溶血对临床生化检验结果的影响分析

目的:探讨溶血对临床生化检验结果的影响。方法:选取2012年3月间入我院进行体检的48例健康体检者作为受试对象,每名受试者抽取10ml血液样本,对样本的未溶血、一般溶血和严重溶血状态进行统一生化检查,并对所得数据进行统计分析。结果:通过比较发现,一般溶血组与为溶血组的ALT、AST、TBIL、DBIL、rGT、UA等含量有较大差异,差异有统计学意义(P0.05),而BUN、Cr及GLU的含量则无明显差异,差异不具有统计学意义(P0.05);而严重溶血组于一般溶血组仅有AST及UA的含量有差异(P0.05)。结论:在临床生化检测中,溶血会对大部分检测指标产生明显影响,应注意避免其诱发因素,以使检验结果更具说服力。     

副溶血弧菌海产品和临床分离株的表型及溶血素相关基因分析

副溶血弧菌是(Vibrio parahaemolyticus)常见的食源性病原菌,可污染多种水产品,并引起人的食物中毒,其致病性与溶血素密切相关,如直接耐热溶血素(TDH)、TDH-相关溶血素(TRH)、不耐热溶血素(TLH)。用PCR方法对分离自浙江省部分地区的副溶血弧菌临床和海产品分离株的3种溶血素基因进行检测。结果表明,所有副溶血弧菌菌株均可检测到tlh基因;11株临床分离株均检测到tdh基因,而42株水产品分离株中只有1株检出tdh基因,携带tdh的分离株神奈川试验(KP)均为阳性。所有分离菌株中均未检测到trh基因以及其尿素酶试验呈阴性,由此可知trh基因可能与尿素酶基因连锁。副溶血弧菌分离株中致病性相关毒力因子TDH的阳性率极低,然而副溶血弧菌性食物中毒发生率较高,它们之间的关系及其发病机制还有待深入研究。     

用基于TaqMan探针的Real-time PCR技术定量检测副溶血弧菌

副溶血弧菌是一种引起食源性疾病的重要病原菌,传统的鉴定方法费时费力且容易出现假阴性,建立一种定量检测副溶血弧菌基因的方法尤为重要。根据GenBank公布的副溶血弧菌的gyrB基因序列设计一对引物和TaqMan探针,建立了基于TaqMan探针的RealtimePCR方法。通过对9种细菌(12株菌株)的DNA进行扩增,结果所有4株副溶血弧菌均可产生扩增曲线,其他8株非副溶血弧菌均不产生扩增曲线,证明了引物和探针具有很高的特异性。细菌纯培养物品和人工布菌的检测敏感度分别为1CFUPCR反应体系和10CFUPCR反应体系,相关系数均为0.99(r2=0.99),整个试验可在1h内完成。建立的方法可用于海产品中副溶血弧菌的快速定量检测。     

溶血磷脂酰胆碱对缺血条件下羊浦肯野纤维If电流的影响

本文用双微电极电压箝制术观察“缺血”及毒性代谢产物溶血磷脂酸胆碱（LPC）对绵羊心室浦肯野纤维起搏离子流If的影响。用模拟缺血溶液灌流15,30和60min后,在一60mV～120mV之间的各不同指令电位水平If离子流幅值均降低（n=5,P＜0．05）,激活达稳态时间及半激活时间延长（n=5,P＜0．05）,稳态激活曲线向超极化方向移位。在正常台氏液中加入2×10-5mol/LIPC,灌流后,各个膜电位水平的浦氏纤维起搏离子流If的幅值显著降低（n=10,P＜0.05）,稳态激活曲线向超极化方向移位,但If激活达稳态时间及半激活时间均无明显改变。在模拟缺血溶液灌流30min基础上,再加2×10－5mol／LLPC灌流,15min后测得If幅值进一步减小（n=10,P＜0．05）,加剧了“缺血”对If离子流的抑制作用。上述结果表明：缺血代谢产物溶血磷脂酸胆碱对心室的正常自律活动具有抑制作用,在模拟缺血条件下,它能使已受抑制的自律活动抑制进一步加深。因此它的存在不会异常增强心室自律性活动而发生快速性室性心律失常。     

