蝎毒的采集与加工

蝎毒是由蝎尾部毒腺分泌的一种成份复杂的有毒蛋白质。近几年来,国内外对蝎毒进行大量研究结果表明,蝎毒中具有生物活性很高的蝎毒素,不但在生物学研究中有广泛的应用,而且具有许多重要的生理功能。我国中医历来认为,全蝎是治疗神经系统疾病必不可少的良药,而其中起主要作用的就是蝎毒。可见,蝎毒是一种有着广阔应用前景的动物毒素。我国蝎资源极为丰富,仅东亚钳蝎一个种类就分布在长江以北到辽宁铁岭以南的宽广区域。提取蝎毒,能更有效地利用这一宝贵的生物资源,必将成为我国广大产蝎区农民的新的经济来源。提取蝎毒主要有三种方…     

蝎毒的采集及对蝎生长的影响

蝎不同于蛇,所有的蝎都是有毒的。 蝎毒为蝎尾节的毒腺所分泌。当蝎毒通过尾刺被螫入动物或昆虫体内,致使生物体中毒,以致于死亡。尤其是非洲蝎,毒力较强,故早在十九世纪末二十世纪初,就有人研究了非洲蝎毒的提取方法及其毒的化学组成。到五十年代,取毒技术已渐趋成熟。方法主要有三:1.杀死蝎,切下并破碎尾节,用蒸馏水或生理盐水浸取有毒组份。2.用高频电流(6—15V)刺激腺体肌肉收缩获得毒液。3.用夹子夹住蝎尾,人工刺激头胸部,可获得蝎毒。     

蝎β型昆虫毒素的结构及其与钠通道作用机制

蝎毒素是蝎为防卫的需要而产生的一系列活性短肽.其中蝎昆虫特异性毒素可特异性结合并调控昆虫可兴奋细胞膜上的钠离子通道,是研究离子通道结构与功能的首选探针,并在转基因抗虫植物及生物杀虫剂研究方面具有潜在的应用价值.本文对蝎β型昆虫毒素的结构与功能及其对钠离子通道的作用方式和β毒素的电压传感器捕获(voltage sensor-trapping)模型做一综述,为进一步揭示蝎β毒素的结构与功能的关系和在农作物抗虫领域的应用提供依据.     

蝎毒素多肽致/抗痛的靶离子通道机制

疼痛调控是多通道、多受体和多系统介导的复杂生命医学热点问题。诸多靶通道特异性工具药的普遍缺乏,致使其机制解析和临床诊疗转化任重道远。蝎毒是多种毒素多肽的集合体,用于捕食和防御天敌,蛰伤诱致长时程炎症和疼痛。通常认为,类α长链肽类蝎毒素作用于钠通道,延缓钠通道失活,产生致痛效应,而类β长链多肽蝎毒素则相反。短链肽类蝎毒素作用于钾通道、氯通道和钙通道,呈现疼痛相关的功能多样化。因此,开发应用极具潜力的靶向蝎毒素,是解析疼痛调制新机制的重要工具分子。现对蝎毒素与疼痛相关离子通道互作的工作做一综述,并探讨蝎毒素多肽致/抗痛的分子功能多样性。     

马氏蝎毒毒素的分离纯化及其对红细胞膜作用的初步研究

本文用山东产马氏蝎(Buthus martensii kashi)粗毒为材料,经SephadexG-50和Sp-Sephadex C-25二次柱层析,分离纯化获得三个毒峰部分,毒性比粗毒分别提高40—100倍。 纯度鉴定表明三个毒峰的聚丙烯酰胺凝胶电泳和等电聚焦电泳均为一条带,等电点分别为8.7,9.1,9.1,分子量用SDS-不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳测定分别为6,600,5,000和8,500。对纯化蝎毒毒素的氨基酸组分也作了分析。 蝎毒毒素对人红细胞膜作用的初步探索结果表明:它使人红细胞膜的Na.K-ATP酶活性和膜脂流动性有所降低。     

抗昆虫蝎毒素及其转基因技术的研究与应用进展

本文综述了蝎毒中抗昆虫毒素成分的种类、理化性质、分子结构与功能 ,以及利用抗昆虫蝎毒素基因构建重组微生物杀虫剂和培育抗虫植物的研究与应用的进展情况 ,并就该技术对害虫防治的意义、所存在的生态安全性等问题和应对策略进行了探讨。     

