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1.
从中国东亚钳蝎ButhusmartensiiKarsch的毒腺cDNA文库中分离得到了一个编码毒素蛋白多肽 (命名为BmKCT)前体的全长cDNA序列 .该毒素多肽与已报道的氯毒素 (chlorotoxin)高度同源 ,其蛋白质一级序列有 6 8%的同源性 .为了鉴定BmKCT的生物学功能 ,通过pGEX系统成功地表达了BmKCT ,并用GST亲和层析和凝胶过滤的方法获得了纯化的重组BmKCT毒素蛋白 (rBmKCT) .通过膜片钳实验 ,记录了rBmKCT对人脑星型胶质瘤细胞 (gliomascell)表面的氯离子通道电流的作用 .结果显示 ,BmKCT可以显著抑制人脑星型胶质瘤细胞表面的氯离子通道电流 ,并且这种抑制作用在一定程度上是可逆的 .实验证明 ,在细胞水平上 ,BmKCT是一种新的短链氯离子通道抑制剂 .  相似文献   
2.
从东亚钳蝎 (ButhusmartensiiKarsch ,BmK)毒腺组织cDNA文库中分离的长链钾通道毒素BmTXKβcDNA序列 ,克隆了BmTXKβ基因组序列 .BmTXKβ基因含有一个长度为 886bp的内含子 ,定位于BmTXKβ成熟肽中 ,与其它蝎毒素基因内含子定位于信号肽的基因结构不同 .并且 ,BmTXKβ基因的内含子特征也与其它蝎毒素基因不同 .研究结果从基因水平上证实了BmTXKβ是一个新的蝎毒素样肽 .以BmTXKβcDNA序列为探针与蝎基因组DNASouthern杂交出现 2条特异性杂交带 .杂交结果为蝎毒素基因可能通过DNA重排、多拷贝或多基因家族来调控基因表达提供了证据 .  相似文献   
3.
鸡胚部分去壳离体培养的效果与发育观察   总被引:3,自引:0,他引:3  
将25枚产后不到24h的种蛋,依次用碘酒和70%酒精擦拭消毒处理,去掉其钝端外壳三分之一,然后用保鲜膜封口,并以25枚正常种蛋作为对照,按常规方法进行孵化。重复实验3次。第1次孵化,实验组的孵化率显著低于对照组(P〈0.05),仅为4%;第2次孵化,两组的孵化率比较接近(分别为72%和80%);第3次孵化,实验组的孵化率(76%)稍低于对照组(88%)。3次孵化的平均孵化率,实验组和对照组分别为6  相似文献   
4.
以东亚钳蝎(Buthus martensii Karsch,BmK) BmαTX14全长cDNA序列设计引物,克隆BmαTX14成熟肽,插入毕赤酵母表达载体pPIC9K中,转化酵母,诱导表达。TricineSDS PAGE和Western blot分析显示,表达产物以可溶性分子形式存在于培养上清中,诱导84h时的表达量达到高峰,约为120mg/L。通过Ni金属螯合层析柱亲和层析、聚乙二醇沉淀、凝胶分子筛层析获得纯化的rBmαTX14融合蛋白,经毒性实验表明,具有明显的抗昆虫活性。同时以蝎基因组总DNA为模板进行PCR扩增,得到BmαTX14基因克隆,序列分析显示: BmαTX14在编码信号肽的基因序列中有1个长408bp的内含子,其基因组织结构具有α型Na+通道毒素的特征。从功能活性和基因组织结构两个角度证实BmαTX14为α型Na+通道毒素。  相似文献   
5.
通过调查细尖狼蝎Lychas mucronatus和澳链尾蝎Liocheles australasiae在海南岛的分布,获得了植被和土壤类型,部分土壤湿度,以及分布地的海拔高度等数据。对数据进行分析,可以看出,细尖狼蝎在全岛大部分地区均有分布,澳链尾蝎集中分布于岛的东南部;两者基本分布于低海拔地区;澳链尾蝎可以生存的环境空间较广阔,而澳链尾蝎对环境条件的要求要高一些,需要在一定植被类型、土壤类型和湿度以及一定的海拔范围内才能生存。  相似文献   
6.
为研究蝎毒素BmkTXKβ对家兔心房肌细胞瞬间外向钾电流(Ito)的影响,采用全细胞膜片钳技术记录应用BmkTXKβ前后的Ito电流. 结果显示BmkTXKβ(1 μmol/L)使心房肌细胞Ito(刺激电压为+50 mV)从(13.63±0.87)pA/pF减少到(7.98±0.78)pA/pF,抑制率为41.4% (n=16, P<0.001).冲洗后, Ito部分恢复至(11.18±0.82)pA/pF (n=6, P<0.01,与给药后比较).在0.01~100 μmol/L范围内BmkTXKβ呈浓度依赖性地抑制ItoIC50的均值为0.95 μmol/L (n=10, P<0.01),但无频率依赖性(n=6,P>0.05). 1 μmol/L的BmkTXKβ可使Ito通道的失活动力学曲线明显左移,V1/2分别为(-23.6±2.7) mV和(-35.3±3.6) mV(n=8,P<0.05),曲线斜率基本不变.同时可使Ito通道的恢复过程明显减慢,恢复曲线右移,τ值从(51.2±8.5) ms延长至(93.5±13.4) ms(n=9,P<0.01),但不影响其激活过程.据此推断BmkTXKβ对家兔心房肌细胞Ito具有显著的抑制作用,主要作用于失活过程,延长该通道的恢复时间.  相似文献   
7.
对作用于钾离子通道的蝎毒素的空间结构特点进行了简要归纳,发现高含量碱性残基在不同结构单元广泛分布而少量酸性残基特征性分布等新特点。蝎毒素活性表面研究进展表明,利用空间结构的分子模建结合残基突变是确定活性表面的有效方法。基于少量酸性残基特征分布与活性表面取向的相关性,提出酸性残基为活性调节残基的新观点和简单的“拇指”规则预测钾毒素活性表面的方法,从而可望加速蝎毒素的结构与功能关系研究。  相似文献   
8.
蝎Na+通道毒素为低分子量肽类物质,由60~76个氨基酸残基组成,含有4对二硫键.这类分子为电压门控Na+通道功能门控机制的高亲和性配体,具有重要的理论价值和应用前景.本文对Na+通道毒素的初级和高级结构、药理学特性及功能解剖等方面的研究结果进行了综述.  相似文献   
9.
蝎毒液肽基因内含子剪接信号分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
从中国蝎Buthus martensii Karsch基因组DNA中分离到两个毒液基因的内含子。在此基础上,通过编辑和分析目前已出版的蝎毒液肽基因内含子序列,确定了这类基因内含子剪接信号的共有序列,并将其与其它其它物种进行了比较。本文的结果对于研究蝎毒液肽前体mRNA的剪接机制以及比较不同物种之间内含子进化和功能的关系具有参考价值。  相似文献   
10.
一种新的蝎毒素BmTXKβ的基因组结构及分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
根据从东亚钳蝎(Buthus Martensii Karsch,BmK)毒腺cDNA文库中筛选得到的长链钾离子通道毒素BmTXKβ基因序列设计引物,采用Vectorette方法克隆其5′及3′侧翼区。结果表明:BmTXKβ在编码信号肽的基因序列中有—大于997bp的内含子,并且其成熟肽中也有一个886bp内含子,而目前已知的其他蝎毒素只在信号肽中有一个内含子或没有内含子。BmTXKβ基因组结构的独特性更进一步证实BmTXKβ是一个新的长链钾离子通道毒素成员。  相似文献   
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