野花生豆凝集素的化学修饰与荧光光谱研究

野花生豆凝集素（ＣＭＬ）经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００测得分子量为１０３．ＯｋＤ．用对二甲基氨基苯甲醛（ＤＡＢ）为显色剂,测得每个ＣＭＬ分子含有５．９个色氨酸残基．在ｐＨ５．１,含８ｍｏｌ／Ｌ脲的醋酸缓冲液中,Ｎ－溴代丁二酰亚胺（ＮＢＳ）可修饰ＣＭＬ分子中的５．６个色氨酸（Ｔｒｐ）残基,同时使ＣＭＬ的凝血活性完全丧失．用焦碳酸二乙酯（ＤＥＰＣ）和Ｎ－乙酰顺丁烯酰胺（ＮＥＭ）分别修饰ＣＭＬ的组氨酸残基和半胱氨酸巯基后,ＣＭＬ的活性均无变化．ＣＭＬ在天然状态下荧光发射峰位于３３６ｎｍ处,用ＣＭＬ的专一性抑制糖Ｎ－乙酰半乳糖胺研究色氨酸的微环境,发现Ｎ－乙酰半乳糖胺可以淬灭ＣＭＬ中８８％的色氨酸残基萤光,Ｓｔｅｒｎ－Ｖｏｌｍｅｒ常数Ｋ＝１．７３Ｌ／ｍｏｌ．同时发现Ｎ－乙酰半乳糖胺能够保护ＣＭＬ,避免ＮＢＳ对ＣＭＬ的修饰作用,表明色氨酸可能是ＣＭＬ维待活性所必需,并直接参与和专一性抑制糖的结合,其微环境较为疏水．     

油麻藤凝集素的荧光光谱研究

用化学修饰、内源荧光和荧光淬灭等方法研究了油麻藤凝集素（ＭＳＬ）的溶液构象变化和微环境的构象特征。研究发现ＭＳＬ分子中总共有９个色氨酸（Ｔｒｐ）残基,它们的荧光能被丙烯酰胺淬灭,但不易为ＫＩ接近而淬灭,ＭＳＬ经Ｎ－溴代琥珀酰亚胺（ＮＢＳ）修饰后,其内源性荧光发射谱发生相应变化,结果表明ＭＳＬ分子中部分Ｔｒｐ残基埋藏于分子内部,而位于分子表面的Ｔｒｐ残基可能处于分子的疏水袋中。     

岩豆凝集素分子修饰与圆二色性的关系研究

天然态岩豆凝集素（ＭＤＬ）远紫外圆二色性（ＣＤ）谱显示２１６ｎｍ处单一负峰,是一种高β－折叠构象凝集素;近紫外ＣＤ谱呈现２８２ｎｍ处负峰和２６０～２７５ｎｍ及２９５ｎｍ处的负肩,经Ｎ－乙基顺丁烯二酰亚胺（ＮＥＭＩ）和对氯汞苯甲酸（ＰＣＭＢ）修饰ＭＤＬ的巯基,其近紫外ＣＤ谱未发生变化,远紫外ＣＤ谱仅发生细微变化,ＭＤＬ凝集活性保持不变;ＰＣＭＢ过量时,ＣＤ谱呈现典型的无规卷曲谱形,ＭＤＬ完全丧失凝集活性,去除ＰＣＭＢ后,活性又全部恢复．二硫苏糖醇（ＤＤＴ）修饰ＭＤＬ的二硫键并用碘乙酸（ＩＣＨ２ＣＯＯＨ）保护巯基,ＭＤＬ远紫外ＣＤ谱２１６ｎｍ处的负峰红移至２２５ｎｍ,且显著减小;同时,近紫外ＣＤ谱２８２ｎｍ处负峰几乎消失,两负肩分别保持完整,分子中α－螺旋降低,无规卷曲增加较多,ＭＤＬ凝集活性未发生变化．用Ｎ－溴代丁二酰亚胺（ＮＢＳ）修饰ＭＤＬ分子中的色氨酸,导致２１６ｎｍ负峰蓝移至２０８ｎｍ且变小,分子中无规卷曲和α－螺旋增加,β折叠减少,近紫外ＣＤ谱２９５ｎｍ负肩消失,２８２ｎｍ负峰红移至２８７ｎｍ,ＭＤＬ凝集活性完全丧失．     

油麻藤凝集素的荧光光谱研究

用化学修饰,内源荧光和荧光淬灭等方法研究了油麻藤集素（ＭＳＬ）的溶液的象变化和微环境的构象特征,研究发现ＭＳＬ分子中总共有９个色氨酸（Ｔｒｐ）残基,它们的荧光能被丙烯酰胺淬灭,但不易为ＫＩ接近而淬灭,ＭＳＬ经Ｎ－溴化琥珀酰亚胺（ＮＢＳ）修饰后,其内源性荧光发射谱发生相应变化,结果表明ＭＳＬ分子中部分Ｔｒｐ残基埋藏于分子内部,而位于分子表面的Ｔｒｐ残基可能处于分子的疏水袋中。     

