兰州百合组培鳞茎发育研究

该研究以兰州百合商品种球鳞片为外植体材料,通过组织培养诱导丛生芽萌发及高频增殖,再以丛生芽为材料诱导其发育形成小鳞茎,调节培养基对小鳞茎进行膨大发育培养,最终形成促进兰州百合组培鳞茎膨大发育的“三步”组培培养技术路线;对发育过程中形成的丛生芽、小鳞茎及膨大鳞茎进行淀粉含量测定与生长特征参数统计,分析各步培养对鳞茎形成发育过程中淀粉含量与形态变化的影响。结果表明：所建立的“三步”培养方案培育出的组培鳞茎直径、重量与鳞片数分别为1.66 cm、2.48 g和26.33片,有效地促进了鳞茎的膨大,并能诱导鳞茎主茎杆的形成发育;在培养进程中其淀粉含量呈现逐步增加的趋势,这表明与鳞茎膨大发育正相关,同时鳞茎大小、重量及鳞片数三者也表现为正相关性;当鳞茎所含鳞片数在26片以上时,其生长点易发育形成主茎杆。该文研究了兰州百合组培鳞茎的形成与膨大发育技术,所研发的“三步”培养组成的鳞茎膨大发育组培技术有效地促进了鳞茎的膨大发育,而膨大发育的鳞茎能有效地缩短田间生长周期,从时间上提高百合生产量,同时为实现兰州百合膨大的鳞茎种球规模化生产提供技术支撑。     

百合鳞茎发育过程中碳水化合物含量及淀粉酶活性变化

以兰州百合和亚洲系"精粹"百合为试材,探讨了鳞茎发育过程中不同部位淀粉、可溶性糖含量和淀粉酶活性的变化。结果表明,母鳞茎作为百合萌发阶段的代谢源,其外部鳞片是代谢更为活跃的部位。淀粉和可溶性糖含量同时增加是百合新鳞茎开始膨大的标志。蔗糖是百合鳞茎中可溶性糖的主要形态,还原糖的变化体现了碳水化合物的供应及转化。淀粉酶在百合鳞茎发育过程中对调节和平衡碳水化合物的形态起重要作用。     

兰州百合器官离体培养外植体位置效应观察

探讨兰州百合 (Liliumdavidiivar.unicolor)鳞茎鳞片、叶片和根的不同切段的培养效应。结果表明 :其切段不定芽的分化速度和数量是下段 >中段 >上段。芽的诱导和增殖的最适外植体为鳞茎鳞片 ,兰州百合离体培养中鳞片不定芽诱导和快速繁殖的培养基为MS BA2mg L NAA 0 2mg L ,增殖培养基与诱导培养基相同 ,3周左右不定芽开始分化。叶和根不同部位中不定芽的发育能力大体与鳞茎鳞片一致 ,但低于鳞片 ,较适宜的培养基为MS BA2mg L NAA 0 4mg L ,生根培养基为 1 2MS NAA 0 3mg L ,约 15d生根 ,生根率大于95 %。月增殖率为 1∶4 ,整个繁殖周期约需 3个月。     

百合鳞茎发育过程中淀粉合成相关酶基因的克隆及表达分析

该研究通过同源克隆技术克隆腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)、颗粒结合淀粉合酶(GBSS)和可溶性淀粉合酶(SSS) 3类百合淀粉合成关键酶基因,分析这三类淀粉合成关键酶基因的表达变化,测定百合鳞茎膨大发育中淀粉含量变化。结果表明:(1) AGPase具有GlgC家族蛋白PLN02241蛋白结构特征及cl11394家族蛋白ADP_Glucose_PP与NTP_transferase结构域,获登录号KP751443; GBSS与SSS具有cl10013家族蛋白Glyco_transf_5,GT1_Glycogen_synthase_DULL1_like结构域,获登录号分别为KP751444、KP751445。(2)百合鳞茎形成与膨大发育过程中,淀粉含量呈现递增趋势,鳞茎盘开始分化茎杆时其淀粉含量最高,达到44.52%。鳞茎与叶片部位的三个淀粉合成相关酶基因表达量均逐渐增加;在鳞茎膨大后茎杆分化阶段,三个淀粉合成相关酶基因表达量达到最高,AGPase、GBSS、SSS在鳞片中的表达量分别为10.79,6.92和5.12,叶片中的表达量分别为6.79,5.22和4.41,鳞片中的表达量大幅度高于叶片;淀粉合成相关酶基因的表达量变化与淀粉含量、鳞茎的膨大发育成正相关。这为鳞茎的繁殖生产提供了可通过调节淀粉合成关键酶基因表达促进百合鳞茎膨大发育的思路。     

