大肠埃希菌耐药性水平传播实验研究

目的研究重症监护病房（ICU）患者标本中分离的大肠埃希菌的耐药情况以及耐药性水平传播的实验研究。方法采取双纸片法（K-B）检测细菌的耐药性;产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌为供体菌,耐利福平大肠埃希菌（对其他抗生素敏感）作为受体菌进行接合实验;采用聚合酶链反应（PCR）技术扩增整合子和耐药基因。结果30株大肠埃希菌中产ESBLs菌株检出率为46．7％;接合培养后,接合菌携带23kb和25kb大质粒,而无供体菌中一系列小质粒;供体菌和接合菌均携带I型整合子。结论大肠埃希菌耐药性严重,且呈多重耐药性;产ESBLs菌株可通过质粒和整合子将耐药基因转移给敏感菌,导致耐药性传播。     

大肠埃希菌耐药性及其基因同源性分析

目的 研究临床分离的大肠埃希菌对常用抗生索的耐药性及其基因分型,了解其耐药性趋势与传播流行情况,为临床合理治疗大肠埃希菌引起的感染提供参考依据。方法 采用常规鉴定技术鉴定细菌;采用K—B纸片扩散法测定77株大肠埃希菌对19种药物的耐药性;K—B法鉴定产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）;通过脉冲场凝胶电泳（PFGE）法对其进行基因分型以确定菌株之间的亲缘关系;FINGERPRINT Ⅱ软件进行细菌基因指纹图谱分析。结果 大肠埃希菌对青霉素类、喹诺酮类药物和氨曲南的耐药性明显增高,亚胺培南和美罗培南是大肠埃希菌感染患者的首选药物;经ESBLs确证试验,ESBLs阳性率为28．60％（22／77）;产ESBLs大肠埃希菌经PFGE指纹图谱分析,除第62株和第70株相似性系数为78．27％外,其余相似度均低于70．0％;ESBLs大肠埃希菌阴性株中除少数几对菌株相似性系数较高外,其余呈散在分布,且电泳带存有6条以上的不同条带,为流行病学无关的不同克隆。结论 大肠埃希菌对常用抗生索耐药性明显增高,且呈多重耐药趋势;该研究尚不能证明存在大肠埃希菌爆发性流行感染,提示可能存在院内感染大肠埃希菌的优势克隆;PFGE基因分型方法是耐药性与流行状况分析的有效手段。     

内蒙古地区临床危重患者三种常见感染细菌耐药基因的检测及耐药性分析

目的:探讨内蒙古地区临床危重患者常见感染细菌耐药基因的检测及耐药性相关因素,以便临床合理运用抗菌药物,为病原菌感染的预防和控制提供依据。方法:选取2010年1月至2013年1月在我院重症监护室治疗的病例中检测出的215株细菌为研究对象,运用相关的检测手段分析细菌的耐药性和耐药基因情况。结果:经过临床的检测后得出大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍氏不动杆菌分别为85株、55株和75株,其中产ESBLs大肠埃希菌54株,非产ESBLs大肠埃希菌31株;产ESBLs肺炎克雷伯菌15株,非产ESBLs肺炎克雷伯菌40株。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍氏不动杆菌对美罗培南、亚胺培南的敏感性最高,且在产与非产ESBLs菌株耐药上比较有差异性(P0.05);产与非产ESBLs菌株耐药基因检测方面比较无明显差异性(P0.05)。结论:大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍氏不动杆菌均存在多重耐药情况,且耐药与喹诺酮耐药机制有一定的相关性。     

血流感染患者大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶及耐药性分析

目的分析血流感染患者大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶（Extended—Spectrum Beta Lactamases,ESBLs）的现状及其耐药特征,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法对浙江省上虞市人民医院2011年1月至2012年12月住院患者血培养分离的96株大肠埃希菌,采用纸片扩散表型确证试验进行ESBLs检测,用K．B法做药敏试验。结果血培养的大肠埃希菌分离率2011年、2012年分别为19．48％、17．47％。大肠埃希菌产ESBLs的检出率2011年、2012年分别为60．00％、60．78％。产ESBLs菌株对多种抗菌药物的耐药率显著高于不产ESBLs菌株。无论大肠埃希菌是否产ESBLs,碳青霉烯类抗生素均具有很高的敏感率。结论血流感染患者分离的大肠埃希菌产ESBLs比率高,产ESBLs菌株对多种抗菌药物耐药性高。可经验性使用碳青霉烯类抗生素治疗大肠埃希菌所致的血流感染。     