大熊猫乳酸脱氢酶同工酶H_4的分离纯化和某些性质的研究

采用８－（６－氨己基）－氨基－５＇－ＡＭＰＳｅｐｈａｒｏｓｅ亲和层析法和ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换层析法从大熊猫心肌中分离纯化出了乳酸脱氢酶同工酶Ｈ４．纯化的大熊猫ＬＤＨ－Ｈ４,比活为４４５Ｕ／ｍｇ蛋白,经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ,ＰＡＧＥ,等电聚焦电泳鉴定均为一条带,其亚基分子量为３６０００,等电点为５．４５．经测定大熊猫ＬＤＨ－Ｈ亚基Ｎ端被封闭,Ｃ端氨基酸残基经测定为Ｌｅｕ．氨基酸组成分析表明每个亚基含有５个Ｃｙｓ,９个Ｍｅｔ．     

产碱菌麦芽四糖淀粉酶的化学修饰

不同蛋白质侧链修饰剂对麦芽四糖淀粉酶进行修饰。在一定条件下,分别用ＩＡＡ、ＮＥＭ、ＥＤＣ和ＮＡＩ处理后,酶活力不受影响,仍为１００％,说明巯基、羧基和酪氨酸残基与酶活力无关。用ＤＥＰ、ＮＢＳ和ＨＮＢＢ修饰后,酶活力大幅度下降,说明组氨酸和色氨酸基为酶活力所必需。     

亲和素结合蛋白性质的研究

前曾发现在日本血吸虫虫卵中,存在一种新的能与亲和素专一性结合的蛋白质,称为亲和素结合蛋白（ＡＢＰ）。在分离纯化ＡＢＰ的基础上,用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０分别测定了ＡＢＰ的分子量,并做了糖蛋白染色及等电,大测定。实验结果表明ＡＢＰ是一个分子量为６５ｋＤ的碱性糖蛋白,由数个相同的分子量为１２．７ｋＤ的亚单位组成。ＳＤＳ、β－巯基乙醇处理的ＡＢＰ仍能与亲和素结合,提示ＡＢＰ的亚单位能与亲和素结合。氨基酸修饰剂ＮＡＩ、ＤＴＮＢ、ＮＥＭ及ＮＢＳ对ＡＢＰ与亲和素的结合有不同程度的影响,而ＨＮＢＢ、ＴＮＢＳ及ＩＡＡ对ＡＢＰ与亲和素的结合无影响,提示ＡＢＰ分子中氨基酸残基Ｔｙｒ、Ｃｙｒ是ＡＢＰ与亲和素结合所必需的,可能参与结合位点的形成。另外,测得ＡＢＰ与亲和素结合的结合常数为１．４×１０~（－７）ｍｏｌ／Ｌ。     

红花菜豆(矮生红花变种)凝集素分子的色氨酸残基修饰与其活性的关系

用各种化学试剂修饰红花菜豆（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓｃｏｃｃｉｎｅｕｓｖａｒｒｕｂｒｏｎａｎｕｓ,Ｂｅｒｒｙ）凝集素（简称ＰＣＬ）分子,测定与其活性相关的氨基酸残基．经ＮＢＳ修饰表明ＰＣＬ具有８个Ｔｒｐ残基,其中４个暴露于分子表面,此４个Ｔｒｐ残基被修饰后,ＰＣＬ的凝血活性完全丧失．比较ＰＣＬ修饰前后的ＣＤ光谱表明修饰不改变其二级结构。修饰Ｔｙｒ,Ａｒｇ,Ｈｉｓ残基和游离氨基及羧基不影响ＰＣＬ的血凝活性．巯基也不是血凝活性所必需,但是ＰＣＬ分子中的二硫键被还原,或被ＣＮＢｒ分解为两个片断则使蛋白质丧失血凝活性,提示分子的完整结构对ＰＣＬ的血凝活力是重要的     

香港新记载的三种蕨类植物

香港新记载的三种蕨类植物苏美灵（香港浸会学院生物系，香港九龙窝打老道２２４号）ＮＥＷＲＥＣＯＲＤＳＯＦＦＥＲＮＳＩＮＨＯＮＧＫＯＮＧ￥ＳＵＭｅｉ－Ｌｉｎｇ（Ｍ．Ｌ．Ｓｏ）（ＢｉｏｌｏｇｙＤｅｐａｒｔｍｅｎｔ，ＨｏｎｇＫｏｎｇＢａｐｔｉｓｔＣｏｌｌｅｇ...     