Tn5介导的致病性副溶血弧菌溶血能力差异突变株表型分析

【目的】构建致病性副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)突变体库,分析溶血能力差异突变株表型特征,为深入挖掘和认识tdh的调控机制提供研究基础。【方法】利用双亲本接合法,将Mini-Tn5-Km2片段随机插入致病性Vp (ATCC 33846)基因组,并以含有卡那霉素(Km)和氨苄青霉素(Amp)的TCBS选择性培养基进行突变株(KmRAmpS)筛选;结合PCR方法对突变菌株进行Km基因筛查,构建在不同基因位点随机插入突变的Vp突变体库。以我妻氏血平板筛选溶血表型变化菌株,并对其生长曲线、菌膜形成能力和运动能力进行测定。【结果】采用双亲本接合法,成功建立包含490株Vp突变株的突变体库,并获得5株溶血表型变化稳定的菌株(2株为溶血能力上调,3株为下调)。5株突变株在生长速率、菌膜形成能力及运动能力方面与亲本株有显著性差异。其中,2株溶血能力上调菌株及1株溶血能力下调菌株在运动能力、生长速率和菌膜形成能力方面较亲本株显著降低(P<0.05);另2株溶血能力下调菌株菌膜形成能力较亲本株显著提高(P<0.05)。【结论】Tn5转座子可用于建立Vp突变体库;Vp溶血能力与其表型特征具有相关性;研究所获得的5株溶血表型突变株为进一步探讨Vp tdh的调控机制奠定基础。     

氯通道在葛根素注射液致溶血反应中的作用

目的：观察阻断和激活氯通道对葛根素注射液致家兔溶血反应的影响,探讨氯通道在葛根素注射液溶血反应中的作用。方法：将不同浓度的葛根素注射液（0.75、1.5、3、6、12 mg/ml）与家兔红细胞悬液共孵育6 h,使用细胞图像记录系统观测葛根素注射液是否诱导红细胞溶血,酶标仪、流式细胞仪检测红细胞溶血率,并观测激活和阻断氯通道对葛根素注射液溶血作用的影响。结果：葛根素注射液可引起家兔红细胞体外溶血,在所观察的1.5 mg/ml~12 mg/ml范围内,溶血效应呈浓度依赖性增强（n=3,P<0.01）。氯通道阻断剂Tamoxifen （20 μmol/L）、ATP （10 mmol/L）可有效抑制葛根素注射液的溶血作用（n=3~5,P<0.01）;而使用低浓度ATP （50 μmol/L）激活氯通道,则显著增强葛根素注射液的溶血作用（n=4,P<0.01）。结论：葛根素注射液的体外溶血效应呈浓度依赖性,氯通道激活与葛根素注射液诱导的溶血反应密切相关。     

溶血磷脂酸对培养小鼠大脑皮层神经元的双重作用:抗凋亡和促凋亡

应用DNA电泳分析、HO33342和TUNEL染色法、以及部分地使用透射电镜技术,检测了不同浓度的溶血磷脂酸(1ysophosphatidic acid,LPA)对离体培养的小鼠大脑皮层神经元存活情况的影响.结果显示,低浓度的LPA(0.1～30μmol/L)对去血清培养所致的皮层神经元凋亡有浓度依赖性的保护作用,而较高浓度的LPA(＞50 μmol/L)不仅不表现这种保护作用,而且可引致培养在含血清的完全培养基中的皮层神经元出现凋亡.以上结果表明,适当浓度的LPA对凋亡的皮层神经元起着保护因子或抗凋亡因子的作用,而较高浓度的LPA则起着促凋亡因子的作用.     

米氏凯伦藻溶血毒素的溶血反应特征

探讨了温度、pH值、二价阳离子等对米氏凯伦藻(Karenia mikimotoi Hasen)溶血毒素溶血活性的影响,分析了米氏凯伦藻溶血毒素的溶血反应特征.结果表明,实验室培养米氏凯伦藻的溶血活性约为64.69±6.43 HU L-1,单个藻细胞的溶血活性为6.17±0.61×10-6 HU;在实验温度(0～37℃)下,溶血活性随温度的增加而增加;pH6.0时的溶血活性最高;Cu2+、Mg2+、Mn2+、Ca2+、Co2+、Zn2+和Hg2+等对米氏凯伦藻的溶血活性的影响不同.离子浓度为5 mmol/L时,Hg2+的抑制作用最强.高浓度Hg2+对红细胞的集合效应不但阻止了Hg2+进入血细胞诱导的溶血作用,而且阻止了毒素对细胞膜的破坏,但这种抑制作用可被EDTA消除.     

