CD4+CD25+调节性T细胞在自身免疫性肝炎发病中的作用

目的:比较自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)患者与健康对照者(healthy controls,HCs)外周血CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tregs)数量、免疫抑制功能的变化,探讨CD4+CD25+Tregs参与AIH发病的可能机制.方法:采用流式细胞仪检测8例AIH患者及15例健康对照组的外周血CD4+CD25+Tregs数量的百分比及绝时数量;采用共同培养方法检测AIH患者外周血CD4+CD25+Tregs的免疫抑制功能的变化;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-FQ-PCR)检删AIH患者外周血CD4+CD25+Tregs中FoxP3mRNA的表达.结果:AIH患者外周血CD4+CD25+Tregs数量明显低于HCs(p<0.01);混合淋巴细胞共同培养结果显示,AIH患者外周血CD4+CD25+Tregs抑制功能明显低于HCs组(p<0.01);AIH患者外周血CD4+CD25+Tregs的FoxP3 mRNA相对表达量显著降低,与HCs组比较有显著性差异(p<0.01).结论:CD4+CD25+Tregs细胞的数量的减少和Foxp3表达的降低所造成的CD4+CD25+Tregs细胞免疫抑制功能受损可能是AIH发病的一个因素.     

CD4~+CD25~+ Treg细胞与移植免疫耐受

诱导器官移植受者对供者抗原的免疫耐受是防治同种异型移植排斥反应的最理想途径。目前认为,免疫耐受形成的主要机制包括:胸腺及骨髓阴性选择引起的克隆清除(Clonal deletion)、组织特异性自身抗原低表达引起的克隆忽视(Clonal ignorance)、阻断T细胞共刺激信号引起的克隆无能(Clonal anergy)、嵌合体(Chimerism)的形成、调节性T细胞(Regulatory Tcell,Treg)介导的克隆抑制(Clonal suppression)等。近年来CD4+CD25+ Treg细胞的研究已成为免疫学界的热门课题之一。已知CD4+CD25+ Treg细胞存在于小鼠、大鼠和人体中,是机体自然存在的具有主动调节活性的T细胞,对维持自我耐受和控制自身免疫病发挥着重要作用。本文着重就CD4+CD25+ Treg细胞的免疫调节机制及其在诱导移植免疫耐受方面的研究进展做一综述。     

SLE带状疱疹患者外周血CD4~+CD28~+和CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞的表达及相关性研究

目的:检测系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)合并带状疱疹患者外周血CD4~+CD28~+和CD4~+CD25~+Fox P3~+调节性T细胞的表达及相关性,探讨其在SLE合并带状疱疹发病中的临床意义。方法:采用流式细胞术检测30例SLE患者、30例SLE合并带状疱疹患者及30例健康对照者外周血中CD4~+/CD8~+T淋巴细胞亚群表面CD28的表达及CD4~+CD25~+Fox P3~+Treg细胞的表达水平,并分析SLE合并带状疱疹患者外周血CD4~+CD28~+和CD4~+CD25~+Fox P3~+调节性T细胞表达的相关性。结果:SLE合并带状疱疹组患者急性期外周血CD4~+T淋巴细胞比率、绝对计数显著降低,CD4~+、CD8~+T淋巴细胞表面的CD28表达下调,CD4~+CD25~+Fox P3~+Treg细胞水平显著高于SLE组及健康对照组,SLE合并带状疱疹组患者外周血CD4~+CD25~+Fox P3~+Treg水平与CD4~+CD28~+水平成负相关(P均0.05)。结论:SLE合并带状疱疹患者CD4~+、CD8~+T细胞活化异常,CD4~+CD25~+Fox P3~+Treg细胞可能参与抑制了T细胞的活化。     

CD8~+T细胞抗衣原体感染研究进展

衣原体(Chlamydia)是一种重要的胞内致病菌,其感染可引起多种疾病并常导致并发症。在衣原体感染过程中,宿主多种细胞参与免疫调控以抵抗衣原体的感染。CD8~+T细胞通过其跨膜受体(T cell receptor,TCR)识别抗原,从而在T细胞介导的抗衣原体感染中发挥了至关重要的作用,其抗感染机制可能与分泌细胞因子有关。现就CD8~+T在衣原体感染过程中的产生、募集、应答机制以及所介导的免疫病理反应作一概述,旨在为衣原体疫苗研制提供新的思路。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞在临床中的应用

CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)是近年来发现的一类能够抑制免疫应答的重要调节性免疫细胞。近年来,因其在自身免疫性疾病、肿瘤免疫及器官移植耐受诱导中具有广泛的应用前景而备受瞩目。本文就CD4+CD25+Treg的分类、来源、特征及在人类疾病中的临床应用进行综述。     

foxp3转染的CD4~+ CD25~- T细胞治疗急性肺损伤的研究

目的通过基因转染技术将foxp3基因导入CD4+CD25-T淋巴细胞,生成CD4+CD25-Foxp3+T细胞,通过输入急性肺损伤小鼠模型体内,促进炎症消退,为体外定向操纵调节T细胞生成和细胞过继治疗急性肺损伤奠定基础。方法采用RT-PCR法从小鼠胸腺来源cDNA文库中扩增获得foxp3 cDNA,亚克隆至构建pIRES2-EGFP质粒中,构建并筛选出重组质粒pmFoxp3-IRES2-EGFP;采用免疫磁珠法分离CD4+CD25-T淋巴细胞,穿孔法转染Foxp3基因至CD4+CD25-T淋巴细胞,流式细胞仪检测CD4+和EGFP共表达的细胞比例;将foxp3基因转染的小鼠CD4+CD25-T细胞通过尾静脉输注急性小鼠体内,通过ELISA法检测小鼠肺泡灌洗液中TNF-α以及IL-1β细胞因子的表达,通过肺组织病理研究肺部炎症的消退状况。结果成功构建双基因共表达重组质粒pmFoxp3-IRES2-EGFP;免疫磁珠法较高纯度分离CD4+CD25+、CD4+CD25-T淋巴细胞,电穿孔法成功将重组质粒pmFoxp3-IRES2-EGFP转染致CD4+CD25-T细胞,CD4+和EGFP共表达的细胞比例为35.5%;过继Foxp3基因转染的小鼠CD4+CD25-T细胞以及Treg均能抑制急性肺损伤小鼠肺泡灌洗液中TNF-α以及IL-1β炎性细胞因子的表达,促进炎症的消退。结论转染Foxp3基因的CD4+CD25-细胞同Treg(CD4+CD25-)细胞一样可以通过细胞过继治疗急性肺损伤。     

Hepal-6 RNA脉冲BMDCs瘤苗抗小鼠HCC免疫效应的研究

目的观察Hepal-6RNA脉冲BMDCs瘤苗能否激发有效的机体抗肿瘤免疫反应。方法用Hepal-6RNA脉冲骨髓分离培养5d的BMDCs,瘤苗的抗肿瘤效应通过C57BL/6J小鼠肝细胞癌(HCC)模型验证,即C57BL/6J小鼠皮下接种Hepal-6细胞8d后,成瘤小鼠分为2组:对照组(注射无血清RPMI-1640)和实验组(足垫部注射Hepal-6RNA脉冲BMDCs瘤苗),30d后处死小鼠并取淋巴结、脾和瘤体冰冻切片,进行CD4、CD8、CD25和Foxp3免疫组织化学染色。结果免疫组织化学检测显示,淋巴结、脾、肿瘤内有大量CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD25+T细胞和Foxp3+Tregs细胞浸润。与对照组小鼠比较,足垫部注射Hepal-6RNA脉冲BMDCs瘤苗的实验组小鼠淋巴结、脾、瘤内CD4+T细胞和CD8+T细胞浸润显著增加,CD25+T细胞和Foxp3+Tregs浸润明显减少。结论 Hepal-6RNA脉冲BMDCs瘤苗能下调小鼠HCC瘤内CD25+T细胞和Foxp3+Tregs浸润,促进CD4+T细胞和CD8+T细胞的增殖和活化,增强D4+T细胞、CD8+T细胞归巢至淋巴结和脾,具有抗瘤免疫效应。     