蝎毒对生物膜的作用

 <正> 蝎毒的毒性和它的一些生理作用很早就被人们所认识。蝎子在我国来源比较丰富,祖国医学很早就对蝎子的药用有了记载。随着蛇毒、蜂毒、蜘蛛毒等毒素研究工作的深入,蝎毒也越来越引起人们的重视,目前,国内外的科学家对蝎毒毒素的各个方面做了不同程度的研究,但至今对各种生理作用的分子作用机制了解的还较少。很多药物或毒素的生理功能总是始于同细胞质膜、细胞器膜的相互作用,尤其是神经系统的毒素大多是通过生物膜起作用,     

梁氏异蝎毒素促进KYSE-510细胞凋亡的作用机制研究

为了研究蝎毒抑制肿瘤细胞生长的机理,提取梁氏异蝎Heterometrus liangi蝎毒干预人食管癌细胞(KYSE-510细胞),运用流式细胞术、电镜技术、逆转录PCR和Western blot方法分别检测蝎毒对KYSE-510细胞凋亡的影响以及对caspase-3基因表达。结果表明:经蝎毒处理的实验组KYSE-510活细胞数量显著减少,其原因是蝎毒引起细胞大量凋亡和坏死。经不同浓度(50μg·m L~(-1),100μg·m L~(-1),200μg·m L~(-1))蝎毒处理的KYSE-510细胞与对照组的caspase-3基因在mRNA水平表达相近,而在蛋白表达水平上,实验组细胞与对照组细胞相比,蝎毒促进了caspase-3的剪切活化,且以200μg·m L~(-1)蝎毒处理的KYSE-510细胞caspase-3的剪切活化最强,由此证明蝎毒导致KYSE-510细胞凋亡的机理之一可能是其促进了caspase-3的剪切活化。     

蝎毒中的昆虫神经毒素的生化研究

开展对蝎毒中昆虫神经毒素的研究是近几年国内外同行较关注的课题之一。本文扼要地介绍了蝎昆虫神经毒素在一般理化特性,结构与功能的关系及作用的专一性和机理等基础理论研究方面上的一些进展概况。     

肽类毒素(蜘蛛、蝎、芋螺)的三维结构

多肽类毒素研究是目前毒素研究的一个重点,对多肽类毒素的三维结构的研究是了解其结构与功能关系的重要基础.对蜘蛛、蝎以及芋螺这3类代表性的有毒动物的多肽类毒素在结构研究方面的进展及其三维结构的特点进行了介绍.其中,蜘蛛毒素多肽分子的结构主要发现有ICK模体(Inhibitor Cystine Knot motif)和D DH模体(disulfided-irectedh-airpin)两类,蝎毒素中长链肽类毒素分子和短链肽类毒素分子的结构明显不同,前者以CSα/β结构模体(Cyss-tabilizedα/βfold m otif)为主,后者则以α/β脚手架结构模体(α/βscaffoldm otif)为主.相对于蜘蛛和蝎而言,芋螺肽类毒素分子的三维结构则表现得更为复杂多样.     

东亚钳蝎蝎毒素BmKBT基因组序列的克隆及其分析

东亚钳蝎 (ButhusmartensiiKarsch ,BmK)蝎毒素BmKBT(又名BmKabT)是一个在初级结构上相似于β类哺乳动物毒素和功能接近于α类哺乳动物毒素的Na+ 通道毒素 .基于从毒腺cDNA文库中筛选得到的全长BmKBT前体核苷酸序列设计引物 ,以蝎基因组总DNA为模板进行聚合酶链式反应 (PCR) ,将PCR产物克隆至T载体、测序 .序列分析表明 :在BmKBT信号肽编码区的 3′端的- 4位Gly密码子的第 1位与第 2位碱基中有 1个长 2 2 5nt的内含子 ,插入位点距离该基因的起始密码子 4 6nt ,AT含量为 78 7% ,其内含子可能的剪接分枝位点距离 3′剪接受体位点 4 7nt.内含子的大小及其基因组织结构分析表明 :BmKBT具有与α类哺乳动物毒素类似的基因组织结构 ,进一步说明BmKBT是一个介于α类和β类Na+ 通道毒素之间的中间型蝎毒素 ,可以作为研究蝎毒素分子进化的合适材料     

蝎长链神经毒素研究进展

蝎长链神经毒素由60－76个残基组成,含4对二硫键,主要作用于可兴奋细胞的Na^ 通道,这些毒素的作用方式和选择性各有不同,其中功能相似的毒素,其蛋白质及基因序列也都很相似,所有这些长链毒素的三结构地都采用相似的折叠方式,对这些毒素结构与功能研究的深入,将有利于我们对蝎毒素作用机理的了解,并有可能使其更具有生物防虫害或疾病治疗等实际意义。     