副溶血弧菌EMA-PCR检测技术的建立

PCR技术被广泛应用于副溶血弧菌的检测中, 但传统的PCR技术无法区分样品中的死细菌与活细菌, 往往使检测结果出现较高的假阳性。因此, 将叠氮溴乙锭(Ethidium monoazide bromide, EMA)与PCR技术结合, 建立一种快速、准确的副溶血弧菌检测方法。以dnaJ基因为检测副溶血弧菌的靶基因, 分别用副溶血弧菌的纯培养细胞及其基因组DNA作模板进行PCR检测, 灵敏度分别为2.5×104 CFU/mL和6×102 fg/μL。在检测样品前处理过程中加入EMA, 当EMA的浓度小于5 mg/L时, EMA对活菌靶基因的扩增没有明显的抑制; 而终浓度为2 mg/L的EMA, 能有效抑制1×108 CFU/mL副溶血弧菌死菌的扩增。活菌和死菌混合体系的PCR结果表明, EMA-PCR能有效降低副溶血弧菌检测过程中的假阳性。     

少棘蜈蚣毒液溶血肽的分离纯化

采用超滤和HPLC(包括凝胶过滤层析、阳离子交换层析和反相HPLC)等技术对少棘蜈蚣毒液进行分离纯化,最终获得一个多肽;运用基质辅助激光解吸附飞行时间质谱测定其分子量为4484Da,测得其对小鼠红细胞半数溶血剂量HD50=14.69μg/ml。     

正常晚期妊娠妇女血生化指标分析

目的:探讨正常晚期妊娠妇女血生化指标的特点,更好地辅助临床诊断和治疗。方法:测定并比较92例正常晚期妊娠妇女和65例健康非妊娠妇女的15项血生化指标。结果:正常晚期妊娠组与健康非妊娠对照组相比,总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、碱性磷酸酶(ALP)、α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、总胆汁酸(TBA)共5项指标均有非常显著性差异(P<0.01),血糖(GLU)、肌酐(CR)等2项指标有显著性差异(P<0.05),而总胆红素(TBIL)、谷丙转氨酶(ALT)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、谷草转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)共8项指标2组间比较均无统计学意义(P>0.05)。结论:正常晚期妊娠时,孕妇血TP、ALB、ALP、AFU、TBA、GLU及CR等7项指标的改变由妊娠适应性生理反应引起,非机体组织器官疾患所致,该7项指标已不适于以健康未妊娠妇女的正常参考值范围作为衡量标准,提示临床医护人员分析晚期妊娠妇女血生化指标时应结合多项相关指标甚至多种辅助检查结果进行,以便及时制定正确合理的诊疗策略。     

人工饲养恒河猴麻醉与非麻醉状态下血液学、血液生化、血流变指标的测定与比较

目的测定人工饲养条件下48只健康恒河猴在非麻醉状态下及30只健康恒河猴在麻醉状态下的血液生化、血液常规、血液流变学指标,并分析两种状态下恒河猴血液生化、血液常规、血液流变值的差异及相互关系.方法应用全自动血液细胞分析仪和全自动血液生化分析仪,自动清洗旋转型粘度计测定及分析麻醉和非麻醉状态下健康恒河猴血液生化、血液常规、血液流变值.结果血液生化值麻醉组比非麻醉组明显低(P<0.01)的项目有GGT、AST、CREAT、TBIL、DBIL、P3+、TF;较明显低(P<0.05)的项目有ALT、ALP、LDH、HBDH;明显高(P<0.01)的项目有UA、Ca2+、CK-MB、ALB,较明显高(P<0.05)的项目有TPROT.血常规值麻醉组比非麻醉组明显低(P<0.01)的项目有RBC、Hct、MCV、MPV、RDW、NEUTRO,明显高(P<0.01)的项目有MCH、MCHC、PLT、LYM、MEDIAN.血液流变值麻醉组比非麻醉组明显低(P<0.01)的项目有全血低切粘度,全血中切粘度,全血高切粘度,血浆粘度,红细胞压积,还原低切,血沉K值,聚集指数;明显高(P<0.01)的项目有变形指数,电泳指数.结论本文测定并比较了人工饲养条件下健康恒河猴在麻醉和非麻醉状态下血液生化、血液常规、血液流变值,讨论分析了两组数值之间的差异和原因,了解应激反应和麻醉剂对动物生理方面的影响.     