百合鳞片离体培养诱导小鳞茎发生的研究

百合鳞片离体培养诱导愈伤组织和小鳞茎可在MS+NAA0.2mg/l+6BA2mg/l(pH5.8——6.0)同一培养基上一次完成。接种后9天左右即可获得小鳞茎,一个月左右即可诱导形成完整植株。通过外部形态观察和细胞组织学研究表明小鳞茎的发生与不定芽的发生过程相类似,并讨论了小鳞茎发生过程中的极性现象,细胞起动形成愈伤组织的部位,诱导小鳞茎发生过程中淀粉消化的生理意义以及光对小鳞茎发生的作用等问题。     

温度对兰州百合鳞片埋培繁殖的影响

为了筛选出兰州百合鳞片埋培繁殖的最适温度和鳞片层次,解决兰州百合种源不足、繁育周期长的问题,该文以兰州百合鳞片为材料,采用温度(20、25、30℃)和鳞片层次(外层、中层、内层)二因素完全随机区组设计,研究了二因素对兰州百合鳞片埋培繁殖效果的影响。通过对鳞片疑似发病率、分化率及小鳞茎分化数进行统计与分析,结果发现不同温度处理及各鳞片层次对鳞片疑似发病率、分化率及小鳞茎分化数的影响存在显著或极显著差异。结果表明:(1)温度越高,鳞片的疑似发病率越低,在埋培2周时,20℃处理下疑似发病率最高(38.67%),30℃处理下最低(10%);各层次鳞片的疑似发病率由高到低依次为外层中层内层。(2)在25、30℃处理下,小鳞茎分化率最高,埋培结束(6周)时分别为91.33%、90.89%;中层及内层鳞片小鳞茎分化率极显著高于外层鳞片。(3) 30℃处理下鳞片形成小鳞茎数最多,在埋培6周时达到每片2.00粒;同时中层及内层鳞片小鳞茎分化数显著高于外层鳞片。综上结果表明,兰州百合鳞片埋培繁殖以选用中层(3~4层)、内层(5~7层)鳞片在25~30℃条件下繁殖效果最好。     

兰州百合的组织培养(简报)

以兰州百合植株地下部幼嫩鳞片作为外植体,在MS 6—BA0．5mg/L NAA0．5mg/L的培养基上诱导产生不定芽效果最佳。靠近鳞茎盘部位的外植体诱导出的芽数量较多、质量较好。在添加NAA0．15mg/L的1／2MS生根培养基中可正常发根。     

马蹄莲组织培养和快速繁殖

本文报道从新西兰引进马蹄莲杂交种的8个优良品种。研究植物激素及培养基物理性质对器官形成的影响。试验结果表明细胞分裂素BA0.5—1.0毫克/升明显促进芽的形成和增殖。随着BA浓度的增高.形成芽数也随着增多。备品种均能诱导形成丛生芽。低浓度BA或NAA有利于芽发育和诱导生根。固体培养有利于诱导彤成丛生芽;而液体静置培养促进芽发育和生根。各品种的试管苗成功地移栽田间并已开始开花。     

百合鳞片细胞形态发生中生理生化特性研究

四倍体百合鳞片外植体脱分化形成愈伤组织过程其蛋白质、核酸含量与蛋白酶、淀粉酶、过氧化物酶ＰＯＤ、酸性磷酸酯酶活性先升高后降低,淀粉与ＡＴＰ含量呈降－升－降变化,ＳＯＤ活性先降低后升高,愈伤组织分化芽过程,除ＡＴＰ含量降低外,其余指标均不断升高．鳞片外植体直接分化发育不定芽过程中,仅见蛋白质、淀粉、ＡＴＰ含量与ＳＯＤ、酸性磷酸酯酶活性在５ｄ前降低,其它时间各项指标均升高,直到不定芽发育完成再下降．器官发生型比器官型经历了更为深刻的内部生理生化变化．     

淡黄花百合的组织培养与快速繁殖

以淡黄花百合的鳞片为外植体进行试管培养,筛选出各培养阶段适宜的培养基分别为:(1)丛生芽诱导,MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 0.2 mg/L 蔗糖3%;(2)继代增殖,MS 6-BA 1.5 mg/L NAA 0.1 mg/L 蔗糖3%;(3)生根及小鳞茎生长,1/2 MS NAA 0.5～1.0 mg/L 蔗糖3% 活性碳0.1%,1/2 MS NAA 0.5 mg/L 蔗糖6% 活性碳0.1%.     

