成骨细胞移植和成骨生长肽对股骨头坏死修复作用的实验研究

目的：研究成骨细胞移植和成骨生长肽（OGP）对激素性股骨头坏死的影响。方法：25只健康成年日本大耳白兔,随机分为正常组（5只）,实验组（10只）和对照组（10只）。实验组和对照组注射醋酸泼尼松龙致使激素性股骨头坏死后,前者成骨细胞移植于动物股骨头并且OGP注射4、8周,后者注射等量生理盐水。测定血清碱性磷酸酶（ALP）、骨钙素（BGP）,测试股骨头力学性质,通过光镜和扫描电镜观察股骨头的形态结构。结果：实验组血清ALP、BGP明显高于对照组（P〈0．05）。实验组股骨头的最大压缩载荷及载荷／位移较对照组高（P〉0.05）。光镜、扫描电镜观察到实验组股骨头中骨小梁形态及胶原纤维排列有序性明显好于对照组。结论：成骨细胞移植和OGP注射对股骨头坏死具有一定的修复作用。     

二乙基亚硝胺诱导大鼠肝癌模型的建立及评价

目的:通过间断小剂量二乙基亚硝胺(DEN)腹腔注射的方法,建立大鼠肝癌模型,并进行评价.方法:60只健康雄性SD大鼠随机分为C组(对照组,n=10)和M组(造模组,n=50),其中M组动物给予DEN腹腔注射,按体重20mg/kg给药,每周3次,至12周时停药.C组给予同等剂量和频率的生理盐水腹腔注射.观察两组动物不同时期肝脏大体变化及病理改变.结果:16周时诱癌成功率为76.2%(32/42).病理学结果显示,M组动物肝脏病变过程经历肝细胞损伤坏死期、肝细胞增生硬化期和肝细胞癌变期.结论:通过间断小剂量DEN腹腔注射的方法,成功建立了大鼠肝癌模型,该模型可作为一种理想的研究人类肝癌发生的动物模型.     

早期股骨头坏死CT灌注成像的实验研究

目的:探讨兔早期股骨头坏死血液动力学的变化规律.方法:实验设醋酸强的松龙诱导和正常对照组各15只新西兰大白兔,分别每2周对实验组3只,正常对照组3只进行多层螺旋CT股骨头灌注成像扫描,用灌注分析软件取得不同病变阶段股骨头的灌注参数,同时作相应的病理学观察,进行对照研究和统计学分析.结果:自2周末至10周末,实验组股骨头单位体积血流量呈下降趋势.统计结果显示,对照组兔和实验组兔第2周末与实验组兔第4周末差异有统计学意义(P＜0.05),但与第6周末差异显著(P＜0.01),与第8及10周末差异极显著(P＜0.01).平均通过时间逐渐缩短,与股骨头单位体积血流量的变化有类似的统计学结果.结论:股骨头CT灌注参数可定量测定股骨头血流变化,可反映早期股骨头坏死形成过程中的血液动力学改变,因此,股骨头血流灌注参数改变对股骨头坏死的早期诊断、治疗和疗效观察有重要价值.     

激素诱导血清病动物骨坏死模型中的脂类代谢异常

目的初步探讨血清病动物激素性骨坏死的发病机制。方法将新西兰大白兔分为三组,A组联合应用马血清和地塞米松磷酸钠诱导骨坏死模型,B组单纯应用地塞米松磷酸钠,C组应用生理盐水作为对照组,对三组实验兔股骨头进行HE、MRI观察,并对各组兔的血脂、AST和ALT进行检测,分析比较。结果A组出现了典型的股骨头缺血坏死改变,血脂、AST和ALT与另外两组相比差异有显著性。单纯应用激素组和对照组未出现股骨头缺血坏死。结论运用马血清和地塞米松磷酸钠可成功诱导出兔骨坏死模型,血管炎、血脂代谢异常和肝功能损害共同导致股骨头缺血坏死发生,短期应用大剂量激素难以诱导出骨坏死模型。     