血清乳酸脱氢酶评估颅脑手术患者重症肺炎的临床价值

摘要 目的：分析血清乳酸脱氢酶在评估颅脑手术患者重症肺炎的中的应用价值。方法：选取2020年7月~2022年6月在本院神经外科进行收治的颅脑择期手术患者268例,根据是否合并术后肺炎,分为非感染组（n=185）和肺炎组（n=83）,肺炎组根据肺炎严重程度分为重症肺炎31例及普通肺炎52例。采用酶联免疫吸附法测定血清PCT、CRP水平;采用酶比色法检测血清 LDH 水平,采用Pearson相关性检验分析合并肺炎患者血清LDH、PCT、CRP水平与病情严重程度的相关性。采用ROC曲线分析血清LDH、PCT、CRP水平对颅脑手术患者合并重症肺炎的临床诊断价值,血清LDH、PCT、CRP水平预估颅脑手术合并重症肺炎患者预后的价值。结果：术后1 d、3 d、7 d与未感染组对比,普通肺炎组患者血清LDH、PCT、CRP水平均明显升高（P<0.05）;与普通肺炎组对比,重症肺炎组患者血清LDH、PCT、CRP水平均明显升高（P<0.05）。经Pearson相关性检验分析,颅脑手术合并肺炎患者血清LDH、PCT、CRP水平与PSI评分呈明显正相关（P<0.05）。以术后1 d血清LDH、PCT、CRP水平建立ROC曲线,结果发现,血清LDH、PCT、CRP的曲线下面积分别为0.840、0.825、0.746。以术后7 d血清LDH、PCT、CRP水平建立ROC曲线,结果发现,血清LDH、PCT、CRP的曲线下面积分别为0.819、0.725、0.684。结论：LDH在颅脑手术合并肺炎患者中高表达,与肺炎严重程度正相关。LDH在区分非重症肺炎患者和重症肺炎患者以及预测重症肺炎患者的28天死亡率方面具有良好价值。     

血清胆红素与尿酸水平对重症肌无力的临床意义

目的：探讨血清胆红素以及尿酸的水平对重症肌无力患者的临床价值。方法：选取我院确诊的重症肌无力患者作为实验组, 另选择同期体检的健康志愿者作为对照组。检测并比较两组血清直接胆红素(DBIL)、间接胆红素(IBIL)、总胆红素(TBIL)、尿酸 (UA)及肌酐(Cr)等指标水平。结果：实验组血清DBIL、IBIL、TBIL、UA 水平均显著低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),但实 验组不同类型的MG 患者血清DBIL、IBIL、TBIL、UA水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。同组男性DBIL、IBIL、TBIL、UA值 均明显高于女性,差异具有统计学意义(P<0.05);两组间相同性别比较,实验组DBIL、IBIL、TBIL、UA 均低于对照组,差异有统计 学意义(P＜0.05)。结论：检测血清BIL 和UA水平对诊断重症肌无力具有一定的参考价值。     