临沂市肉鸡致病性大肠埃希菌的分离鉴定及耐药性研究

目的查清临沂市肉鸡大肠埃希菌的优势血清型及耐药情况,为研制疫苗和科学防治本病提供依据。方法对病料进行细菌分离培养,应用形态学检查、生化试验、致病性试验和血清学试验对大肠埃希菌及其血清型进行鉴定,通过药敏试验研究其耐药性。结果从365份病料中,分离出大肠埃希菌311株,分离率为85.2%。优势血清型为O78、O1、O11、O18、O15和O2;对链霉素、氨苄西林、利福平、庆大霉素、恩诺沙星、环丙沙星和左氧氟沙星等药物表现出很高的耐药性,耐药率分别为98.0%、87.3%、86.0%、77.3%、73.4%、70.0%和64.6%,而对大观霉素、头孢噻呋、多黏菌素、氟苯尼考和痢菌净高敏。结论临沂市肉鸡大肠埃希菌的优势血清型有O78、O1、O11、O18、O15和O2,分离菌株对大部分抗菌药物产生耐药性。因此,治疗鸡大肠埃希菌病应通过药敏试验,合理地选择药物。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs检测及耐药性分析

由细菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）引起的细菌耐药性一直是临床相关感染性疾病治疗中的棘手问题。从不同病区患者标本中分离了96株大肠埃希菌和80株肺炎克雷伯菌,分剐采用双纸片协同试验和药物敏感试验检测了上述菌株产生ESBLs情况及对17种抗生素的耐药性。结果发现,27．1％（26／96）的大肠埃希菌株和22．5％（18／80）肺炎克雷伯菌株产ESBLs。ICU病房分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌株ESBLs总阳性率（46．0％）与介入科病房和烧伤科病房分离菌株ESBLs总阳性率（28．6％和25．0％）无显著性差异（P〉0．05）,但明显高于呼吸科、骨科、其他病房及门诊部分离菌株ESBLs总阳性率（6．3％～14．3％,P〈0．01）。不产ESBLs大肠埃希菌株和肺炎克雷伯菌株对17种抗生素耐药率明显低于产ESBLs菌株。产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对氨曲南均敏感,对氨苄西林／舒巴坦、阿莫西林／棒酸、阿米卡星耐药率仅为15．8％-23．4％。上述实验结果提示,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床菌株中有较高的ESBLs阳性率,不同病区患者感染的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs阳性率有很大差异,氨曲南、氨苄西林／舒巴坦、阿莫西林／棒酸、阿米卡星可作为治疗产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌感染性疾病的首选药物。     

泌尿道感染大肠埃希菌耐药性分析

目的了解医院泌尿道感染大肠埃希菌产ESBLs的发生率和耐药情况。方法据NCCLS文件,产ESBLs细菌的检测用双纸片确认法。抗生素敏感测定采用K—B琼脂扩散法。结果在检出的176株大肠埃希菌中．ESBLs阳性的菌株有53例,ESBLs检出率为30．1％。检出的产ESBLs细菌对所有青霉素类抗生素产生耐药,产ESBLs对3代头孢类抗生紊头孢曲松、头孢噻肟的耐药率〉81％,对磺胺类、喹诺酮类也在71％以上。对亚胺培南全部敏感。结论医院泌尿道大肠埃希菌产ESBLs发生率较高,且对多种抗生素呈交叉耐药和多重耐药．应做好常规检测和监测．指导临床合理使用抗生素。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药性检测

目的 了解临床分离产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌对喹诺酮类等抗菌药物的耐药性。方法 NCCLS表型确证试验（纸片增强法）检测出临床分离大肠埃希菌中产ESBLs菌株,琼脂稀释法测定产ESBLs菌株对喹诺酮类等抗菌药物的耐药性。结果 临床分离大肠埃希菌中产ESBLs菌株的检出率为40．2％（92／229）,产ESBLs菌株以尿标本多见,对6种喹诺酮类抗菌药物的耐药率均在89％以上,哌拉西林的耐药率为100％;对头孢噻肟、头孢他啶和哌拉西林-三唑巴坦的耐药率分别为77．2％、1．1％和21．7％,对亚胺培南极其敏感,耐药率为0％。结论 产ESBLs大肠埃希菌发生率较高,对喹诺酮类抗菌药物耐药显著,临床应加强检测和监测。     

