蔗糖与肌醇对马尾松胚性细胞系增殖的影响

针对马尾松胚性细胞系增殖困难的问题, 本研究设定了2因素3水平的处理, 分析了增殖培养基中蔗糖与肌醇对马尾松胚性细胞系增殖的影响。研究结果表明, 胚性培养物的增殖倍数在9个处理间存在极显著性差异（P〈0.01）, 并初步选出马尾松胚性细胞系增殖倍数较高的3个培养基： 5号（蔗糖20 g·L-1＋肌醇1.0 g·L-1）、7号（蔗糖30 g·L-1＋肌醇0.1 g·L-1）和8号（蔗糖30 g·L-1＋肌醇1.0 g·L-1）。胚性细胞在以上3个培养基具有不同分化发育反应, 其中培养基5号中, 培养基胚性细胞发育较慢; 培养基7号中, 胚性细胞发育较快且能形成具有完整结构的正常早期体细胞胚; 在培养基8号中, 胚性细胞易分化形成结构不完整、形态不正常的早期体细胞胚。综合考虑胚性细胞系增殖倍数与胚性细胞分化发育两方面的因素, 在增殖培养基中添加蔗糖30 g·L-1和肌醇0.1 g·L-1的组合更适合马尾松胚性细胞系的增殖。     

谷子胚性细胞系的超低温冰冻保存

超低温冰冻保存是保存生物材料的一种方法。目前禾本科植物原生质体培养的主要问题之一是胚性细胞系的状态不稳定。试验比较了影响谷子(Setaria italica(L.)Beauv)胚性细胞系超低温冰冻保存的因素如：不同的冰冻保护液组成,不同培养时间的胚性细胞系以及细胞系的恢复生长和原生质体培养。结果表明：本实验采用超低温冰冻保存方法不会影响胚性细胞系原生质体的培养特性,能够保持或提高原生质体培养的植板率。     

用显微光度图像分析系统研究谷子胚性细胞系的GDH细胞类型分布

由显微光度图像分析与细胞化学技术对不同实验材料和不同培养时期谷子胚性细胞系的谷氨酸脱氢酶细胞类型分布表明：从单细胞群体水平研究胚性细胞系可以比较准确地了解其所处的生理状态；胚性细胞系的细胞类型分布可以作为其是否适于原生质体培养的指标之一；细胞类型分布也适用于组织培养和原生质体培养一些问题的研究。     

继代十七年的玉米花粉胚性细胞系的异常核和异常分裂观察

对继代１７年的玉米花粉胚性细胞系核形态和细胞分裂情况进行了观察分析,结果表明：随着继代培养时间的延长,异形核比率增加,异形核类型和异常分裂增多。分析认为异形核和异常分裂现象出现和增多是导致胚性细胞系分化率降低异形分化和非整倍体细胞产生的主要原因。并提出来自玉米农家种“八趟白”的部分胚性细胞系能长期保持倍性稳定和胚胎发生并再生,与不断挑选和继代培养中不加２,４－Ｄ有关。     

小麦胚性悬浮系与原生质体植株再生

普通小麦(Triticum aestivum)昌乐5号(冬性)胚性悬浮细胞系的组成成分对原生质体再生频率发生影响,此种悬浮系是由混合型愈伤组织建立起来的,建成的悬浮系中含有2—3mm的小愈伤组织和分散好的几十至上百个细胞的细胞团。分别用悬浮系中的小愈伤组织和细胞团分离原生质体进行培养。结果表明．由小愈伤组织来源的原生质体再生植株的频率显著高于由细胞团分离的原生质体的再生频率。培养基中不同成分对原生质体分裂的影响也作丁研究。     

亚麻胚性细胞悬浮培养体系的建立和影响因素

亚麻品种‘双亚五号’的胚性愈伤组织诱导最佳培养基为MB（MS无机盐加B5维生素）＋1.0mg·L^-12,4-D;细胞初始悬浮培养的最佳培养基为MB＋0.2mg·L-16-BA;细胞继代悬浮培养的最佳培养基为改良的MB（NH4NO3减半,KNO3加倍）＋0.02mg·L^-12,4-D＋0.2mg·L^-16-BA;适宜的蔗糖量为50g·L^-1;适宜的继代接种量为1.0～1.5g·（25mL）^-1;继代间隔为5～7d。     

