奶基婴幼儿食品中维生素B12活性测定：微生物分析法

莱士曼氏乳酸杆菌(L.leichamanni)对维生素B_(12)的存在具有极高的灵敏性,利用这种特异性可以定量的测出奶基婴幼儿食品中维生素B_(12)的含量。为了达到定量测定的目的,在供繁殖试验菌株所用培养基中供给除维生素B_(12)以外的所有营养成份,这样细菌的生长就会同标准溶液及未知测定溶液中维生素B_(12)的水平相对应。以不同浓度溶液的％T读数相对于各管中所含标准物质的量绘制标准曲线。根据标准曲线即可计算出样品中维生素B_(12)的含量。 本方法适用于维生素B_(12)活性含量≥0.1μg/g(ml)的奶基婴幼儿食品。     

运用微生物法测定保健食品中的维生素B6

介绍运用微生物法测定保健食品中维生素B6的含量。GB／T5009．154—2003将微生物法规定为测定食品中维生素B6的国家标准方法Ⅲ。其原理为卡尔斯伯酵母菌需在有维生素B6存在的条件下才能生长,在一定条件下维生素B6的量与其生长量成正比关系。用分光光度仪在550nm波长下测定该菌的生长．与标准曲线相比较,从而得出该样品中维生素B6的含量。通过对国标方法作较详细的注解,并对有些地方作适当的修改,以期对需要开展此项工作的实验室及其人员会有较大的帮助。     

微生物分析方法测定保健食品中维生素B6的含量

称取保健强化食品样品,以0.22 mol/L H2SO4、121 ℃高压蒸汽锅水解、吸取合适浓度的检测样品到吡哆醇Y培养基中,接种卡尔斯伯(Saccharomyces Carlsberyensis)酵母菌,于(30±0.5) ℃恒温箱中培养18～22 h,用分光光度计在550 nm波长下测定酵母菌的生长,对应标准生长曲线求得样品中维生素B6(VB6)的含量,同时以同样的方法检测加标回收量.实验结果表明,该方法准确、回收率高、重复性好,便于实验室开展.     

转基因鱼腥藻培养中培养液吸光度与生物量的关系

对转基因鱼腥藻Anabaena sp.PCC7120,培养液的吸光特性进行了研究,在可见光范围内,有5个吸收峰,波长分别为345nm,410nm,440nm,635nm,685nm,其中440nm是最大吸收波长,一定稀释度范围内,在各波长下,培养液中藻干重与吸光度均成正比,但不同培养基其干重－吸光度标准曲线不同,实验得到不同培养基的标准曲线,证明可以用比浊法测定转基因鱼腥灌培养过程的生物量。     

维生素B12的光解研究及发酵液中维生素B12检测新方法的建立

采用HPLC检测法研究5,脱氧腺苷钴胺素和甲基基钴胺素的水溶液在不同光源及不同照度下的光解情况,结果表明随着光能量的增加光解速度加快。利用脱氧腺苷钴胺素的光解性质,探索了一种检测发酵液中维生素B12含量的新方法。将含有钴胺素的细胞破碎液完全光解后,测定光解后的产物羟基钴胺素,以此来确定维生素B12产量。此方法简便快速、重复性好,可应用于发酵生产维生素B12的各个环节。     

西安地区妊娠妇女不同孕期血清铁蛋白、叶酸和维生素B_(12)的水平及临床意义

目的:探讨西安地区妊娠妇女不同孕期血清铁蛋白、叶酸和维生素B12的水平及临床意义。方法:收集2012年8月至2013年1月在本院进行产前检查的750例妊娠期妇女及86例健康非妊娠妇女的血清标本。采用全自动化学发光免疫分析法测定其血清铁蛋白、叶酸和维生素B12的含量。结果:孕妇血清铁蛋白、叶酸和维生素B12的含量随孕期的增长而逐渐降低。早、中、晚孕期妇女叶酸的含量较对照组相比,并无显著差异(P0.05)。中、晚孕期妇女血清铁蛋白和维生素B12含量均显著低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:西安地区中、晚孕期的孕妇体内存在铁蛋白和维生素B12缺乏,但并不缺乏叶酸。在重视补充叶酸的同时,也应该重视对铁和维生素B12的补充。     