SPF级与普通级新西兰兔血液学参数的比较

目的对普通级新西兰兔进行剖宫产,获得SPF兔,比较SPF兔和普通级兔血液学参数。方法采取剖宫产手术培育成无菌兔,接种正常寄生菌使之SPF化。耳缘静脉采血,自动生化分析仪测定SPF兔、普通级兔血液学参数。结果经检测SPF兔符合国家SPF兔标准;SPF兔和普通级新西兰兔白细胞数、血红蛋白、红细胞容积、中性粒细胞百分比、嗜酸性粒细胞百分比、嗜碱性粒细胞百分比、中性粒细胞数、单核细胞数、嗜酸性粒细胞数、嗜碱性粒细胞数、总蛋白、球蛋白、白蛋白/球蛋白、谷酰转肽酶、葡萄糖、钙、高密度脂蛋白胆固醇等参数差异极显著（P〈0.01）;血小板数、淋巴细胞百分比、肌酐差异显著（P〈0.05）;红细胞数、平均红细胞体积、平均血红蛋白含量、平均血红蛋白浓度、红细胞体积分布宽度、平均血小板体积、单核细胞百分比、淋巴细胞数、白蛋白、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、总胆红素、碱性磷酸酶、尿素氮、尿酸、磷、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、磷酸肌酸激酶、乳酸脱氢酶差异不显著（P〉0.05）。结论不同等级微生物环境对新西兰兔血液学指标有显著影响。     

小十三星瓢虫对苜蓿斑蚜的捕食功能反应

对小十三星瓢虫Adonia variegata(Goeze)捕食苜蓿斑蚜Therioaphis trifolii(Monell)的研究表明,其功能反应为Holling-Ⅱ型模型,方程为Na=0.967N/(1+0.0095N),捕食苜蓿斑蚜的数量随斑蚜密度增加而增大,日最大捕食量为102头。在10~25℃下,小十三星瓢虫捕食率y与温度x的关系为y=3.4x-7.9375;在25~35℃间的捕食率y与温度x的关系为y=137.08-2.25x。25℃下小十三星瓢虫捕食率最高,捕食率达79.4%。在种内干扰条件下,其捕食作用率E随天敌密度P的增加而减少,干扰反应数学模型为E=0.6063P-0.6743。随着叶片数的增多,小十三星瓢虫和斑蚜之间的距离相对增大,造成捕食率的下降。     

In vitro selection of glyphosate-tolerant variants from long-term callus cultures of Zoysia matrella [L.] Merr

A complete protocol of in vitro selection and greenhouse screening for glyphosate-tolerant variants in manilagrass (Zoysia matrella [L.] Merr) was established in this study. Newly subcultured calli of more than 5?years?? old were transferred to selection medium containing 2?mM glyphosate. After two rounds of selection, 220 calli survived out of 840 and were transferred to regeneration medium without glyphosate. Regenerated plantlets were then transferred to regeneration medium containing 0.5?mM glyphosate to select tolerant plantlets. After 1-month growth, there were plantlets remained green and new shoots formed beside or on discolored explants. These surviving organisms were then transferred to fresh regeneration medium for further growth. Fully developed plantlets were transferred to a green house and then subjected to greenhouse screening by foliar spraying with 0.05?% glyphosate solution. Six glyphosate-tolerant plantlets, TP1-TP6, were obtained and proliferated for determination of sod-tolerance using morphological and physiological measurements. Fourteen days after foliar application with 0.1?% glyphosate, only TP5 showed enhanced sod-tolerance. The dark green color index value of TP5 was significantly higher than CK2, demonstrating that TP5 suffered less injury from glyphosate than CK2. Different physiological characters were also observed in CK1, CK2 and TP5. Significantly higher chlorophyll a content and catalase activity were observed in TP5 than in CK1. Fourteen days after treatment (DAT), the ion leakage, proline content and ascorbate peroxidase activity of CK2 and TP5 increased significantly, but the ion leakage of TP5 was significantly lower than that of CK2. The guaiacol peroxidase activity of TP5 increased significantly 14 DAT, and was significantly higher than that of CK1 and CK2. No change in shikimate content was observed in CK2 or TP5 14 DAT.     