枯草芽孢杆菌中性内切β-甘露聚糖酶的纯化及性质

三草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）ＢＭ９６０２产生的中性内切β－甘露聚糖酶（ｅｎｄｏ－β－１,４－Ｄ－ｍａｎｎａｎ ｍａｎｎａｎｏｈｙｄｒｏｌａｅｓ,ＥＣ,３．２．１．７８）经硫酸铵分级沉淀、ＤＥＡＥ－纤维素（ＤＥ２２）离子交换柱层析,得到电泳纯的样品,提纯了４５．５倍,收率为５．９％。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得该酶的分子量为３５ｋＤ。用ＰＡＧＥＩＥＦ测得其等电点ｐⅠ为４．５。酶反应的     

STUDIES ON THE PATTERN OF MEGASPOROGENESIS AND MICROTUBULAR CYTOSKELETON CHANGES IN CYMBIDIUM SINENSE

ＳＴＵＤＩＥＳＯＮＴＨＥＰＡＴＴＥＲＮＯＦＭＥＧＡＳＰＯＲＯＧＥＮＥＳＩＳＡＮＤＭＩＣＲＯＴＵＢＵＬＡＲＣＹＴＯＳＫＥＬＥＴＯＮＣＨＡＮＧＥＳＩＮＣＹＭＢＩＤＩＵＭＳＩＮＥＮＳＥ￥Ｓ．Ｙ．ＺｅｅＸ．Ｌ．Ｙｅ（１ＢｏｔａｎｙＤｅｐａｒｔｍｅｎｔ,Ｕｎｉ...     

白茯苓凝集素的荧光光谱研究

白茯苓凝集素（ＳＬＬ）分子中含有４个色氨酸（Ｔｒｐ）残基,ＮＢＳ修饰测得这４个Ｔｒｐ残基位于分子表面。ＳＬＬ在天然状态下荧光发射峰位于３３５ｎｍ处,离子强度和温度对其荧光光谱均无明显的影响。ＮＢＳ修饰后的ＳＬＬ失去凝血活性,相应荧光光谱的强度减弱,荧光发射峰发生蓝移,提示ＳＬＬ的构象发生改变。用ＫＩ·ＣｓＣｌ和丙烯酰胺淬灭剂研究ＳＬＬ分子中Ｔｒｐ残基的微环境,发现丙烯酰胺和ＣｓＣｌ能淬灭分子中１００％和５０％的Ｔｒｐ残基的荧光,而ＫＩ完全不能淬灭ＳＬＬ分子中Ｔｒｐ残基的荧光,因此Ｔｒｐ残基周围存在阴离子区,或者Ｔｒｐ残基处于分子表面的疏水环境中。     

L-山梨糖脱氢酶的纯化及性质的研究

从５Ｌ罐发酵Ｌ－山梨糖的Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ　ＳＣＢ３２９和Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ　ＳＣＢ９３３混合菌株中差速离心收集ＳＣＢ３２９菌体,破碎,离心获得无细胞抽提液,硫酸铵分级沉淀蛋白后依次经ＤＥＡＥＣｅｌｌｕｌｏｓｅ ５２和Ｑ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦ柱层析分离得到了Ｌ－山梨糖脱氢酶（ＳＤＨ）,它能将Ｌ－山梨糖脱氢氧化为Ｌ－山梨酮,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳测得分子量约为６０ＫＤ。动力学性研究表明它为一个典型的Ｍｉｃｈａｅｌｉｓ－Ｍｅｎｔｅｎ氏酶,对Ｌ－山     

马氏钳蝎毒素中多肽BmK4112的分离纯化和一级结？…

对马氏钳蝎粗毒中多肽进行分离纯人级鉴定。应用凝胶过滤、离子交换和ＨＰＬＣ的反相色谱方法分离纯化样品。应用二疏基苏醇（ＤＴＴ）还原,碘乙酸保护法对纯化样品进行修饰,修饰样品经酶解后应用Ｅｄｒｎａｎ降解法,并结合ＥＳＩ－ＭＳ法和串联质谱法（ＭＳ－ＭＳ）分析肽的序列。比较修饰前后的质谱,测定分子中的二硫链数目。分离纯化工获得多肽ＢｍＫ４１１２,其一级结构为ＴＰＹＰＶ ＮＣＫＴＤ ＲＤＣＶＭ ＣＧＬＧＩ     

荔枝胚胎发育的研究

荔枝胚胎发育的研究邱燕平,张展薇,丘荣熙（广东省农科院果树所,广州５１０６５０）（广东教育学院,广州５１０３０３）ＳＴＵＤＹＯＮＥＭＢＲＹＯＡＮＤＥＮＤＯＳＰＥＲＭＤＥＶＥＬＯＰＭＥＮＴＯＦＬＩＴＣＨＩＣＨＩＮＥＮＳＩＳＳＯＮＮ￥ＱｉｕＹａｎ－ｐｉｎ...     