OX40参与RSV气道炎症反应中CD4~+T细胞的增殖活化

OX40是TNFR超家族成员之一,主要表达于活化的CD4~+T细胞表面。OX40能促进CD4~+T细胞的增殖与活化,但其在呼吸道合胞病毒(respiratorysyncytial virus, RSV)感染所诱发的气道炎症反应中对CD4~+T细胞增殖与活化的作用尚不十分清楚。通过建立RSV急性感染的实验动物模型,采用流式细胞术、免疫磁珠分选、Real-time RT-PCR、Elisa、Western Blot等实验方法,旨在揭示在RSV感染性气道炎症中OX40对CD4~+T细胞增殖与活化的影响作用。结果显示,RSV感染后脾组织内表达OX40的CD4~+T细胞数量及CD4~+T细胞OX40 mRNAs和OX40蛋白表达水平显著增加。从感染3 d的BALB/c鼠脾组织分选CD4~+T细胞进行体外培养并加入OX40激动型抗体,发现加入OX40激动型抗体的CD4~+T细胞组与未加组相比,其细胞因子IL-2、IFN-γ和IL-13的表达水平显著增高。证实在感染性气道炎症中OX40对CD4~+T的细胞增殖与活化起着重要的调控作用。     

CD4+CD25+调节性T细胞发挥效应的分子机制

调节性T细胞是一群具有免疫调节(或免疫抑制)作用的细胞,Foxp3 CD4 CD25 调节性T细胞约占CD4 T细胞的5%￣15%,主要是CD4 CD8-CD25-单阳性胸腺细胞在胸腺的自然选择过程中产生的,也可以通过外周诱导而产生。它通过细胞接触依赖机制和抑制性细胞因子依赖机制主动抑制自身免疫T细胞的活化,维持自稳状态。现对Foxp3 CD4 CD25 T细胞群的一些特征性分子在其效应机制中的作用进行综述。     

趋化因子及其受体介导的细胞迁移与移植物抗宿主病

移植物抗宿主病(graft-versus-hostdisease,GVHD)是同种异基因骨髓移植中的重要并发征。供者T细胞在输注入受者体内后迁移进入淋巴组织,识别受者同种异基因抗原,被受者抗原递呈细胞(antigenpresentingcell,APC)激活,进而活化、增殖分化,介导急性GVHD的发生。现有的研究已表明,活化的异体效应性T细胞经淋巴组织迁移进入黏膜组织以及实质性靶器官,如消化道、肝脏、肺脏和皮肤,进而造成这些器官和组织的损伤。因此,分子间相互作用尤其是趋化因子及其受体介导的效应性细胞的迁移是GVHD发生发展过程中关键的一环,受到了广泛的关注。进一步以趋化因子及其受体为靶标,亦可能形成有效的免疫生物学治疗,具有广阔的应用前景。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞与肿瘤免疫研究进展

调节性T细胞(Treg)是一类具有免疫调节功能的细胞群,在机体的免疫耐受中起着关键性作用。它们主要通过细胞-细胞直接接触的方式抑制CD4+和CD8+效应性T细胞的活化和增殖,来调节获得性免疫系统,阻止自身免疫疾病的发生。Treg中以自然产生的CD4+CD25+调节性T细胞(固有Treg细胞)研究最多。在人类,调控效能主要限于CD4+CD25high亚型。由于Treg独特的生物学功能,它在自身免疫性疾病的发生、移植耐受和肿瘤的发生和转归上越来越受到重视。该文就该类细胞的特点及其与肿瘤关系的研究进展作一综述。     

CD4~+CD25~+Treg细胞在类风湿关节炎中的研究进展

调节性T细胞(Tregs)是近年来发现的一群具有免疫调节作用的CD4+T细胞亚群,如Th3、Tr1细胞等。因其能够产生多种具有免疫抑制作用的细胞因子而发挥其免疫负调节作用,不但在维持机体自身耐受方面发挥重要作用,在预防自身免疫性疾病方面也占据重要位置。其中CD4+CD25+Treg因其具有独特的作用方式及功能特征,而被学者广泛关注。近年来,关于CD4+CD25+Treg在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)发病机制中的作用以及在RA治疗方面的应用也越来越受到人们的关注,认为其数目减少或功能失调与RA发病密切相关。RA是一种以关节破坏为主要表现的慢性炎症性疾病,病理早期主要表现为毛细血管生成,滑膜增生,后期主要表现为炎性细胞浸润,血管翳形成,并出现关节软骨以及骨的破坏,最终导致关节畸形及功能障碍。本文现将CD4+CD25+Treg与RA的研究进展做一综述。     