饲料膨化加工方法对其营养成分的影响

目的观察饲料生产过程中的膨化处理对各种营养素的影响情况。方法随机选取不同批次的膨化饲料按GB/T14924.9-2001标准,进行水分、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、氨基酸、维生素及矿物质的测定,得出膨化前后理化检测数据并进行分析。结果饲料中粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维、氨基酸、维生素经过膨化处理后,均出现了不同程度的损失,其中维生素损失较大,致使维生素B1、维生素B2、维生素B6、叶酸大部分损失。结论膨化加工方法对于饲料中的常规营养成分、氨基酸、维生素水平有较大程度的影响,为满足动物生长、发育、繁殖等需要,应采取添补措施,以保证其营养成分。     

免疫亲和-HPLC法测定婴幼儿配方乳粉中维生素B12

目的：建立免疫亲和-高效液相色谱法测定婴幼儿乳粉中维生素B12的方法。方法：样品经缓冲溶液提取、过滤,滤液过维生素B12免疫亲和柱净化后,洗脱液在60℃下氮吹定容上机。采用C18色谱柱,柱温为30℃,流动相为乙腈和水（15∶85）,梯度洗脱,流速为0.25mL/min,紫外检测器波长为361nm,外标法定量。结果：维生素B12在0.01～1μg/mL范围内呈良好线性关系,相关系数（r）为0.999 9。本方法的检出限为5μg/kg。在样品中添加不同添加量水平的标准物质,加标回收率为80%～89%;选择不同含量的样品,重复测定相对标准偏差（RSD）为0.3%～1.6%。结论：该方法较现行国标GB 5413.14—2010的微生物法操作简便,易于掌握,可提高工作效率。     

西安地区妊娠妇女不同孕期血清铁蛋白、叶酸和维生素B12的水平及临床意义

目的：探讨西安地区妊娠妇女不同孕期血清铁蛋白、叶酸和维生素B12的水平及临床意义。方法：收集2012 年8 月至2013年1 月在本院进行产前检查的750 例妊娠期妇女及86 例健康非妊娠妇女的血清标本。采用全自动化学发光免疫分析法测定其血清铁蛋白、叶酸和维生素B12的含量。结果：孕妇血清铁蛋白、叶酸和维生素B12的含量随孕期的增长而逐渐降低。早、中、晚孕期妇女叶酸的含量较对照组相比,并无显著差异（P〉0.05）。中、晚孕期妇女血清铁蛋白和维生素B12含量均显著低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：西安地区中、晚孕期的孕妇体内存在铁蛋白和维生素B12缺乏,但并不缺乏叶酸。在重视补充叶酸的同时,也应该重视对铁和维生素B12的补充。     

免疫亲和柱-超高效液相色谱法测定维生素饮料中维生素B12

采用免疫亲和柱—超高效色谱法建立维生素饮料中维生素B12的测定方法,样品经免疫亲和柱富集、净化后,用3mL甲醇以流速为1滴/秒的速度洗脱,氮气吹干后溶解再经超高效液相色谱法测定。色谱柱为HSS T3,柱温35℃,流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液梯度洗脱,流速为0.6mL/min,波长为360nm测定。结果表明,维生素B12在浓度为0.4~10μg/L内线性关系良好,回归方程为Y=4 040X-364,相关系数为0.997 00,回收率为94.68%,检出限为0.1μg/L。本方法具有操作简单、灵敏度高、结果准确、检测效率高等优点,满足于成分复杂、维生素含量低的维生素饮料中B12的测定要求。     