继代十七年的玉米花粉胚性细胞系的异常核和异常分裂观察

对继代17年的玉米花粉胚性细胞系核形态和细胞分裂情况进行了观察分析,结果表明:随着继代培养时间的延长,异形核细胞比率增加,异形核类型和异常分裂增多。分析认为异形核和异常分裂现象出现和增多是导致胚性细胞系分化率降低、异形分化和非整倍体细胞产生的主要原因。并提出来自玉米农家种“八趟白”的部分胚性细胞系能长期保持倍性稳定和胚胎发生并再生,与不断挑选和继代培养中不加2,4-D有关。     

用显微光度图像分析系统研究谷子胚性细胞系的GDH细胞类型分布

由显微光度图像分析与细胞化学技术对不同实验材料和不同培养时期谷子胚性细胞系的谷氨酸脱氢酶（ＧＤＨ）细胞类型分布表明：从单细胞群体水平（细胞类型分布）研究胚性细胞系可以比较准确地了解其所处的生理状态;胚性细胞系的细胞类型分布可以作为其是否适于原生质体培养的指标之一;细胞类型分布也适用于组织培养和原生质体培养一些问题的研究。     

茉莉酸甲酯对中国红豆杉胚性细胞紫杉醇生物合成的影响

紫杉醇(taxol)是一种复杂的二萜类生物碱,最初是从红豆杉类(Taxus)植物的树皮中分离出来的。紫杉醇作为具有广谱抗肿瘤活性的药物而得到广泛的临床应用,成为当今世界上有效的抗癌药物之一,但其天然资源十分稀少,解决其药源问题就显得非常重要。目前,普遍认为采用红豆杉细胞悬浮培养生产紫杉醇是很有希望的途径之一。而提高红豆杉细胞生长速率以及细胞中紫杉醇的含量是实现细胞悬浮培养生产紫杉醇的两个关键因素,笔者研究了茉莉酸甲酯(methyl-jasmonate,简称MJ)在红豆杉细胞培养中的代谢调节作用。茉莉酸甲酯是茉莉属(Jasminum)中的素馨花…     

继代培养的玉米花粉胚性细胞系的倍性及其染色体上组成异染色质变异

来源于八趟白的细胞系No.1,经过六年半继代培养,显示出随着继代培养时间的延长,染色体数目变异的频率减低,其单倍性愈趋稳定。尽管继代培养时间的延长并不影响这个细胞系倍性的稳定性,但却能引起单倍体细胞中第4和第9染色体上的组成异染色质发生显著变异。     

马唐胚性与非胚性愈伤组织生理差异的初步研究

马唐幼穗的胚性愈伤组织中游离氨基酸含量与种类均少于非胚性愈伤组织,而可溶性蛋白质含量却高于后者;前者可溶性蛋白质、过氧化物酶、酯酶及淀粉酶的同工酶电泳谱带亦此后者多。     

高羊茅胚性悬浮细胞系的快速建立及其单细胞培养

本研究采用高羊茅(Millennium和Hundog Ⅴ)成熟种子为材料,以MS为基本培养基,通过添加2.5 mg/L CuSO4·5H2O,或提高NH4NO3浓度至2.5 g/L等措施均能明显提高愈伤组织的质量,经过3～5个月的筛选获得疏松干燥、颗粒状、生长旺盛、适合悬浮培养的Ⅱ型胚性愈伤组织.悬浮培养初期需用MSⅠ液体培养基进行一个月的启动培养,之后转用MSⅡ继代保持,约2个月左右即建立起来自高羊茅2个品种的3个悬浮细胞系.生长特性测定结果表明,悬浮培养的初始接种量以1.0～3.0 ml/40 ml为宜,生长周期内其pH值不断波动变化,最适范围在5.0～5.7之间.5～8 d为悬浮系的对数生长期,此时细胞分裂旺盛,增殖较快,是分离单细胞的最佳时期.单细胞培养方式以悬浮培养效果最好.     

继代培养十年后玉米单倍性胚性细胞系的倍性和再生

本文观察了玉米单倍性胚性细胞无性系在继代培养十年中的分化再生能力，测定了十年后的染色体倍性，并用t测验和相关系数进行统计分析。结果表明，继代培养十年后，细胞系分化再生能力在不同年度间无显著变化，基本保持稳定。单倍体细胞的数量略有下降，但仍占大多数。它们的优势比例以及加倍单倍体细胞系中二倍体细胞所占的优势比例与细胞系的分化再生能力无明显相关。亚单倍体细胞尚未见到，但出现了一定数量的多倍体细胞，他们与非整倍体细胞所占的比例与细胞系分化率之间的相关系数为-0.786，呈弱负相关，及他们数量的增加对细胞系的分化能力有一定影响。     