Foxp3~+ Treg诱导免疫耐受与器官移植

调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)是指具有免疫调节功能的T细胞。自然发育的CD4+CD25+Treg,特异的表达叉头状家族转录因子Foxp3,也称Foxp3+Treg,在维持免疫耐受和免疫稳态方面发挥重要的功能。根据来源可将Foxp3+Treg分为天然Treg(natural Treg,n Treg)和可诱导Treg(induced Treg,i Treg)。本综述总结了Foxp3+Treg及效应性T细胞的发育及其调控机制相关的信号通路,探讨了Foxp3+Treg诱导免疫耐受的作用机制。一些免疫抑制剂如雷帕霉素(rapamycin,RAPA)和最近应用的芬戈莫德(fingolimod,FTY720)等在器官移植后可用来诱导免疫耐受,研究发现这些药物不仅对效应性T细胞的分化、发育有抑制作用,同时对Foxp3+Treg的发育也有重要的影响。     

香菇多糖对急性弓形虫感染过程中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的调节作用研究

目的 探讨香菇多糖(Lentinan,Lent)对急性弓形虫感染BALB/c小鼠CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞(Tregs)数量和功能的调节作用.方法 对RH强毒株感染的BALB/c小鼠进行不同时间点的Lent预处理,动态观察用药后各组感染小鼠的生存率;在感染后第0、3、5、8和10天提取小鼠的脾细胞,FACS检测Tregs细胞数量的动态变化,ELISA法检测脾细胞培养上清中IL-10的分泌水平.结果 感染前6 d 1 mg/kg Lent用药组与药物未处理组相比显著提高了弓形虫感染小鼠的生存率;具有免疫抑制功能的Tregs数量于感染后8d达峰值,同时免疫应答中关键细胞因子IL-10的分泌水平也于感染后8d和10d显著增加.结论 对急性弓形虫感染的BALB/c小鼠采用Lent预处理之后能有效的调节Tregs的数量和功能,从而调控Th1/Th2之间的动态平衡达到治疗弓形虫的作用,为弓形虫病的临床治疗提供的新的理论依据.     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在CD46途径下诱导IL-10生成的研究

目的：炎症抑制因子IL—10在过敏及自身免疫性疾病的发生过程中有着重要意义,补体调节蛋白CD46作为一种新的T细胞活化辅助因子可以诱导CD4^＋T细胞生成IL-10。另外有研究表明,CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（CD^4＋CD25^＋Tregs）作为一种重要的免疫抑制细胞可以通过促进周围细胞分泌IL-10,使其抑制作用得到放大。本研究探讨在CD46辅助刺激途径下,CD4^＋CD25^＋Tregs诱导周围CD4^＋CD25^＋T细胞产生IL-10的能力。方法：分离纯化CD4^＋CD25^＋Tregs和CD4^＋CD25^＋T细胞,采用CD3／CD46或CD3／CD28刺激,分别进行单独培养或按1：10的比例共培养,同时以CD4^＋T细胞组作为比较。用氚标记胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）掺入法测定细胞增殖速率,ELISA方法测定各培养组上清IL10的水平。结果：在CD46或CD28刺激下,CD4^＋CD25^＋Tregs／CIM＋CD25^＋T细胞共培养组、CD4^＋T细胞组的几-10水平均显著高于CD4^＋CD25^＋T细胞单独培养组。在CD46刺激下,CD4^＋CD25^＋T细胞组、CD4^＋CD25^＋Tregs／CD4^＋CD25^＋T细胞共培养组、CD4^＋T细胞组IL-10的水平均较CD28刺激下明显增高,各组细胞的增殖能力均较CD28刺激下显著降低。结论：在cD46或CD28刺激下,CD4^＋CD25^＋Tregs均能够诱导CD4^＋CD25^＋T细胞分泌IL-10,CD46作为一种新的T细胞共刺激分子,与传统的CD28分子相比,能够刺激IL-10分泌增加。本文阐述了CD46途径下CD4^＋CD25^＋Tregs诱生IL-10的功能,进一步研究CD46途径下各类免疫细胞的活化反应,对于明确此途径下免疫细胞的功能改变与某些疾病发病机制的关系具有重要意义。     

CD4~+ CD25~+调节性T细胞与肿瘤免疫的研究进展

CD4+CD25+调节性T细胞是CD4+T细胞的一个重要亚群,具有免疫抑制和免疫无能两大功能。CD4+CD25+T细胞与自身免疫性疾病的发生、移植耐受具有密切关联。近几年的研究表明,CD4+CD25+T细胞与肿瘤的发生发展和转归亦有着密切联系。本文就调节性T细胞的作用机制及特点与肿瘤免疫的关系作一综述。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞在病毒感染中的免疫调节机制

