铜绿假单胞菌ESBLs和AmpC酶的检测及耐药性分析

目的了解铜绿假单胞菌临床分离株ESBLs和AmpC酶的产生及对常用抗菌药物敏感性,指导临床合理选用抗生素。方法常规培养分离细菌,采用VITEK-60型全自动细菌鉴定仪鉴定细菌;按NCCLS推荐的双纸片确证法和K-B纸片扩散法检测ESBLs和药敏试验;采用头孢西丁纸片扩散法筛选疑产AmpC酶阳性菌株,确诊采用三维试验。结果铜绿假单胞菌产ESBLs和AmpC酶总检出率分别为40.8%和38.2%,其中,单产AmpC酶、单产ESBLs和同产AmpC酶+ESBLs检出率分别为19.7%、26.3%和14.5%。药敏试验显示:产酶株的耐药性明显高于非产酶株,耐药现象在同产AmpC酶和ESBLs菌株中更为严重。结论台州地区临床分离的铜绿假单胞菌产ESBLs和AmpC酶菌株检出率较高。产AmpC酶和ESBLs的菌株呈高度耐药,临床上对产酶菌株引起感染的治疗应根据细菌药敏试验结果,合理选择有效的抗菌药物联合治疗,减少产酶菌株的产生和流行。     

300 株鲍曼不动杆菌琼脂稀释法与纸片扩散法药敏检测结果比较

目的:比较琼脂稀释法和纸片扩散法对鲍曼不动杆菌的药敏试验结果。方法:随机挑选的300株鲍曼不动杆菌,检测其标本及科室的分布情况,并采用琼脂稀释法和纸片扩散法检测鲍曼不动杆菌对环丙沙星(CIP)、庆大霉素(CN)、阿米卡星(AK)、头孢他啶(CAZ)、头孢吡肟(FEP)、左氧氟沙星(LEV)、氨苄西林-舒巴坦(SAM)、妥布霉素(TOB)、美洛培南(MEN)、米诺环素(MH)、头孢哌酮-舒巴坦(SCF)11种抗菌药物的敏感性,比较两种检测结果的差异。结果:300株鲍曼不动杆菌主要分布在痰液标本中,共214株,占71.3%,主要来源于ICU 101株(33.7%)及脑外科59株(19.7%)。药敏检测结果显示,两种检测方法所得的SCF和MH的敏感性差异具有统计学意义(P0.05),其他9种抗菌药物的药敏检测结果差异没有统计学意义(P0.05)。结论:琼脂稀释法和纸片扩散法对鲍曼不动杆菌药敏试验结果并不完全一致,临床用药时尤其要注意SCF和MH这两种药物药敏结果的可靠性。     

ICU患者脑膜炎败血黄杆菌的耐药性分析和研究

目的检测从ICU患者痰液标本中分离的产MBL、ESBL脑膜炎败血黄杆菌的耐药性状况,指导临床正确合理使用抗生素。方法用VITEK 32鉴定菌株;双纸片协同试验筛选产MBL菌株、产ESBL菌株;药敏试验使用VITEK GNS143上机检测和K—B法检测加做的药敏试验。结果ICU患者痰液标本中的脑膜炎败血黄杆菌的产酶率为78．4％,其中产MBL为41．2％,产ESBL为29．4％,有4株同时产MBL和ESBL。美满霉素、万古霉素、力奈唑烷的耐药率分别为19．8％、1．98％、1．98％。结论脑膜炎败血黄杆菌在ICU患者的痰液标本中高耐药性的根本原因是高产酶率（高产MBL和ESBL）。万古霉素、力奈唑烷、美满霉素是治疗ICU患者呼吸道感染的最有效药物。     

小儿呼吸道感染肺炎克雷伯杆菌耐药性和基因型研究

目的探讨临海地区小儿呼吸道感染肺炎克雷伯杆菌产超β-内酰胺酶（ESBLs和AmpC酶）的耐药性及耐药基因型分布情况。方法采用VITEK-60型全自动细菌鉴定仪鉴定细菌,按CLSI推荐的确证试验检测ESBLs和K-B纸片法测定药敏结果;采用头孢西丁纸片扩散法筛选产AmpC酶阳性菌株,采用PCR检测AmpC酶基因,并对产物进行测序分析基因型。结果113株肺炎克雷伯杆菌ESBLs和AmpC酶总检测率分别为29．20％和18．58％,其中单产ESBLs、单产AmpC酶和同产AmpC酶＋ESBLs检出率分别为23．01％、12．39％和6．19％;AmpC酶阳性菌株的耐药基因型：16株为DHA-1型,5株为ACT-1型。药敏试验：所分离的肺炎克雷伯杆菌对亚胺培南全部敏感,对喹诺酮类耐药率很低,对大多β-内酰胺类抗生素耐药率较高,并且产酶株的耐药性明显高于非产酶株,耐药现象在同产ES-BLS和AmpC酶菌株中更为严重。结论临海地区小儿呼吸道分离的肺炎克雷伯杆菌产ESBLs和AmpC酶检出率较高;AmpC酶以DHA-1基因型流行为主,产酶株呈现出高度多重耐药性。     

