技术应用带来的突破性进展。     

电子显微镜新进展及其生物学研究技术简介

自五十年代电子显微镜技术广泛应用于生物学研究领域以来,人们才能在亚细胞水平上探索生命的奥秘。随着研究的深入,电镜技术本身也在迅速发展。广大生物学研究工作者也越来越多地采用了各种不同的电镜技术。本文简要介绍近几年来有关透射电镜、扫描电镜、扫描透射电镜的新进展以及电镜放射自显影、免疫电镜、电镜细胞化学、冰冻蚀刻、生物高分子的电镜研究等生物学电镜研究技术,以供选择研究方法时参考。     

植物电子显微镜的负染和投影技术

电子显微镜技术是目前生物学研究中重要的手段之一。运用电镜开展研究,不仅要有高分辨本领的仪器,而且要有精心制备的样品。由于生物样品的电子散射力很低,如不经过特殊处理,样品的反差极弱,观察精细结构几乎不可能。因此,样品制备的质量在利用电镜的研究中具有极其重要的地位。制备样品的技术包括超薄切片、负染、投影、复型等,本文着重介绍负染和投影技术。     

光学衍射技术分析生物样品的电镜照片

光学衍射技术在当前已成为生物电子显微术中一个重要的组成部分,它不仅是高分辨率电镜工作所不可缺少的手段,而且还可以用来帮助处理电镜照片,分析样品的结构。我们利用自己改装的光学衍射仪观察分析了一些生物样品,充分显示了这种技术的优点。下面举例说明:     

免疫电镜对实验感染小鼠体内Q热立克次体的检出

近年来用免疫电镜技术发现和鉴定病毒的报道日益增多。免疫电镜技术的特点是,利用电镜高度的放大率和分辨能力,能直接看到抗原抗体之间的特异性反应和免疫复合物的形态学特征,故具有高度的敏感性和特异性。这对于发现和鉴定病毒与立克次体是十分有用的。为寻求Q热的快速和敏感的实验诊断方法,我们作了免疫电镜技术检出实验动物中Q热立克次体的初步研究,现将结果报告如下。     

招聘启事

<正>生化与细胞所丛尧研究组招聘博士后丛尧研究组主要应用冷冻电镜(cryo-EM)技术从事蛋白质质量控制及表观遗传中重要生物超大分子复合体的结构与功能研究(介绍见http://www.sibcb.ac.cn/Pl.asp?id=141)。现因工作需要,面向社会公开招聘博士后研究人员1名。所在的国家蛋白质科学中心·上海配备一流的冷冻电镜设施,包括配有直接     

核酸电镜术简介

当前在核酸分子的生物化学方面已有比较深入的研究,而用电子显微镜来观察核酸分子及其变化的工作正在不断发展,这方面的研究以及技术上的改革层出不穷。限于篇幅,这里只能结合自己的工作将核酸电镜的一些主要方法和用途介绍一下。Ferguson和Davis(1978)     

人胚心肌细胞超微结构

自第一次报告鸡胚心肌发育的电子显微镜研究以来,其他学者陆续报告了小鼠等动物胚胎心肌的电镜研究,人胚心肌细胞间连接、人胚心的刺激传导系发生学的研究和人胚心肌发生的电镜研究,等一系列工作。国内对人胚心肌细胞的研究不多,本文报     

低温电镜技术及其在植物（动物）材料研究中的应用

通过一些实例介绍了高压冷冻,冷冻置换和冷冻超薄切片等低温电镜样品制备技术,并且与传统方法对照,说明低温电镜技术的优越性,其中,发菜（Nostoc flagelliforme)营养细胞的冷冻超薄切片（未经化学固定,脱水）所显示的超微结构更客观地反映了生物样品的自然生理状态。此外,应用高压冷冻和冷冻置换的免疫标记电镜技术,首次对发菜营养细胞中的DNA进行定位,明确了核区的位置及范围。     

“电子显微学与结构生物学”系列讲座（一）

生物电子显微学是结构生物学的重要分支,主要包括电子晶体学（electron crystallography）、单颗粒技术（single particle technique）,电子断层成像技术（electron tomography）,以及冷冻电镜技术（cryo-EM）,适于从分子到细胞各个结构层次的三维结构研究,与X-射线晶体学和核磁共振谱学一道,是结构生物学的重要研究手段。本次研讨会旨在分析该领域国际发展趋势,促进国内合作研究,整合国内资源,加强人才培养。     

离子蚀刻扫描电镜技术在生物样品制备中的应用

近年来离子蚀刻技术已成为扫描电镜样品制备中的一种新方法。由于其操作简便,效果显著,应用日趋普遍。国外在生物样品的离子蚀刻方面做了不少工作,Lewis 等1969年用这一方法观察了红细胞、胰脏外分泌细胞的核表面结构,看到了特异的放射状结构和核孔分布的情况。国内不少电镜工作者在化工等样品     

始于努力,续于真诚,臻于共赢

2010年第7期,<学报>为在生物物理研究所举办的电镜三维重构学习班出版了一期专刊,其中除了两篇与电镜三维重构相关的研究论文之外,在朝仡夕拾栏目发表了北京大学医学部尹长城老师撰写的一篇介绍运用电子显微镜研究生物人分子起源及进展的文章,另外四篇综述分别讨论了电镜三维重构、单颗粒电镜、冷冻电镜断层成像技术及三维电镜自动化...     

电子显微三维重构技术发展与前沿

本文对电子显微三维重构技术(也称电镜三维重构,electron microscopy 3D reconstruction)进行简要介绍,并在此基础上对该技术当前研究的发展和前沿进行综述,包括高分辨率电镜三维重构、仪器设备性能突破、自动化数据收集和处理、高性能计算技术应用、二/三维图像处理技术的发展和创新、基于三维重构图的模型计算等方面,最后对电子显微三维重构技术的未来进行了展望。     

玻璃刀刀槽接缝的密封

因玻璃刀价格便宜,制作简单,又容易获得非常锋利的刀刃,故在超薄切片中广为使用。用玻璃刀切片,一般都要在它的背部装上一个被称之为刀槽或水槽的不漏水的小容器,它通常用胶带缠绕而成。用胶带制成的刀槽必须将它与玻璃刀的接缝密封,否则就会漏水。密封剂一般为石腊,但用石腊密封必须事先融化,融化时还会污染空气,而且密封质量欠佳,容易漏水,对技术不熟练者尤其如此。尽管这样,国内许多电镜室或实验室还在继续使用,因此在电镜技术日新月异发展的今天,改进刀槽密封方法就显得十分必要。现将我们多年来采用的密封方法介绍如下:     

汕头市区空肠弯曲菌的电镜观察

自从1972年Dekeyser等首次证实空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)是腹泻较常见的病原菌,我国1981年上海首次分离该菌以来,国内许多地区已先后开展有关分离鉴定工作,初步表明空肠弯曲菌在我国并不少见,本菌的重要性正日益引起重视。但有关该菌的电镜观察,国内外只见零星报道。本文就其电镜形态及其与致病的关系作初步探讨。     

植物病原微生物的电镜学研究及关键技术

正化学工业出版社出版本书是一部囊括电镜方法学、病原物形态结构、细胞病理学三位一体的研究技术专著,内容源自作者35年的研究工作成果。共分两部分:一为病原微生物的电镜观察,分析了感病细胞的结构及病理变化;二为阐述电镜制样技术的关键因素分析及策略,结合电镜方法学进行详细描述和解读。收