CD4+CD25+调节性T细胞的主要功能是抑制自身反应性T细胞,主要通过细胞与细胞间直接接触和分泌抑制性细胞因子发挥作用,其在维持机体T细胞内环境稳定、调节和保持对自身抗原耐受之间的平衡以及移植免疫耐受方面具有重要作用。新近研究发现,CD4+CD25+Treg数量和功能异常与病毒感染性疾病的发生、发展关系密切。本文就CD4+CD25+Treg作用机制及其在病毒感染性疾病中的作用进行综述。     

CD4+CD25+调节性T细胞

调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)是机体维持自身耐受的重要组成部分。CD4^ CD25^ Treg细胞来源于胸腺,其主要功能是抑制自身反应性T细胞,并且其作用是通过直接的Treg-T效应细胞之间的相互接触方式来实现的。CD4^ CD25^ Treg细胞可分泌多种抑制性细胞因子,但与其抑制功能关系并不明确,目前有证据表明GITR和Foxp3与CD4^ CD25^ Treg细胞的抑制功能有关,并且Foxp3已作为CD4^ CD25^ Treg细胞的特异性标志。通过IL-10、TGF-β等抑制性细胞因子、imDC以及转基因技术可以产生具有免疫抑制功能的调节性T细胞。调节性T细胞在免疫相关性疾病、肿瘤免疫和抗感染免疫等方面具有重要意义。     

CD4+CD25+Foxp3hi细胞在夏氏疟原虫感染DBA/2小鼠作用研究

利用调节性T细胞消除的致死型夏氏疟原虫(Plasmodium chabaudi chabaudi AS,P.c chabaudi AS)感染鼠疟模型,探讨DBA/2小鼠对P.c chabaudi AS感染易感性的原因。DBA/2小鼠对P.c chabaudi AS易感,伴随原虫血症增加CD4+CD25+Foxp3+细胞数量明显增加,且以CD4+CD25+Foxp3hi增加更为明显。原虫血症达峰值时CD4+CD25+Foxp3hi细胞数量亦达到峰值。相比,Treg消除鼠的原虫出现时间和疟血症峰值时间均明显延迟,且在疟血症达峰值前(5～8 d)原虫血症水平明显低于对照组。与之相应,CD4+CD25+Foxp3hi细胞数量明显处于低水平。同时,Treg消除鼠生存期明显延长。由此提示,P.c chabaudi AS感染导致Foxp3表达增加,扩增的CD4+CD25+Foxp3hi细胞有利于疟原虫复制和逃避宿主免疫应答,进而影响疟疾感染的进程和最终结局。     

牙龈卟啉单胞菌脂多糖对CD4^＋CD25^＋调节性T细胞免疫抑制功能的影响

目的探讨牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,Pg）对CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（regulatory T cells,Tregs）免疫抑制功能的影响。方法采用酚水法提取Pg ATCC 33277株脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）。免疫磁珠法分离BALB／c小鼠脾脏CD4^＋CD25^＋Tregs并进行体外培养,同时给予不同剂量（0～500ng／ml）Pg—LPS干预,培养48h后收集细胞及上清液。Real-TimePCR法测定培养细胞Foxp3mRNA的表达,ELISA法分别测定细胞上清液中IL-10、TGF-β水平;采用体外淋巴细胞混合培养法对Pg-LPS干预后的CD4^＋CD25^＋Tregs进行功能抑制试验。结果Pg-LPS干预不影响CD4^＋CD25^＋Tregs分泌IL-10和TGF-β,但是能够显著上调CD4^＋CD25^＋TregsFoxp3mRNA的表达,增强其免疫抑制作用;当Ps—LPS浓度低于300ng／m1时,CD4^＋CD25^＋TregsFoxp3mRNA表达以及免疫抑制作用的增强与Ps—LPS浓度之间呈剂量-效应关系。结论Pg-LPS能够增强CD4^＋CD25^＋Tregs的免疫抑制作用,这种免疫抑制增强效应可能与CD4^＋CD25^＋Tregs Foxp3基因表达的上调有关,并且不具有抑制性细胞因子依赖性。