基于K-B法筛选异质性耐药菌株及其对 抗菌药物敏感试验结果的影响

目的探讨K-B法抑菌圈内出现细菌单菌落的可能原因及其对药敏结果的影响。方法采用头孢他啶和美罗培南药敏纸片对革兰阴性菌株进行筛选,对抑菌圈内出现的细菌单菌落进行鉴定及药敏试验,并与原鉴定结果和药敏结果进行比较。结果从痰液,尿液,血液等临床标本分离的2 500株革兰阴性杆菌。55株在头孢他啶或美罗培南纸片抑菌圈内会出现肉眼可见的细菌单菌落,其中26株经过了菌落纯培养,出现异质性耐药23株,污染3株,29株未经过菌落纯培养,出现异质性耐药14株,污染15株。头孢他啶纸片筛选试验中,共有28株抑菌圈中菌株与原鉴定结果一致,但耐药表型及具体药敏结果均发生改变,其中7株阴沟肠杆菌氨曲南和头孢曲松药敏结果均从敏感变成耐药。美罗培南纸片筛选试验中,共有9株抑菌圈中菌株与与原鉴定结果一致,其中7株铜绿假单胞菌氨曲南从敏感变为中介,亚胺培南从中介变为耐药。结论本研究中,1.48%革兰阴性杆菌分离菌株会出现异质性耐药,菌落传代纯培养可以有效降低药敏操作过程中的污染。异质性耐药菌株的存在以及实验操作过程中的可能污染对病原菌体外药敏结果的影响,需要引起临床,特别是临床微生物工作者的关注和重视。     

胃癌患者胃粘膜无芽胞厌氧菌分析及药物敏感试验

对98例具有消化不良症状的患者做胃镜检查,取胃粘膜组织进行细菌分离培养,结果表明,不同的消化道疾病,胃粘膜微生物群均发生不同的改变,其中胃癌患者改变最明显,胃内微生物检出率最高,无芽胞厌氧菌检出率87.88％（29／33）,其中产亚硝酸优杆菌检出率为57.60％（19／33）,硝酸盐还原试验阳性菌株占72.70％（24／33）。这些细菌和胃癌的关系有待深入研究。对19株产亚硝酸优杆菌做药物敏感试验,结果显示,该菌对青霉素类药物均耐药,对氯霉素,红霉素,庆大霉素敏感。     

2004至2005年我院嗜血杆菌的分离及其耐药性

目的了解我院2004至2005年流感嗜血杆菌的分离率、产酶率,并对其耐药性进行分析,指导临床合理用药控制嗜血杆菌的流行。方法对1695份痰及咽拭子标本进行嗜血杆菌分离培养、鉴定,并用头孢硝噻吩纸片法进行β-内酰胺酶测定,采用琼脂扩散法进行药敏试验。结果共分离出226株嗜血杆菌,其中流感嗜血杆菌52株,副流感嗜血杆菌174株。产β-内酰胺酶42株,对氨苄西林、复方新诺明、环丙沙星的耐药率分别为22.1%、74.3%和57.5%。而对阿莫西林/棒酸、阿奇霉素、头孢噻肟、头孢呋辛钠、亚胺培南、利福平、氨曲南的耐药率均低于10%。结论我院呼吸道嗜血杆菌感染以副流感嗜血杆菌为主,临床上治疗嗜血杆菌感染最有效的药物是头孢噻肟。     

鲍曼不动杆菌超广谱β-内酰胺酶检测及耐药性分析

为了解厦门中山医院鲍曼不动杆菌产超广谱β 内酰胺酶(ESBLs)情况及耐药现状,指导临床用药,采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的纸片扩散法,测定 2002 ~2003年临床分离的 211株鲍曼不动杆菌产ESBLs的比例及其对头孢噻肟、阿米卡星等 13种抗菌药物耐药性特征。结果表明 211株鲍曼不动杆菌中ESBLs阳性 27株(占 12. 8% ),产ESBLs菌株对 13种抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs株。鲍曼不动杆菌的产ESBLs株有较高的交叉耐药性,采用纸片确证实验检出ESBLs对于临床用药有一定的指导意义。     