应用细胞工程技术选育四倍体龙牙百合的研究

用二倍体龙牙百合鳞片为外植体,培养在添加２,４Ｄ,６-ＢＡ的ＭＳ培养基上,诱导愈伤组织、不定牙与小鳞茎分化,建立了二倍体的体细胞无性系。用浓度０.０２％～０.０５％的秋水仙碱或再加２％～４％的二甲基亚砜溶液处理二倍体小鳞茎、鳞片与愈伤组织均诱导出变异试管苗,通过多代筛选与增殖培养首次获得了变异苗无性系,选育出同源四倍体龙牙百合,其染色体数目为４８（２ｎ＝４ｘ＝４８）。同源四倍体苗粗壮,叶片宽而厚,小鳞茎增殖速度快,小鳞茎所含核酸、蛋白质、氨基酸、淀粉、脂肪、ＡＴＰ及维生素Ｂ２的量均高于二倍体     

金黄花滇百合植株再生与离体快繁技术体系的建立

以金黄花滇百合(Lilium bakerianum var. aureum)的鳞片为外植体, 探讨不同部位外植体和不同配比的植物生长调节剂对愈伤组织诱导和植株再生的影响。研究结果表明, 鳞片诱导愈伤组织和不定芽的最适培养基为MS+1.0 mg∙L ^-16-BA+0.1 mg∙L ^-1NAA+30 g∙L ^-1蔗糖; 不定芽增殖的最适培养基为MS+0.5 mg∙L ^-16-BA+0.1 mg∙L ^-1NAA+30 g∙L ^-1蔗糖; 不定芽诱导小鳞茎的最适培养基为MS+1.0 mg∙L ^-1NAA+30 g∙L ^-1蔗糖; 小鳞茎膨大生根的最适培养基为1/2MS+0.01 mg∙L ^-1NAA+60 g∙L ^-1蔗糖。该研究为金黄花滇百合种质资源保护和快速繁殖提供了技术支撑。     

金黄花滇百合植株再生与离体快繁技术体系的建立

以金黄花滇百合(Lilium bakerianum var. aureum)的鳞片为外植体, 探讨不同部位外植体和不同配比的植物生长调节剂对愈伤组织诱导和植株再生的影响。研究结果表明, 鳞片诱导愈伤组织和不定芽的最适培养基为MS+1.0 mg?L ^-16-BA+0.1 mg?L ^-1NAA+30 g?L ^-1蔗糖; 不定芽增殖的最适培养基为MS+0.5 mg?L ^-16-BA+0.1 mg?L ^-1NAA+30 g?L ^-1蔗糖; 不定芽诱导小鳞茎的最适培养基为MS+1.0 mg?L ^-1NAA+30 g?L ^-1蔗糖; 小鳞茎膨大生根的最适培养基为1/2MS+0.01 mg?L ^-1NAA+60 g?L ^-1蔗糖。该研究为金黄花滇百合种质资源保护和快速繁殖提供了技术支撑。     

添加鳞片诱导物质并商品化大量罐培养百合

三井石油化学公司发现了诱导百合的鳞片形成的特殊物质。确立了利用特殊物质,大量诱导鳞片,进一步罐培养,大量生产铁炮百合的小球根(鳞茎)的方法。从上个月该公司开始了人工培土栽植这种铁炮百合的小球根的盆栽试验销售。该公司除受住友林业委托用罐增殖小蔷薇苗外,在本公司也销售盆栽小蔷薇(参阅本刊1988年4月25日号)。用组织培养的苗已在花卉和蔬菜实用化了。商品化罐培养生产的苗在世界上也是首例。     

平陆百合鳞片组织培养中小鳞茎发生的条件及生物全息现象初探

本文研究了山西平陆百合在组织培养中鳞片分化形成小鳞茎的条件,其小鳞茎的发生符合生物全息理论。试验结果表明:百合鳞片小鳞茎的分化能力与外加植物激素的种类和浓度关系很大。在生长素类物质中,IRA 对鳞片分化小鳞茎效果最好,不仅数量多,而且小鳞茎的体积大,生活力强;NAA 从次之;而2,4-D 的诱导效果最差。细胞分裂素类(KT 或6-BA)与生长素类(IBA、     

百合鳞片组织培养研究

目的:建立百合鳞片组织培养的繁殖技术。方法:研究不同培养基对百合增殖的影响,不同浓度的激素组合对百合鳞片不定芽的诱导、芽的增殖、壮苗和生根的影响。结果:MS培养基为百合最适增殖培养基;最佳诱芽培养基为MS+1.0 mg/L 6-苄基腺嘌呤(6-BA)+0.5 mg/Lα-萘乙酸(NAA),诱导率为62%,苗长势良好;最适增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,增殖倍数最高达3.90,苗健壮,长势良好,叶色浓绿;最佳壮苗培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.1 mg/L赤霉酸(GA3);最佳生根培养基为MS+0.1 mg/L吲哚丁酸(IBA),平均生根数达4.17。结论:获得了百合鳞片组织培养的最佳培养条件,为百合的资源保护和利用提供了参考依据。     

东方百合鳞片的组织培养

东方百合最佳诱导分化培养基为MS 6-BA 1.0 NAA 0.5 2,4-D 1.0;不定芽增殖最佳培养基为MS 6-BA 1.0 NAA 0.1;最佳生根培养基为MS NAA 0.2.3个品种外部鳞片和中部鳞片的分化能力大于内部鳞片;同一个鳞片上段鳞片的分化能力最差,下段最强;每块鳞片分化不定芽数也是上段最少,下段最多.     