Indexing serum and mucous biochemical parameters of endangered Chinese sturgeon Acipenser sinensis with implications for health assessment

The Chinese sturgeon (Acipenser sinensis) is a critically endangered aquatic fish. Health monitoring and welfare assessments are critical for the conservation of Chinese sturgeon. In this study, biochemical parameters of serum and skin mucus in Chinese sturgeon were examined to evaluate the potential biomarkers. Serum and mucous samples were obtained from Chinese sturgeon, and the levels of total protein (TP), alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), alkaline phosphatase (ALP), lactate dehydrogenase (LDH), creatine kinase (CK), lactic acid (LD), acid phosphatase (ACP), lysozyme (LYZ), glucose (GLU), and cortisol were determined. The concentrations of ALT, AST, cortisol, and LYZ were significantly higher in the mucous group than those in the serum group (p < 0.05). In addition, the concentrations of ALP, ACP, LD, LDH, CK, and TP were significantly higher level in the serum group than those in the mucous group (p < 0.05). Moreover, the correlations between serum and mucous biochemical parameters were established. Statistical analysis showed a positive correlation between serum and skin mucous markers (ACP, cortisol, and LYZ). AST versus ALT in serum and mucus showed a significant positive correlation (p < 0.01). A significant positive correlation was found between cortisol and CK in mucus (p < 0.01). Moreover, LD versus LDH in serum showed a significant but weak positive correlation (p < 0.01). Principal component analysis revealed a complete separation between the serum and mucous groups, with the biomarkers that contributed the most being ALP, TP, ALT, and AST. This study provides baseline data and reference intervals for serum and mucous biochemical parameters in presumably healthy Chinese sturgeons. The current study has important implications for the development of conservation strategies and the conservation status of critically endangered species.     

A dynamic analysis of viral load, T lymphocyte subsets and main biochemical indexes before and after prevention of mother to child transmission (PMTCT) in HIV/AIDS

This study aims to investigate changes in viral load, T lymphocyte subsets and other main biochemical indexes of HIV/AIDS in the prevention of mother to child transmission (PMTCT). In this study, 152 pregnant women with HIV/AIDS enrolled into our hospital from January 2013 to June 2015 were chosen as objects. Changes in viral load, T lymphocyte subsets and other main biochemical indexes of HIV/AIDS were tested and compared before and after 3 months of PMTCT and in neonatals one week after birth. The CD4/CD8 examination result, and difference in CD4 before and after prevention (in the newborns after a week) was statistically significant (P < 0.05), and the rest showed no statistical significance. For the dynamic analysis of main biochemical test results: K⁺, Na⁺, Cl^-, BG, OS, BUN, BUN/Cr, UA,TDIL, DBIL, TP, ALB, CK, LDH, HDL, LDL and other indexes before and after prevention attained statistical significances (P < 0.05 or above). The same sample in the three groups was detected by repeated analysis of variance, K⁺, Na⁺, Cl^-, BG, OS, BUN/Cr, UA, DBI L, ALB, CK, LDH, HDL, LDL and other indexes also showing P at less than 0.05 or above, among which K⁺, Cl^-, CK, LDL showed homogeneity of variance, while Na⁺, BG, OS, BUN/Cr, UA, DBIL, ALB, LDH, HDL showed unequal homogeneity of variance. The study suggests that the dynamic analysis of viral load, T lymphocyte subsets and main biochemical indexes before and after PMTCT in HIV/AIDS are important means to evaluate the dose and treatment of antiretroviral drugs. Monitoring of above indexes is helpful to judge and analyze the condition of the maternal body at various stages, so antiviral drug treatment can be adjusted.     

高脂血症性与胆源性急性胰腺炎的临床对比分析

目的：对高脂血症性与胆源性急性胰腺炎的临床特点进行对比分析。方法：选取我院2007年1月至2012年1月收治的急性胰腺炎患者81例,按照胰腺炎的发病原因分为高脂血症性胰腺炎（观察组）和胆源性胰腺炎（对照组）。比较两组血清淀粉酶（AMY）、甘油三酯（TG）、脂肪酶（LPS）、尿酸（UA）、丙氨酸转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（AKP）、总胆红素（TBIL）和直接胆红素（DBIL）水平、APACHEII评分、CT严重指数、重症比例、手术比例和6个月复发和死亡率情况的差异。结果：观察组LPS、TG、UA、APACHEII、CT严重指数、重症比例和6月内的复发比例较对照明显升高（P〈0．05或〈0．01）,而ALT、AKP、TBIL、DBIL、AMY水平和手术比例较对照组明显降低（P〈0．01）。结论：与胆源性急性胰腺炎相比,高脂血症性胰腺炎病情更重,复发率和死亡率更高,而血清淀粉酶升高水平低。