副流感嗜血杆菌致老年患者获得性肺炎的分离状况与耐药性分析

目的分析本院老年人获得性肺炎患者副流感嗜血杆菌的分离率与耐药特征,以便有效指导临床合理用药。方法用哥伦比亚巧克力平板培养基分离副流感嗜血杆菌,嗜血杆菌鉴定卡(NH卡)确认鉴定菌株,纸片琼脂扩散法(K-B)做药敏试验,并采用头孢硝噻吩纸片法检测β-内酰胺酶。结果共分离出副流感嗜血杆菌87株,分离率为15.2%(87/572);β-内酰胺酶阳性率为36.8%(32/87);药敏试验表明β-内酰胺酶阳性株与阴性株对氨苄西林、头孢噻肟、四环素、利福平、克拉霉素、复方新诺明、氨曲南、氯霉素的耐药率差异有统计学意义(P0.05),多数抗菌药物对该菌仍保持良好的抗菌活性。结论本院老年人获得性肺炎患者副流感嗜血杆菌感染率比较高,产β-内酰胺酶阳性率高,大多数抗菌药物对该菌仍保持良好的抗菌活性,临床应重视副流感嗜血杆菌感染并依据药敏试验结果合理选用抗菌药物。     

2004～2010年武汉同济医院临床分离多重耐药菌株监测分析

目的了解武汉同济医院2004年至2010年临床分离多重耐药菌株的检出情况。方法对临床分离菌株,采用纸片扩散法按统一的方案进行药敏试验。按照CLSI 2009年标准进行判断。结果 2004年至2010年该院耐甲氧西林金葡菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRSCN）的检出率分别在35.6%～63.8%和21.5%～61.4%。2004年至2010年共检出36株耐万古霉素肠球菌（VRE）。大肠埃希菌产ESBLs株检出率在29.6%～81.7%,肺炎克雷伯菌产ESBLs株检出率在36.0%～56.6%,产酸克雷伯产ESBLs株检出率在35.3%～67.4%,奇异变形杆菌产ESBLs株检出率在0～26.2%。自2005年起每年均有泛耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的检出。结论该院2004年至2010年多重耐药菌株呈增多趋势,尤其是VRE和泛耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的出现,给临床治疗带来了严峻挑战。     

2012-2014年产吲哚金黄杆菌的临床分离情况及耐药性变迁

目的分析本院临床分离产吲哚金黄杆菌的分布及耐药性变迁,指导临床合理用药。方法对本院2012年1月至2014年12月期间临床分离的产吲哚金黄杆菌用VITEK2Compact全自动微生物分析仪进行鉴定和药敏试验,根据美国临床和实验室标准协会(CLSI)提供的2013年MIC标准判断结果。结果3年中收集了32株产吲哚金黄杆菌,68.8%为60岁以上的患者,菌株分离标本来源主要为尿液。32株菌均呈现多重耐药。对头孢菌素类抗生素的耐药率很高,特别是对头孢唑啉和头孢替坦的耐药率均为100.0%。对复方新诺明的耐药率最低。分析3年分离出的产吲哚金黄杆菌的耐药性,发现该菌对亚胺培南和复方新诺明的耐药率有所下降,对其他抗生素的耐药率无明显变化。结论分离的产吲哚金黄杆菌呈现多重耐药,应参照药敏结果合理选用抗菌药物。     

产酶革兰阴性杆菌致医院感染与耐药特性

目的：了解超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)与诱导型β-内酰胺酶革兰阴性杆菌致医院感染的检出率及耐药特点,对产酶与不产酶菌株进行耐药性对比分析,为临床用药提供依据。方法：双纸片试验检测ESBLs与诱导酶,Etest ESBLs试条确定产ESBLs菌株,对临床分离的960株细菌采用K—B法进行药物敏感试验。结果：哌拉西林、头孢培南、亚胺培南、环丙沙星对296株铜绿假单胞菌的抗菌活性较强;肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对亚胺培南100％敏感,对氨基糖苷类、氟喹诺酮类、磺胺类药物,产ESBLs与不产ESBLs菌株之间呈现交叉耐药。结论：常规药敏试验不能完全反映产诱导酶的铜绿假单胞菌耐药特点,Etest ESBLs试条可提高检测ESBLs的阳性率和准确性,产ESBLs革兰阴性杆菌的耐药性高于非产酶菌株,ESBLs菌引起的感染,应用亚胺培南、头霉素类进行治疗。     