继代培养次数对杜梨生根能力和叶形态及其激素水平的影响

为了探索杜梨组培复幼变化规律,对10年生杜梨进行连续继代培养,统计不同继代次数杜梨丛生芽繁殖系数和生根率,观察记录叶片形态变化并测定内源激素含量。结果表明:(1)通过连续继代培养,杜梨丛生芽生根率由0提升到66.70%,繁殖系数由第1代的2.13提升到第10代的4.20。(2)叶片在继代第3次时出现裂刻且随后裂刻程度逐代加深;在继代过程中,丛生芽叶面积和叶脉数显著降低,叶周长和叶形指数呈先下降后上升的变化趋势。(3)丛生芽叶片内源IAA含量在继代第6次时达到46.39 ng·g-1,且显著高于初代丛生芽;随着继代次数的增加,叶片内源ZR呈先上升后下降的变化趋势,内源GA3含量没有发生显著性变化,而内源ABA含量逐渐降低;叶片IAA/ABA和IAA/ZR的值随着继代次数的增加而增加。(4)丛生芽叶片ABA含量和IAA/ZR与其生根率分别呈显著负相关和显著正相关关系,叶片裂刻数和IAA/ABA与生根率均呈现极显著正相关关系,而叶脉数与生根率则呈现极显著负相关关系。研究认为,连续继代培养可显著提高杜梨丛生芽的生根能力,并且与丛生芽叶形和激素含量及其比值有密切的关系,该研究结果为难生根植物无性繁殖以及树木复幼提供了重要技术借鉴。     

不同激素配比对麝香百合鳞茎芽诱导的影响

采用麝香百合的鳞茎片作为外植体进行组织培养,结果表明,不同激素浓度配比对百合鳞茎芽的诱导效果不同,供试的几个组合中,以MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L效果最好;在继代培养中,以MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L对百合鳞茎的增殖效果最好;在生根培养中,附加活性炭可促进根的生长。     

大蒜气生鳞茎形态发生及其碳水化合物和内源激素含量以及相关基因表达的变化特征

以大蒜品种‘二水早’(早熟)、‘麻江红蒜’(中晚熟)和‘徐州白’(晚熟)为材料,采用石蜡切片技术结合显微观察探讨气生鳞茎形成过程中植株茎尖和花序轴形态变化,并测定了‘麻江红蒜’气生鳞茎形成过程中可溶性糖、蔗糖、淀粉和内源激素含量及相关基因表达变化,明确不同熟期各品种大蒜气生鳞茎形成进程和形态解剖学特征,以及碳水化合物和内源激素与大蒜气生鳞茎形成的关系,以探讨大蒜气生鳞茎分化的生理机制。结果表明:(1)依据茎尖生长点和花序轴的形态解剖特征,将气生鳞茎形成进程划分为启动期、气生鳞茎原基分化期(包括保护叶原基、贮藏叶原基分化)、气生鳞茎膨大期和气生鳞茎成熟期等4个时期;3个品种气生鳞茎在相同发育时期的形态解剖学特征相同,但分化时间不同,其分化顺序与大蒜品种成熟期表现一致;当总苞叶叶尖露出叶鞘,花器官原基分化时,花序轴周围分生组织区域产生小突起,标志着气生鳞茎原基分化的开始;外层保护叶由白色转为紫色时气生鳞茎进入成熟期。(2)气生鳞茎开始膨大后,其可溶性糖和蔗糖含量均显著降低,淀粉含量显著升高;ZR含量在启动期显著升高;IAA和MeJA含量在气生鳞茎原基分化期维持在较高水平,但IAA含量随着气生鳞茎膨大显著降低,并在成熟期降至最低。(3)果聚糖代谢相关基因1-SST、1-FEH分别在膨大初期、膨大中期表达量显著升高;细胞壁转移酶基因CWI相对表达量在气生鳞茎原基分化期显著升高;蔗糖信号转导基因T6P和生长素信号转导的关键转录因子ARF1相对表达量均在气生鳞茎分化期显著升高;茉莉酸信号调控途径中的负调控因子JAZ相对表达量在大蒜气生鳞茎原基分化期和膨大初期均维持一个较低水平。研究认为,大量可溶性糖及ZR在茎尖积累,可以启动气生鳞茎原基分化,促进气生鳞茎形态发生;高浓度IAA和MeJA可促进气生鳞茎原基分化;气生鳞茎膨大消耗可溶性糖,且低浓度IAA有利于气生鳞茎膨大;成熟的气生鳞茎积累大量淀粉。