Micro-CT评价Runx2基因修饰的骨髓间充质干细胞静脉移植促进缺血性股骨头坏死兔坏死股骨头修复效果

目的:应用Micro-CT评价Runx2基因修饰的骨髓间充质干细胞(MSC)静脉移植促进兔坏死股骨头修复效果。方法:24只大耳白兔经缺血性股骨头坏死造模4周后随机分为4组,A组静脉移植1×107个Runx2基因修饰的MSC,B组静脉移植1×107个Runx2 si RNA修饰的MSC,C组单纯植入1×107个MSC,D组静脉植入等量生理盐水,细胞移植后2、4、6、8周取出股骨头标本行Micro-CT检测,评价股骨头坏死修复情况。结果:2周后各组动物股骨头关节面模糊,骨密度降低,骨小梁数量及厚度均下降,骨小梁结构紊乱,但组间差异不明显;4、6周后,A、B、C组动物股骨头内骨密度和骨小梁结构未明显变化,但可见修复反应,而D组动物股骨头内骨小梁结构破坏进一步加剧;8周后,D组动物股骨头关节面塌陷,骨小梁严重缺失形成较大空洞,A、B、C组股骨头可见明显修复反应,关节面完整度、关节面下骨密度、骨小梁体积及数量、骨小梁连续性表现为ACBD组。结论:MSC静脉移植可有效治疗股骨头坏死,且过表达Runx2基因修饰后能有效提升MSC移植后的治疗效果。     

联合高分辨率MRI和micro-CT评价桃红四物汤对兔股骨头坏死的修复作用

目的建立激素性股骨头坏死(SIONFH)家兔模型,联合高分辨率MRI和micro-CT评价桃红四物汤(THSWD)对于SIONFH微观骨性结构破坏的修复作用。方法将25只新西兰兔随机分为3组:正常组5只、模型组和中药组(桃红四物汤组)各10只,采用内毒素(LPS)联合甲强龙(MPS)的方法制备激素性股骨头坏死模型,中药组给予0.3 g/kg桃红四物汤混悬液灌胃,正常组和模型组灌服等体积超纯水。实验第8周分别进行股骨头部3.0 T高分辨率磁共振影像仪高分辨率MRI检查,对股骨头部苏木精-伊红染色病理检测及micro CT检测。结果1)高分辨率MRI中模型组股骨头内可见低信号带;中药组股骨头外形趋于正常,股骨头内近骨骺处有小块低密度区,大部分骨组织灰度值正常。模型组和正常组相比,结构参数前者ROE值增加,ROE/NR比例增加,中药组与模型组相比,ROE值减少,ROE/NR比例减少,差异有显著性(P0.05)。2)经苏木精-伊红染色中,模型组可见部分骨小梁断裂,骨细胞核固缩,骨小梁空骨陷窝,骨髓细胞坏死,差异有显著性(P0.05),中药组可见成骨活动仍较为活跃,骨小梁形态较好。3)在micro-CT中,模型组与正常组相比,前者BV/TV、Conn.D.、SMI、Tb.N、Tb.Th、值降低,BS/BV、Tb.Sp增高。中药组中,BS/BV、Tb.Sp显著低于模型组,Conn.D.、SMI、Tb.N增高,差异有显著性(P0.05),ROI三维重建可见模型组骨小梁紊乱,可见普遍断裂,骨质较少;中药组相对而言骨质改善,骨小梁有局部性修复。结论桃红四物汤能促进兔SIONFH模型的微观骨性结构修复和生物力学环境改善。     

早期激素性股骨头坏死模型的建立

目的:建立早期股骨头坏死模型,为研究其发病机制及合理治疗方法的提供可靠的模型基础。方法:用单一剂量脂多糖LPS(10μg/kg)联合三次甲强龙MPS(10 mg/kg)注射,每次间隔24h,诱导建立兔早期股骨头坏死模型,通过影像学及组织病理性学方法评估模型建立情况。结果:4周后,模型组死亡1例,模型组16例X线检查未见异常表现,2例X线提示股骨头密度不均,未出现股骨头塌陷,18例HE染色示骨细胞空骨陷窝增多,脂肪细胞体积变大,数量增多。结论:用脂多糖(LPS)联合甲强龙可成功诱导建立兔早期股骨头坏死模型,模型成功率高、死亡率低。     