革兰阴性杆菌ESBLs和AmpC酶的检测及耐药分析

目的检测引起医院感染的革兰阴性杆菌携带产ESBLs和去阻遏AmpC酶状况,探讨各菌对临床常用抗生素的主要耐药机制及耐药性,为临床制定合理使用抗生素策略提供依据。方法采用全自动微生物分析仪（VITEK-32）做细菌鉴定和药敏试验,用纸片扩散确证法检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）,用三维法检测高水平表达染色体编码的AmpC酶。结果158株革兰阴性杆菌ESBLs检出率为26．6％,主要菌为大肠埃希菌（45．2％）、肺炎克雷伯菌（42．9％）、阴沟肠杆菌（11．9％）。AmpC酶检出率为10．1％,主要为鲍曼不动杆菌（43．8％）、阴沟肠杆菌（25％）;上述产酶细菌均对青霉素和一、二、三代头孢菌素、磺胺类、喹诺酮类、氨基糖苷类耐药,对亚胺培南敏感。结论革兰阴性杆菌耐药机制主要是产超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶,这些产酶菌株均出现多重耐药。     

海岛基层骨伤医院感染病原菌分布与耐药性

目的回顾性分析海岛基层骨伤医院感染病原菌的分布及药敏率情况,为临床合理用药提供依据。方法临床标本经24h分离培养,采用K-B纸片扩散法进行药敏试验。结果从2012年1月至2014年12月发生医院感染的病例中共分离出185株病原菌,其中革兰阳性菌55株,占29.73%;革兰阴性菌114株,占61.62%;真菌16株,占8.65%。革兰阳性菌中的金黄色葡萄球菌、肠球菌,革兰阴性菌中的铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌等是感染菌谱的主要菌种。药敏显示大多数病原菌耐药性高,革兰阴性、阳性菌分别对亚胺培南和万古霉素敏感性最高。结论本院临床感染病原菌以革兰阴性杆菌为主,对常用抗菌药物耐药率较高,临床用药应以药敏试验结果为依据合理选择抗菌药物。     

鲍曼不动杆菌的临床分布及耐药性监测

目的了解鲍曼不动杆菌的临床分布及对常用抗菌素的耐药状况,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法对大连大学附属新华医院2011-2013年临床分离出的103株鲍曼不动杆菌的临床分布与耐药情况进行分析。采用纸片扩散法进行药敏试验,结果按CLSI标准判定。结果分离的鲍曼不动杆菌共103株,主要分离自痰液(85.4%),其次为分泌物及脓液和尿液标本。其感染患者主要分布于ICU和呼吸内科。临床分离的鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物耐药广泛。结论鲍曼不动杆菌是医院感染中重要的条件致病菌,且耐药率较高,应加强对鲍曼不动杆菌耐药性的监测,合理选择使用抗菌药物,控制耐药菌株的流行及医院感染。     

野生东亚钳蝎消化道可培养细菌的分离鉴定、耐药性及产消化酶活性

目的分离东亚钳蝎消化道中的可培养细菌,并研究其产消化酶活性和耐药性,探讨消化道细菌对东亚钳蝎消化食物的影响。方法野生东亚钳蝎采用传统细菌分离培养方法分离其消化道内可培养细菌,利用16S rRNA序列进行细菌的分子鉴定;利用平板透明圈法测定可培养细菌产淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和纤维素酶等消化酶的活性;采用药敏纸片扩散法进行消化道可培养细菌的药敏试验。结果在东亚钳蝎消化道中共分离到4个属10种细菌,其中芽胞杆菌属7种,分别为蛋白水解芽胞杆菌、解淀粉芽胞杆菌、巨大芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、婴儿芽胞杆菌和长形赖氨酸芽胞杆菌;葡萄球菌属、纤维微菌属和短波单胞菌属各1株,分别为松鼠葡萄球菌、纤维化纤维微细菌和泡囊短波单胞菌。对10种细菌的产消化酶活性分析表明,8种细菌有产消化酶活性,占细菌总数的80%;5种细菌有产蛋白酶活性,分别为蛋白水解芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、松鼠葡萄球菌和纤维化纤维微细菌;7种细菌有产淀粉酶活性,分别为蛋白水解芽胞杆菌、解淀粉芽胞杆菌、巨大芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、松鼠葡萄球菌和婴儿芽胞杆菌;未筛选到产纤维素酶和脂肪酶活性的细菌;蛋白水解芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌和松鼠葡萄球菌可同时产2种消化酶。在药敏试验中,8种细菌对多粘菌素B耐药,5种细菌对四环素耐药,3种细菌对万古霉素耐药。结论东亚钳蝎消化道中可培养细菌的组成相对单一,多数细菌有分泌淀粉酶和蛋白酶的功能,说明东亚钳蝎消化道中的细菌可能有协助其进行食物消化的功能。消化道细菌对抗生素多表现为敏感,推测其生存环境中抗生素的污染较少,同时在对东亚钳蝎人工饲养的场所进行消毒时,要谨慎选择抗生素,防止抗生素使用不当致使东亚钳蝎肠道菌群紊乱引起疾病。     