红色毛癣菌的生物学特性研究

目的 观察红色毛癣菌在不同温度、不同培养基上的生长和产孢情况,并对其进行分子生物学鉴定.方法 ①大培养:采用沙堡葡萄糖琼脂(SDA)和马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)平皿,27℃、35℃黑暗培养,测量菌落直径,绘成生长曲线.②小培养(钢圈法):采用SDA、PDA、溴甲酚紫乳固体葡萄糖琼脂(BCP-MSG)、乳蜜琼脂(M)和复合维生素B(VitB)培养基,27℃、30℃黑暗培养,观察镜下菌丝生长、孢子产生情况.③进行rDNA 18S和ITS序列测定.结果 在SDA,PDA上,27℃条件下菌落生长速度较35℃快;在5种培养基上,SDA、PDA产孢较快较多,复合维生素B培养基产孢较慢,但产生大分生孢子较多.30℃产孢更丰富.对部分菌株rDNA ITS、18S PCR扩增产物纯化后直接测序,结果在GenBank中比对、分析,相似度为98%～100%,均鉴定为红色毛癣菌.结论 SDA、PDA均为鉴定和分离红色毛癣菌的合适培养基.5种培养基均可用来刺激红色毛癣菌产孢,其中SDA、PDA产孢较早、较丰富.红色毛癣菌rDNA 18S和ITS序列测定是一种快速准确的红色毛癣菌分子生物学鉴定方法.     

奶基婴幼儿食品中泛酸的定量分析——微生物分析法

泛酸不象其它维生素那样可以广泛地作为微生物的基本生长因素,仅有乳酸菌和十分有限的几种酵母菌是泛酸的严格异养菌。植物乳杆菌(L.plantarum)就是泛酸测定中应用最广泛的生物指示剂。它在样品中的繁殖量与样品中的泛酸含量成正比,因此可以将标样中泛酸的量转化成相应的植物乳杆菌的生长量。再根据标准曲线,将样品中植物乳杆菌的生长量计算成泛酸的含量。 本方法适用于含泛酸钙及游离泛酸的奶基婴幼儿食品。     

一株耐铀菌株的鉴定及其促生特性研究

从退役铀矿区土壤中筛选获得耐铀促生菌株,为铀污染土壤的微生物-植物联合修复技术提供优良菌种资源,以解决退役铀矿区污染治理问题。梯度稀释某退役铀矿区污染土壤,涂布含铀培养基,分离筛选出一株具有耐铀性能菌株B2。通过形态学观察、生理生化实验及16S rDNA序列比较分析,对其进行初步鉴定。采用分光光度法测定菌株在铀胁迫下的生长曲线和培养基铀含量,分析其耐铀能力和铀吸附或吸收能力。通过平板法测定其固氮、解磷、产纤维素酶、合成铁载体能力。用Salkowski比色法测定其产吲哚乙酸（3-indole acetic acid, IAA）能力及产量。通过种子萌发和盆栽实验,验证该菌株的促生能力。综合形态观察结果、生理生化特征和基于16S rDNA序列的进化分析,确定菌株B2为微枝形杆菌属细菌（Microvirga makkahensis sp.）,在铀浓度为0-400 mg/L时,其生长曲线符合S型生长曲线模型,当铀浓度达到600 mg/L后生长受抑制,其对培养基中的铀无吸附或吸收作用。菌株B2具有固氮、解磷、产纤维素酶、合成铁载体和产IAA的促生特性,培养48 h后IAA产量可达到24.39μg/...     

植物维生素生物强化进展

维生素是动植物生长发育所必需的微量营养素,包括A、B族(B1、B2、B3、B5、B6、B7、B9、B12)、C、D、E和K等。这些物质由于人体内不能合成或合成量不足,所以虽然需要量很少,但必须从膳食特别是植物性食品中获得。因此,利用生物强化技术来提高植物合成的维生素含量可以有效地应对全球性维生素缺乏的问题,对人类的生存与健康具有重要意义。综述了近年来国内外植物中维生素代谢和生物强化的主要研究成果,并对利用分子设计育种进行维生素生物强化的未来发展方向进行了展望。     

