排序方式: 共有44条查询结果,搜索用时 15 毫秒
1.
从中国东亚钳蝎ButhusmartensiiKarsch的毒腺cDNA文库中分离得到了一个编码毒素蛋白多肽 (命名为BmKCT)前体的全长cDNA序列 .该毒素多肽与已报道的氯毒素 (chlorotoxin)高度同源 ,其蛋白质一级序列有 6 8%的同源性 .为了鉴定BmKCT的生物学功能 ,通过pGEX系统成功地表达了BmKCT ,并用GST亲和层析和凝胶过滤的方法获得了纯化的重组BmKCT毒素蛋白 (rBmKCT) .通过膜片钳实验 ,记录了rBmKCT对人脑星型胶质瘤细胞 (gliomascell)表面的氯离子通道电流的作用 .结果显示 ,BmKCT可以显著抑制人脑星型胶质瘤细胞表面的氯离子通道电流 ,并且这种抑制作用在一定程度上是可逆的 .实验证明 ,在细胞水平上 ,BmKCT是一种新的短链氯离子通道抑制剂 . 相似文献
2.
BmKT是从本室构建的cDNA文库中筛选到的1个α钠通道毒素,根据其全长cDNA序列设计引物,采用PCR法以蝎总基因组DNA为模板,获得4个BmKT的同源基因,分别命名为BmKT′和BmKTa、BmKTb、BmKTb′.序列分析表明:BmKT′和BmKTa基因含有大小分别为509 bp和506 bp的内含子,位于信号肽编码区内,插入信号肽-4位残基Gly密码子的第一个碱基G之后;而BmKTb和BmKTb′ 的内含子大小均为418 bp.这4个BmKT的同源基因内含子符合GT/AG拼接规律,其中BmKT′和BmKTa的内含子A+T含量分别为61.7%和61.9%,低于目前已报导的大多数蝎毒素基因A+T含量,大大低于它们第一外显子A+T含量(71.7%),略高于第二外显子A+T含量(55.5%);而BmKTb,BmKTb′的内含子A+T含量分别为75.8%和76.1%,与目前已报导的大多数蝎毒素基因A+T含量相似.BmKT′基因的外显子与BmKT基因cDNA所对应氨基酸序列仅在信号肽中-7位有一个氨基残基的差异(BmKT: Leu→BmKTa: Val);而BmKTa基因外显子所推断的氨基酸序列与BmKT前体比较,则在成熟肽的+54位发生了突变(BmKT: Lys→BmKTa: Asn),是与BmKT同源的一个新基因.BmKTb基因和BmKTb′基因所编码的前体肽与BmKT基因对应的前体肽同源性约为65%,显然BmKTb和BmKTb′是不同于BmKT的2个新基因(GenBank登录号: BmKT′, AY786186; BmKTa, AY676142; BmKTb, AY676140; BmKTb′, AY676141) 相似文献
3.
一种制备GST融合蛋白亲和层析胶的方法 总被引:2,自引:0,他引:2
谷胱甘肽S 转移酶 (GST)融合蛋白表达系统是将外源基因与GST基因融合后在细菌内表达的原核表达系统 .这个系统使外源基因的转录和翻译效率提高 ,同时 ,也避免了外源蛋白受细菌本身蛋白酶的降解 ,从而实现高效表达 .己成为一项常规的实验室操作 ,在大规模工业生产中也广泛应用 .然而 ,该系统采用的亲和层析固定相是商品化的谷胱甘肽琼脂糖 ,价格昂贵 ,限制了这一系统的应用 .我们提供了一种制备谷胱甘肽琼脂糖的方法 ,以获得GST亲和层析胶 ,用于纯化谷胱甘肽转移酶和GST融合蛋白 ,这种方法简单、经济、效果也好 ,现介绍如下 :取… 相似文献
4.
C_2H_2型锌指蛋白研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
遗传信息的实现过程离不开基因表达的调控 ,至今为止发现的转录调控因子中有很多含有锌指模体 (zinc fingermotif)结构。锌指蛋白是指含有通过结合Zn2 稳定的短的可以自我折叠形成“手指”结构的一类蛋白质。由于其自身的结构特点 ,可以选择性的结合特异的靶结构 ,使锌指蛋白在基因的表达调控、细胞分化、胚胎发育等生命过程中发挥重要作用。自从 1 983年在爪蟾卵母细胞中发现第一个具有基因转录调控作用的锌指蛋白TFⅢA以来 ,在多种生物中发现的锌指基因已有约 50 0多个 ,其中人基因组中的锌指蛋白基因达 2 0 0多个。… 相似文献
5.
神经胶质瘤是一种最常见的颅内肿瘤,统计资料表明其发生率约占全部颅内肿瘤的40%.恶性胶质瘤术后中位生存期仅14周,手术加放疗的中位生存期也只有36周,即使手术、放疗、化疗最佳组合,其术后1年生存率也不足50%,而2年生存率则低于10%.在美国每年新查出神经胶质瘤病例24000人,其中18000人在被检出的当年就会死亡.因此促使人们去探索新的抗神经胶质瘤模式.另外,由于组织学上判断胶质瘤分化高低没有一个截然界限,缺乏一个明确的判断标准,所以研究反映胶质瘤生物学特性的指标,也是一个急需解决的问题. 相似文献
6.
7.
8.
两步PCR快速扩增东亚钳蝎BmKIT3 3′cDNA末端序列 总被引:3,自引:0,他引:3
对3′-RACE方法进行了修改,采用一条特异性引物和一条通用Oligo dT引物成功地克隆了东亚钳蝎BmKIT3 3′cDNA末端,与常规3′-RACE方法相比,两步PCR方法具有节约成本、节省时间、增加反应特异性等优点,尤其适用于生物活性肽基因的快速克隆和鉴定. 相似文献
9.
10.