社区与医院感染中肺炎克雷伯杆菌和大肠埃希菌耐药性分析

目的探讨社区和医院感染中肺炎克雷伯杆菌和大肠埃希菌产ESBLs的情况及耐药特性。方法采用体外扩散确证试验检测ESBLs,同时用Micro scan wat RA way-40系统全自动细菌鉴定/药敏分析仪及K-B琼脂扩散法进行细菌鉴定和体外药敏试验。结果社区感染标本中分离出肺炎克雷伯杆菌79株,产ESBLs20株,阳性率为25.3%,大肠埃希菌177株,产ESBLs27株,阳性率为15.3%;医院感染标本中分离出肺炎克雷伯杆菌82株,产ES-BLs33株,阳性率为40.2%,大肠埃希菌135株,产ESBLs42株,阳性率为31.1%,社区与医院感染菌株产ESBLs比较差异均有统计学意义(P均<0.05);ESBLs阳性菌株对多种抗生素耐药,其耐药性明显高于ESBLs阴性菌株。结论肺炎克雷伯杆菌和大肠埃希菌产ESBLs菌株在临床分离率较高,医院感染标本要显著高于社区感染标本,并且对多种抗生素具有高度耐药性,产ESBLs菌株耐药性显著高于不产ESBLs菌株,临床上应加强对ESBLs的控制,以防感染流行。     

佳木斯地区女性泌尿系统感染大肠埃希菌耐药性分析

目的分析女性患者泌尿系统感染大肠埃希菌的耐药性,为临床合理使用抗生素提供依据。方法采用全自动微生物鉴定系统对女性泌尿系统感染患者分离出的病原菌进行鉴定和药敏分析。结果大肠埃希菌非产ESBLs株对氨苄西林、第一、二代头孢菌素类药品高度耐药。大肠埃希菌非产ESBLs株对碳青霉烯类药物美罗培南无耐药,对第三代头孢菌素敏感率高,耐药率低。产ESBLs大肠埃希菌,仅碳青霉烯类抗生素美罗培南敏感。结论女性泌尿系统感染大肠埃希菌的多重耐药性日趋严重,需加强对抗生素使用的规范化管理,合理使用抗菌药物,控制耐药菌的传播和流行。     

禽源致病性大肠埃希菌的耐药性与中草药有效成分的抑菌活性测定

以28株合肥地区禽源致病性大肠埃希菌为实验材料,采用K-B纸片琼脂扩散法检测禽源致病性大肠埃希菌的耐药情况。同时采用平板打孔法测定盐酸小檗碱、绿原酸、靛玉红和丹参酮ⅡA 4种中草药有效成分的抑菌活性。结果表明,28株禽源致病性大肠埃希菌对17种抗菌药物均呈现不同程度的耐药性,对β-内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类和喹诺酮类抗菌药物的耐药率分别介于0%～92.86%、14.29%～50.00%、78.57%～100%和57.14%～71.43%。中草药有效成分盐酸小檗碱和丹参酮ⅡA对大肠埃希菌具有较好的抑制活性,抑菌率分别为92.86%（26/28）和89.29%（25/28）。     

外科手术切口感染大肠埃希菌的耐药性分析

目的分析外科手术切口中大肠埃希菌的感染率及耐药性,为临床合理用药提供科学依据。方法对2009年6月至2010年9月外科患者手术切口标本中分离的大肠埃希菌耐药情况进行分析,并对产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株进行表型确证试验。结果 140株大肠埃希菌中,产ESBLs菌株的检出率为42.14%;产ESBLs菌株对一～四代头孢菌素、广谱青霉素、氟哇诺酮类及氨基糖苷类抗菌药物具有较高的耐药率;非产ESBLs菌株对青霉素类以外的抗菌药物具有较高的敏感率;产ESBLs菌株对大多数抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs菌株（P〈0.05）。结论外科手术切口术后大肠埃希菌的感染较严重,且产ESBLs菌株多药耐药明显,临床应加强监测与控制。     

The effect of the management of calves on the prevalence of antibiotic-resistant strains of Escherichia coli in their faeces

Escherichia coli isolated from six calves, in two groups of three which were managed differently and which received no antibiotics, were differentiated into strains on the basis of O serotype, biotype and resistance pattern. Keeping the calves in the maternal environment for 10, rather than 4 d, was associated with a delay in the time taken for strains of E. coli resistant to antibacterial agents to outnumber, in the faeces, those that were sensitive. These findings indicate that the prevalence of resistant E. coli strains in the intestinal microbiota reflect, in part, their prevalence in the environment and that their level may be influenced by the management of the animal.     