咬合运动与注射醋酸泼尼松龙治疗滑膜炎的疗效比较

目的:比较咬合运动和关节下腔注射醋酸泼尼松龙治疗颞下颌关节滑膜炎的临床效果。方法:选择牙列完整、无第三磨牙阻生、符合颞下颌关节滑膜炎诊断标准的120例患者,随机分为实验组和对照组,每组60例。实验组行咬合运动,每次3-4个循环,每日3-4次,治疗周期为12个月;对照组给予醋酸泼尼松龙0.0125g+0.5ml2%利多卡因关节下腔注射一次,比较两种方法的治疗效果。结果:实验组的60例患者均在治疗后1-2w疼痛消失,追踪3-12个月无复发。对照组的60例患者,2个周后有18例无效,无效率为30%,两组比较其结果有显著性差异(P<0.001);3个月后有22例无效,无效率为36.67%,两组比较其结果有显著性差异(P<0.001)。结论:咬合运动组的治疗效果显著高于醋酸泼尼松龙注射组,咬合运动能有效的治疗滑膜炎并减少患者的治疗痛苦。     

关节腔注射强力霉素对兔膝骨关节炎模型的影响

目的:研究关节腔内注射强力霉素对兔制动性骨关节炎模型的影响.方法:30只新西兰大白兔随机分成正常组6只及实验组24只,试验组左膝关节伸直位石膏固定4周随机选取6只处死左膝关节取材证实造模成功后剩余18只为左膝骨关节炎模型,随机分为治疗组、阴性对照组和模型对照组,治疗组每日给予1.33%的强力霉素0.3毫升左膝关节腔内注射,阴性对照组每日给予生理盐水0.3毫升左膝关节腔注射,模型对照组不做处理,于8周处死取材.观察指标包括关节软骨大体形态,软骨Mankin's评分,软骨细胞基质金属蛋白酶-3(MMP-3)表达及滑膜细胞白介素-1(IL-1)表达.结果:强力霉素治疗组软骨面退变明显轻于模型组及生理盐水对照组,软骨大体评分,Mankin评分,MMP-3表达及滑膜IL-1表达亦显著降低.结论:强力霉素关节腔内注射对兔制动性骨关节炎模型软骨退变有明显的缓解作用.     

咬合运动与注射醋酸泼尼松龙治疗滑膜炎的疗效比较

目的：比较咬合运动和关节下腔注射醋酸泼尼松龙治疗颞下颌关节滑膜炎的临床效果。方法：选择牙列完整、无第三磨牙阻生、符合颞下颌关节滑膜炎诊断标准的120例患者,随机分为实验组和对照组,每组60例。实验组行咬合运动,每次34个循环,每日3-4次,治疗周期为12个月;对照组给予醋酸泼尼松龙0．0125g＋0．5m12％利多卡因关节下腔注射一次,比较两种方法谛治爿效果。结果：实验组的60例患者均在治疗后1-2W疼痛消失,追踪3．12个月无复发。对照组的60例患者,2个周后有18。例无效,无效率为30％,两组比较其结果有显著性差异（P〈O．001）;3个月后有22例无效,无效率为36．67％,两组比较其结果有显著性差异（P〈0．001）。结论：咬合运动组的治疗效果显著高于醋酸泼尼松龙注射组,咬合运动能有效的治疗滑腱炎并减少患者的治疗痛苦。     

Determination of stoichiometry of radioiodination of proteins

A sensitive method for the detection of small quantities of hydrophobic antioxidant free radical scavengers such as butylatedhydroxytoluene (BHT) and butylatedhydroxyanisole (BHA) in aqueous samples is described. The procedure involves extraction of the hydrophobic free radical scavenger into an organic solvent phase, followed by the subsequent reaction of an aliquot of this extract with the stable cation radical tris(p-bromophenyl)amminium hexachloroantimonate (TBACA). In experiments with BHT and BHA, the loss of TBACA absorbance at 730 nm was found to be linearly proportional to the amount of antioxidant added, with quantities of BHT as small as 200 pmol being easily detectable. In aqueous suspensions of dimyristoylphosphatidylcholine vesicles, assays of the aqueous BHT concentration showed that BHT partitioned strongly into the membrane phase, achieving very high BHT/phospholipid ratios. For a given concentration of BHT, partitioning into the membrane phase was greater in large, multilamellar liposomes than in either small, single-walled vesicles or in purified rat brain synaptic vesicle membranes. Direct assay of BHT and BHA in phospholipid membranes, however, was complicated by a nonspecific interaction between TBACA and the phospholipid.