中国伞滑刃线虫属─新纪录（真滑刃目：寄生滑刃科）

中国伞滑刃线虫属─新纪录（真滑刃目：寄生滑刃科）ＴＨＥＮＥＷＲＥＣＯＲＤＯＦＢＵＲＳＡＰＨＥＬＥＮＣＨＵＳＦＲＯＭＣＨＩＮＡ（ＡＰＨＥＬＥＮＣＨＩＤＡ：ＰＡＲＡＳＩＴＡＰＨＥＬＥＮＣＨＩＤＡＥ）￥ＹＩＮＧａｎ－ｌｉｕ;ＦＡＮＧＹｕ－ｓｈｅｎｇ（Ｄｅｐ...     

黄精凝集素Ⅱ的纯化及部分性质研究

囊丝黄精（ＰｏｌｙｇｏｎａｔｕｍｃｙｒｔｏｎｅｍａＨｕａ．）的根状茎,经浸取、用硫酸铵分级沉淀、猪甲状腺球蛋白－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱亲和层析、ＣＭ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ柱离子交换层析和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤,可以分离纯化出黄精凝集素Ⅱ（ＰＣＬⅡ）．纯化的ＰＣＬⅡ在聚丙烯酰胺凝胶电泳中显示单一蛋白染色带;在快速高效液相色谱中亦为单一蛋白峰,经分子筛层析测得分子量为１５．９ｋＤ,最大紫外吸收值在２７８ｎｍ,ＰＣＬⅡ只凝集兔红细胞,当浓度为０．２５μｇ／ｍｌ时,即可发生凝集反应,此凝集兔红细胞的能力可被Ｄ－甘露糖和猪甲状腺球蛋白所抑制．氨基酸组成分析表明ＰＣＬⅡ分子中富含酸性氨基酸,Ｎ末端为丙氨酸．经测定ＰＣＬⅡ分子中含有３个色氨酸和２．４％的中性糖．原子发射光谱分析表明,该凝集素分子中含有Ｍｇ和Ｃａ两种金属元素．     

大熊猫乳酸脱氢酶同工酶H4的分离纯化和某些性质的研究

采用８－（６－氨己基）－氨基－５－ＡＭＰＳｅｐｈａｒｏｓｅ亲和层分析法和ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换层析法从大熊猫心肌中分离纯化出乳酸脱氢酶同工酶Ｈ４,纯化的大熊猫ＬＤＨ－Ｈ４,比活为４４５Ｕ／ｍｇ蛋白,经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ,ＡＰＧＥ,等电聚焦电泳鉴定均为一条带,其亚基分了量为３６０００,等电点为５．４５。经测定大熊猫ＬＤＨ－Ｈ亚基Ｎ端被封闭,Ｃ端氨基酸残基经测定为Ｌｅｕ。氨基酸组成分析表明     

决明组织培养的研究

以草决明无菌苗子叶为外植体,接种于７类诱导愈伤组织的培养基上：Ａ．ＭＳ＋２．０２,４－Ｄｍｇ／Ｌ（以下单位省略）＋０．３ＢＡ＋０．２ＮＡＡ．Ｂ．ＭＳ＋０．２２,４－Ｄ十０．２ＢＡ＋２．０ＮＡＡ．Ｃ．ＭＳ＋１．０２,４－Ｄ＋０．５ＢＡ＋０．２ＫＴ．Ｄ．ＭＳ＋０．７ＢＡ＋１．５ＮＡＡ＋０．１ＫＴ．Ｅ．ＭＳ＋１．５２,４－Ｄ＋０．７ＢＡ十０．２ＭＡＡ．Ｆ．ＭＳ＋０．４２．４－Ｄ＋１．０ＮＡＡ＋０．１ＫＴ．Ｇ．ＭＳＢ（ＭＳ的无机成份和Ｂ５有机成分）＋０．１５ＮＡＡ＋ＢＡ,ＫＴ和ＺＴ各０．５。８～１５天后分别有９０～９９．６％的子叶片被诱导出愈伤组织,并且Ｆ．与Ｃ．类培养基对诱导愈伤组织比较理想,放于Ｇ培养基上的愈伤组织有９．２～３０．２％的芽分化率。芽在生根培养基１／２ＭＳ＋０．２ＩＢＡ中、９８％生根,形成完整的再生植株。     

叶绿体腺三磷酶中色氨酸残基的修饰与性质的研究

利用Ｎ－溴代琥珀酰亚胺化学修饰叶绿体腺三磷酶,测得该该酶含３．５个色氨酸残基,其中２个色氨酸残基与酶活性有关。光氧化腺三磷酶伴随吸氧量增加,酶活性逐渐降低,经ＮＢＳ修饰或光氧化的腺三磷酶,其免疫抗原减弱。表明腺三磷酶中色氨酸基参与酶的活性和抗原性。