新生儿医院感染产超广谱β-内酰胺酶细菌流行状况及耐药性分析

目的了解新生儿医院感染中产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）细菌流行状况及耐药性,为预防和控制感染提供依据。方法对2011年1月至2013年12月间新生儿医院感染病原菌分布及耐药性进行回顾性分析;用VITEK-2 Compact微生物鉴定系统鉴定菌种和药敏试验。结果共检出病原菌192株,105株为肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌,占54.7%;检出产ESBLs菌58株,全部来自肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌;产ESBLs菌对青霉素类、头孢菌素类、单内酰环类抗菌药物高度耐药,耐药率〉80.0%,对头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦耐药率较低,耐药率〈20.0%,未检测到亚胺培南和美罗培南耐药株。结论产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌是新生儿医院感染中主要的病原菌,且对常用抗菌药物耐药率较高,临床应加强病原菌的耐药性监测,合理使用抗菌药物。     

山东省某地区奶牛源大肠埃希菌的血清型、耐药特性及分子特性

【目的】旨在对从山东省某地区4个健康奶牛养殖场分离到的大肠埃希菌进行优势血清型、耐药特性、Ⅰ类整合子基因盒携带情况以及系统进化群分析。【方法】采集194份来自山东省某地区4个规模化奶牛场奶牛新鲜粪便样品,进行大肠埃希菌分离和鉴定,利用常用大肠埃希菌诊断血清进行血清型鉴定;利用10%的绵羊血平板检测溶血性;利用K-B法检测对14种常规抗菌药物的敏感性;利用聚合酶链式反应(PCR)检测革兰阴性菌常见的6大类24种耐药基因、Ⅰ类整合子基因盒结构并对目的条带测序分析;利用细菌多位点序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)技术分析大肠埃希菌的ST型并使用eBURST v3软件分析菌株之间的克隆关系。【结果】从194份新鲜粪便样品中分离到171株大肠埃希菌,其中主要为致病性(19.9%)和侵袭性大肠埃希菌(17.0%),优势血清型分别为O128:K67(12/171)和O143:K7(12/171)。另外,具有溶血性的大肠埃希菌阳性率为9.4%(16/171);药敏试验结果显示多重耐药菌株的比率为22.2%,其中对氨苄西林耐药率最高为33.9%,四环素次之,为24.0%;PCR检测耐药基因和整合子结果显示,59.1%的菌株携带β-内酰胺类耐药基因blaTEM,59.1%的菌株携带氨基糖苷类耐药基因ant(2′),未检测到四环素耐药基因tetA和tetB;Ⅰ类整合子的阳性率为4.1%(7/171),dfrA12-aadA2-sul1为优势基因盒结构(4/171);MLST将大肠埃希菌分为8种ST型,其中,ST155(10/171)和ST58(45/171)形成一个克隆复合物且没有发现新的ST型。【结论】本研究证实,从该地区规模化健康奶牛场新鲜粪便中分离到的大肠埃希菌优势血清型为O128:K67和O143:K7;少部分大肠埃希菌具有溶血性;仅对氨苄西林、四环素等具有较高的耐药率;优势基因盒结构为dfrA12-aadA2-sul1;MLST分型显示不同奶牛场分离出亲缘关系较近的菌株,其分布具有多态性,血清型与ST型之间无相关性。本研究表明源自表观健康的奶牛的大肠埃希菌存在多重耐药现象,具有食品公共卫生安全隐患,该研究对于提升规模化奶牛场奶制品的安全生产与质量评估具有一定的理论指导意义。     