鲍曼不动杆菌的分布特点及耐药性动态观察

目的监测鲍曼不动杆菌在各种标本、各临床科室的分布特点及耐药性,探讨其变化规律,为临床治疗提供帮助。方法对台州市立医院2005年7月～2005年6月期间住院患者送检的临床标本中分离到的细菌使用VITEK-32全自动细菌鉴定仪进行菌种鉴定,并用Oxoid公司提供的药敏纸片进行药敏试验。结果鲍曼不动杆菌大多数分离自痰液,其次是脓液及分泌物,居第三位的是尿液;科室分布以ICU最高;鲍曼不动杆菌的耐药率在这3年中总体呈上升趋势,亚胺培南耐药率最低。结论鲍曼不动杆菌易引起下呼吸道感染,尤其是ICU患者;对大多数抗菌药物的耐药性迅速上升,应加强其耐药性的监测。     

双歧杆菌丝状体生长形态初探

研究双歧杆菌在特定培养条件下生长及增殖模式的变化.采用不同浓度维生素B6和维生素E烟酸酯药敏纸片联合影响双歧杆菌生长,通过革兰染色和原子力显微镜扫描观察双歧杆菌的生长、增殖情况.在维生素B6和维生素E联合作用下,双岐杆菌出现丝状体群集生长的现象,且二分裂增殖方式受到抑制.第1次转种于普通培养基中可保持此种生长增殖方式,但连续转种3次后会恢复常规生长增殖方式.不同浓度维生素B6和维生素E烟酸酯药敏纸片联合可诱生双歧杆菌丝状体.     

心内科患者医院感染鲍氏不动杆菌的耐药性分析

目的了解心内科住院患者医院感染鲍氏不动杆菌的耐药性,为指导临床合理用药提供依据。方法从2010—2012年心内科住院患者送检标本中分离鲍氏不动杆菌,采用PHOENIX-100全自动细菌鉴定药敏系统进行细菌鉴定及药敏试验,并对结果进行统计分析。结果2010-2012年心内科住院患者共分离出166株鲍氏不动杆菌,其中泛耐药菌株34株,检出率为20．5％。药敏结果显示鲍氏不动杆菌对常用抗菌药物的耐药率呈逐年上升趋势,并显示出多重耐药性,对多粘菌素B、头孢哌酮／舒巴坦、亚胺培南和美罗培南等耐药率相对较低。结论鲍氏不动杆菌已成为医院感染重要病原菌,对多种抗菌药物耐药,临床应加强耐药性监测,根据药敏结果合理选用抗菌药物,以控制医院感染的暴发流行。     

基层医院产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯杆菌医院感染及耐药性变迁

目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯杆菌在基层医院临床标本中的分布及其耐药趋势。方法用全自动微生物分析系统进行菌种鉴定及药物敏感性检测,采用K-B纸片扩散法检测ESBLs,采用改良Hodge试验检测菌株产碳青霉烯酶,并按年度统计其感染率及耐药性。结果 2011年至2014年肺炎克雷伯杆菌产ESBLs的检出率分别为17.05%、17.76%、27.05%和30.93%,平均为25.04%。标本来源主要为痰,占67.84%;科室分布以ICU、神经内科、呼吸内科为主,分别为34.50%、20.47%和12.28%。对常用抗生素的耐药性总体呈升高趋势,2013年和2014年共检出10株对碳青霉烯类药物耐药菌株。结论医院产ESBLs肺炎克雷伯杆菌数量及检出率逐年升高,多重耐药日趋严重,临床应加强细菌耐药监测,科学合理应用抗菌药物,延缓细菌耐药性的变迁,预防和控制医院感染扩散。