继代培养十年后玉米单倍性胚性细胞系的倍性和再生

本文观察了玉米单倍性胚性细胞无性系在继代培养十年中的分化再生能力,测定了十年后的染色体倍性,并用t测验和相关系数进行统计分析。结果表明,继代培养十年后,细胞系分化再生能力在不同年度间无显著变化,基本保持稳定。单倍体细胞的数量略有下降,但仍占大多数。它们的优势比例以及加倍单倍体细胞系中二倍体细胞所占的优势比例与细胞系的分化再生能力无明显相关。亚单倍体细胞尚未见到,但出现了一定数量的多倍体细胞,他们与非整倍体细胞所占的比例与细胞系分化率之间的相关系数为-0.786,呈弱负相关,及他们数量的增加对细胞系的分化能力有一定影响。     

早期猪胚表达其胚源性基因及时间的特异性

台湾大学农学院畜产学系(所)科研人员对早期猪胚表达其胚源性基因及时间的特异性作了研究,发现多数哺乳动物卵母细胞在成熟过程中,虽可合成大量讯息核糖核酸,以提供胚在早期发育所需,但随着胚发育的进展,这些卵源性的讯息核糖核酸的质与量均有逐渐降解和减少的趋势,同时胚源性基因组的基因则开     

海边香豌豆胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚发生

将生长１４ｄ的海边香豌豆（Ｌａｔｈｙｒｕｓ ｍａｒｉｔｉｍｕｓ（Ｌ．）Ｂｉｇｅｌ）无菌苗下胚轴切成０．５ｃｍ左右的片段,置于含有１ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ,０．５ｍｇ／Ｌ ＢＡ和０．５％ＮａＣｌ的ＭＳ培养基中,２８ｄ后诱导出胚性愈伤组织。将其转入含有适当浓度２,４－Ｄ的ＭＳ培养基上,又２８ｄ后可得到大量球形胚和心形胚以及极少量鱼雷胚和子叶胚。诱导体细胞胚适合的２,４－Ｄ浓度为０．５ｍｇ／Ｌ。较高浓度的２     

杉木未成熟胚胚性愈伤组织诱导影响因素探析

该研究从基因型、6-BA浓度、外植体接种方式和合子胚发育阶段等方面,分析杉木未成熟胚胚性愈伤组织诱导的影响因素。结果表明:基因型、6-BA浓度、外植体接种方式和合子胚发育阶段均对胚性愈伤组织诱导频率有不同程度影响。6种基因型中,有3种基因型诱导出胚性愈伤组织,其中基因型S18胚性愈伤组织诱导频率最高,为11.7%。6-BA浓度在1.0~1.5 mg·L~(-1)范围内时,基因型S18的胚性组织诱导频率较高。以在去皮种子的一端切开一个小口的接种方式为最优,将合子胚剥出的方式易造成合子胚褐化死亡,将未剥皮的种子切开一个小口后直接接入培养基的方式不利于愈伤组织生成。适合胚性愈伤组织诱导的合子胚发育阶段为受精至胚器官分化阶段,合子胚进入成熟阶段后不利于胚性愈伤组织诱导,合子胚易生长成完整植株。     

胡萝卜(Daucus carota L.)胚性细胞蛋白的分离研究

应用IEF/SDS-PAGE双向电泳技术,比较了胡萝卜胚性细胞、非胚性细胞和不同发育时期的胚状体中可溶性蛋白的双向电泳图谱,结果发现在胚性细胞中特异存在的胚性细胞蛋白在不同发育时期的胚状体中也存在,但在非胚性细胞中不存在。因此,推测体细胞胚胎发生所需的一些基因在胚性细胞中就早已表达了。我们还成功地分离和测定了ECP 45-2 N-末端和中央部分氨基酸序列。与已知氨基酸序列相比,ECP 45-2部分氨基酸序列与ECP 45-1 部分氨基酸序列具有较高比例的同源性。因此, ECP 45-1和45-2可能属于同一因基家族。     

二棱大麦体细胞胚性无性系的建立

对１２个品种的二棱大麦（Ｈｏｒｄｅｕｍｄｉｓｔｉｃｈｕｍ２ｎ＝２４）幼穗和６个品种的幼胚在附加５００ｍｇ／Ｌ酪蛋白,１５０ｍｇ／Ｌ天门冬素和２ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ的ＭＳ培养基（Ｍ＿（３２０））中进行了离体培养,并诱导产生出了愈伤组织。把由Ｄ＿１幼胚所获得的愈伤组织转移到含２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ（Ｍ＿（３０５））培养基中后诱导产生出了体细胞胚性愈伤组织,幼苗和根。筛选出了体细胞胚性无性系。在长达二年的继代培养中,该细胞系仍保持旺盛的再生和分化成苗能力。