蝎短肽链神经毒素研究进展

对蝎短肽链神经毒素结构与功能研究进展作了简要的论述,蝎毒中富含短肽链神经毒素,至今已经分离纯化到60多种,它们的大小介于28－41个氨基酸残基之间,分子中含有3－4对二硫键,空间结构紧密,这些毒素可以特异性地与K＋,Cl-和Ca2 等离子通道相结合,由于它们对离子通道的选择性,这些毒素在药理学和神经生物学中已经得到了广泛的应用。     

我国东亚钳蝎的研究概况

东亚钳蝎又称马氏钳蝎(Buthus martensi),是我国分布最广,数量最多的蝎种。中药全蝎为名贵药材之一。全蝎的养殖和综合利用已列入国家星火计划。蝎子养殖专业户,正从综合利用方面谋求新路。本文作者根据文献资料和实验研究报告,简单介绍我国东亚钳蝎的研究概况。 (一)全蝎的加工与蝎毒的提取 中药全蝎是活蝎制成干品,以干蝎配伍人药,因此,全蝎的质量很大程度取决于加工方法和技术。要使干品得到符合《药典》的要求,首先除去蝎体上的泥沙,以每0.5公斤活蝎用盐量75克为宜,     

WHO关于抗蛇毒素标准化和管理研讨会的报告

这次研讨会讨论了抗蛇毒素标准化和管理的进展 ,会议是由世界卫生组织 ( WHO)生物学质量保证和安全性部门组织 ,于 2 0 0 1年 2月 7～ 9日在英国 Potters Bar国立生物学标准与管理研究所举行。这是 WHO自 1 979年以来关于这个主题召集的第一次会议。与会的有来自 2 1个国家的大学研究所专家、抗蛇毒素制造者及国家监督权威。本次会议回顾了抗蛇毒素产品及其质量管理措施 ,并特别研究了在非洲亚撒哈拉沙漠地区抗蛇毒素产品和供应的现行标准。蛇咬伤和蝎刺伤作为公共卫生问题的重要性应再次强调。多数抗蛇毒素商品是为了对抗蛇或蝎的毒素…     

一个东亚钳蝎蝎毒素BmTXKβ基因的克隆及其基因表达调控

从东亚钳蝎 (ButhusmartensiiKarsch ,BmK)毒腺组织cDNA文库中分离的长链钾通道毒素BmTXKβcDNA序列 ,克隆了BmTXKβ基因组序列 .BmTXKβ基因含有一个长度为 886bp的内含子 ,定位于BmTXKβ成熟肽中 ,与其它蝎毒素基因内含子定位于信号肽的基因结构不同 .并且 ,BmTXKβ基因的内含子特征也与其它蝎毒素基因不同 .研究结果从基因水平上证实了BmTXKβ是一个新的蝎毒素样肽 .以BmTXKβcDNA序列为探针与蝎基因组DNASouthern杂交出现 2条特异性杂交带 .杂交结果为蝎毒素基因可能通过DNA重排、多拷贝或多基因家族来调控基因表达提供了证据 .     

钳蝎的生态观察

蝎是重要中药材,名曰“全蝎”。早在宋代“开宝本草”就有记载。最近国外报道蝎毒有抗肿瘤效果。已引起医药界的重视。     

北非蝎昆虫毒素AaHIT1基因的原核表达和转基因分析

将北非蝎昆虫毒素 (AndroctonusaustralisHectorinsecttoxin ,AaHIT1)基因克隆入温度诱导表达载体pBV2 2 0 ,并在宿主菌E .coliDH5α中进行诱导表达 .表达定位分析发现 ,AaHIT1大部分存在于包涵体中 .蛋白质N 端测序证实了体外表达的AaHIT1蛋白的正确性 .将AaHIT1基因转化入烟草中并获得了转基因植株 ,基因组PCR、RT PCR及Northern印迹分别证实AaHIT1基因已正确地插入到烟草基因组中并已得到表达 .抗虫实验表明 ,该转基因烟草对白粉虱有明显的抗性 .该研究为蝎毒AaHIT1的生物学毒性实验以及获得抗虫转基因作物奠定了基础     

蝎氯毒素结构、功能与应用研究

蝎氯毒素是一类能特异阻断神经胶质瘤氯电流的短链蝎毒素。它们具有高度的同源性、保守的基因序列与相似的3-D结构。根据其结构与功能的关系,推测它们可能有相似的药理功能。其中,Chlorotoxin(Cltx)能与神经胶质瘤细胞特异相互作用,并抑制其侵袭与转移。     

蝎毒素基因分子生物学研究进展

介绍了克隆蝎毒素cDNA和基因组基因的策略以及蝎毒素cDNA的结构和毒素蛋白前体的翻译后加工过程,同时综述了蝎毒素基因组基因的组织结构及其mRNA前体的加工以及重组蝎毒素基因表达的研究进展.