双歧杆菌丝状体生长形态初探

研究双歧杆菌在特定培养条件下生长及增殖模式的变化.采用不同浓度维生素B6和维生素E烟酸酯药敏纸片联合影响双歧杆菌生长,通过革兰染色和原子力显微镜扫描观察双歧杆菌的生长、增殖情况.在维生素B6和维生素E联合作用下,双岐杆菌出现丝状体群集生长的现象,且二分裂增殖方式受到抑制.第1次转种于普通培养基中可保持此种生长增殖方式,但连续转种3次后会恢复常规生长增殖方式.不同浓度维生素B6和维生素E烟酸酯药敏纸片联合可诱生双歧杆菌丝状体.     

丙酸积累对薛氏丙酸杆菌生长及产酸的影响*

报道丙酸积累对维生素B12产生菌Propionibacterium shermanii生长及丙酸产生的影响,在初糖浓度6％,pH6.5的批次发酵条件下,测定了该菌的耗糖、产酸和茵体生长曲线。发酵24h后,培养基中添加1％、3％和6％的丙酸,发酵结束时菌体干重只有对照的75．2％、65．4％和52.9％,产酸是对照的79.3％、69．2％和39．3％。加入6％的丙酸不能完全抑制耗糖和产酸。部分解除丙酸抑制可使菌体干重增加60％。     

青海地区不同品种青稞中B族维生素含量分布

利用HPLC法对青海不同产地的15个不同品种青稞中6种B族维生素质量分数进行了测定.结果表明:15个不同品种的青稞,除叶酸(未检出)、VB12(含量较少)外,其余4种所测B族维生素含量均较丰富.其中称多产的二道眉黑青稞VB总量最高,可达0.10842 mg·g-1,民和产的长芒黄脉青稞VB总量最低,为0.03892 m...     

维生素B型氨基酸衍生维生素的生物合成及功能研究

氨基酸衍生维生素是以氨基酸为前体合成的维生素,主要为维生素B和E家族的维生素,其生物合成方式主要为氨基酸整合和转氨作用。氨基酸衍生维生素在大多数真核生物中主要是作为辅被用物和辅因子,缺乏某些维生素会使动植物患病。本文主要对氨基酸衍生维生素中的维生素B家族的生物合成及功能进行综述,概述了氨基酸在B族维生素生物合成中的作用、不同物种中B族维生素的含量水平以及B族维生素的作用。     

酵母菌杂交育种V．药用酵母的杂交育种

用显微操作技术对啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)不同品系间进行杂交,从不同杂交组合中选出五株杂种菌株,在甜菜糖蜜培养基中所有杂种的生物量比工业生产藏Y26提高20％以上,其中杂种l{x895可提高生物量达30％o细胞的生物量和残糖测定表明：Hx895在生长速度、糖的利用率皆优于Y26;总蛋白质量和维生素B z含量测定证明Hx895也优于Y20。遗传分析和细胞DNA含量测定证实HX895为四倍体。     

Marc-145细胞无血清培养液组分的优化筛选

目的：对Marc-145细胞无血清培养液组分及浓度进行优化筛选。方法：采用Plackett-Burman设计和中心组合旋转设计对不同的营养成分进行优化筛选。结果：经Plackett-Burman设计,利用20组实验对14种不同营养成分进行考察,发现孕酮、抗氧化试剂、乙醇胺、维生素B12、维生素B12和脂肪酸复合剂对Marc-145细胞无血清悬浮生长的比生长速率有显著影响;针对该6种因素进行中心组合旋转实验设计,利用53组实验筛选出它们的最优使用浓度分别为孕酮5．5mg／L、抗氧化试剂250μL/L、乙醇胺2．1mL／L、维生素B12 2．86mg／L、维生素B6 44μg/L和脂肪酸复合剂215μL/L。结论：经2种实验设计方法优化,确定了Marc-145细胞无血清培养液组分及最适浓度,为无血清悬浮培养Marc-145细胞及增殖猪繁殖及呼吸综合征病毒提供了实验基础。