尿路感染相关病原菌的分布及耐药性分析

目的调查尿路感染病原菌的分布和耐药特点,为临床的抗感染治疗提供依据。方法收集2013年至2015年荆州市中心医院门诊和住院患者中,尿路感染患者送检的尿培养和血培养标本中检出的病原菌,采用Vitek2 Compact全自动微生物检测仪进行细菌鉴定,采用纸片扩散法和仪器法分别对革兰阴性杆菌和革兰阳性球菌进行药敏试验,药敏结果的判断依照CLSI M100-S24标准。数据分析采用WHONET5.6和SPSS 19.0软件,统计分析采用x~2检验。结果从尿路感染患者送检的标本中共检出各类非重复病原菌2 306株,其中门诊患者中检出19种100株,住院患者检出56种2 206株。导致尿路感染最多的两种病原菌为大肠埃希菌和粪肠球菌,分别检出1 241株和232株。导致尿脓毒血症最多的两种病原菌为大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,分别检出36株和10株。大肠埃希菌产ESBL.s率达67.9%,其对多种抗菌药物的耐药性均高于60.0%。粪肠球菌对大多数抗菌药物的耐药性均高于50.0%,仅对呋喃妥因和高浓度链霉素的耐药性较低,分别为12.0%和38.7%;未检出对万古霉素、利奈唑胺和替加环素耐药的粪肠球菌。结论导致尿路感染的病原菌种类繁多,大肠埃希菌和粪肠球菌是主要病原菌,其耐药情况严重;为保证治疗的有效性,临床医生应注重相关病原学和药敏检查结果。     

抑制差减杂交筛选禽致病性大肠杆菌基因组差异片段及其分析

采用抑制差减杂交技术(Suppression subtractive hybridization,SSH)对禽致病性大肠杆菌E037株(血清型O78)与非致病菌株K-12MG1655以及同一O2血清型高致病菌株E058与低致病菌株E526进行基因组差异片段克隆与分析。从E037株中共检出17个特异性差异片段,E058株中共检出32个特异性差异片段。经同源分析,这些序列可分为4类:质粒相关序列、噬菌体相关序列、已知功能序列、未知功能序列。这些差异片段包含许多重要的大肠杆菌毒力相关基因,如大肠杆菌素、气杆菌素受体、铁基因簇等。49个片段中,14个片段与其它微生物基因组同源性较高。结果表明,大肠杆菌高致病株与低致病菌株或非致病菌株基因组间存在较多差异基因,其中包括毒力、毒力相关基因、代谢以及噬菌体等基因成分。     

临床分离的革兰阴性细菌的耐药谱及耐药机制的研究

目的 了解前临床上分离G^－细菌的药敏状况和耐药机制及提供合理使用抗生素的依据。方法 主要使用MICROSCAN WALKAWAY／－40全自动微生物分析仪对1999年3月－2000年3月全院住院病人的尿、痰、腹水、脓液、创面、前列腺液、血液等培养呈阳性的标本进行细菌鉴定和药敏试验,结果共检出G^-菌1152株包括27个菌属80个菌种,觉细菌是大肠埃希菌（16.1％）、铜绿假单胞菌（6.5％）、肺炎克雷伯菌（5.3％）等。G^-杆菌（除不动杆菌外）对第三代头孢霉素敏感率已降到（3.0%-76.1%)、对亚胺培南（80.7%-92%)、头孢哌酮／舒巴坦（58.8％－100％）、阿米卡星（41.4%-93.2%)、环丙沙星（30.5％－67.3％）较敏感;对第三代头孢霉素产生超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）,肺炎克雷伯菌高达35.0%-36.9%,大肠5埃希菌达21.8％－23％。对常用β-内酰胺类抗生素产诱导酶（IB）,铜绿假单胸菌高达51％－60.9％,弗劳地枸橼酸菌达4.5％－63.6％,阴沟肠杆菌达8.7%-35.3％。结论 目前G^－杆菌对β-内酰胺类抗生素药的主要机制是产生ESBLs和IB0G^-杆菌引起的感染首选亚胺培南单用或第三代浆孢霉素复合制剂（头孢哌酮／舒巴坦）联合阿米卡星或氟喹酮类,第三代头孢霉素除非药敏提示否则不宜选用。     

1939株革兰阴性杆菌的耐药监测分析

目的 了解广州华侨医院2007年至2009年分离的1 939株革兰阴性杆菌的耐药状况,为临床合理使用抗生素提供依据.方法 利用梅里埃VITEK-2 Compact微生物分析仪鉴定细菌,K-B法进行药敏试验,采用WHONET 5.4 软件统计分析药敏结果.结果 2007年至2009年分离出的革兰阴性杆菌1 939株,居前...