HPV-16/18血清中和抗体阳性率及其与宫颈病变相关性研究

高危型人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)持续感染可导致癌前病变,以HPV-16/HPV-18型感染最为常见,但HPV感染所产生的中和抗体(Neutralizing Antibody,nAb)对宫颈癌及癌前病变的相关关系尚不明确.本研究旨在探索HPV-16/HPV-18在不同的中和抗体与DNA感染状态下的年龄分布及其和宫颈组织学病变的相关性.通过横断面研究,本研究于2012年11月至2013年4月招募7372名18～45岁健康女性.收集每个受试者血清用假病毒中和抗体定性检测HPV-16和HPV-18中和抗体;采集宫颈细胞学样本用于液基细胞学诊断,并用HPV SPF10 PCR-DEIA-LiPA25分型检测系统及HPV-16/HPV-18型特异性DNA酶联免疫测定法联合检测HPV-16/HPV-18 DNA;召回细胞学异常的受试者在阴道镜下采集组织学标本进行病理诊断.结果 显示,HPV-16和HPV-18中和抗体(nAb)阳性率为12.56％,4.94％,DNA阳性率为2.69％和0.92％,nAb与DNA的一致率较低.HPV-16和HPV-18DNA-/nAb+人群在27～45岁的大龄组女性中比例均高于18～26岁女性.DNA+/nAb+和DNA+/nAb-人群在18～26岁和27～45岁年龄组中比例无统计学差异.多因素分析结果显示,与DNA-/nAb-人群相比,HPV-16 DNA +/nAb-人群发生宫颈高度病变CIN2+的风险较高,而DNA+/nAb+则风险更高,调整OR分别为33.80 (95％CI:16.50～69.23)和63.86 (95％CI:36.57～111.52);HPV-18呈现相同的规律,调整OR分别为5.39 (95％CI:1.14～25.56)和7.83 (1.61～38.14).HPV-16或HPV-18 DNA阳性的女性是宫颈组织学病变的高危人群,而若DNA阳性伴有同型抗体阳性的人群则风险更高,这对于探究宫颈病变的自然发病机理具有一定意义.     

河北省石家庄市手足口病流行中健康人肠道病毒带毒情况及病原分析

为了解河北省石家庄市健康儿童中肠道病毒带毒情况及血清型构成,对2010~2012年石家庄市的3个县区1 223例0~6岁的健康儿童及406名监护人(健康成人)采集咽拭子和粪便标本进行核酸检测鉴定肠道病毒血清型,并进行分子流行病学分析,为肠道病毒感染相关疾病的防控和治疗提供基础资料。1 223名健康儿童的标本检测结果中,肠道病毒(Enterovirus,EV)阳性的283例,阳性率为23.14%(283/1 223)。其中,以非肠道病毒71型非柯萨奇病毒A组16型的EV(Other-Enterovirus,other-EVs)阳性为主,占EV阳性的62%(175/283),而引起手足口病常见的EV病原体肠道病毒71型(Enterovirus A71,EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CVA16)阳性率较低,分别占19%(55/283)和18%(51/283);将结果为other-EVs阳性的175名健康儿童的标本全部进行病毒分离鉴定,共分离到25株病毒,分离率为14.29%(25/175),其中柯萨奇病毒B组5型(Coxsackievirus B5,CVB5)分离率最高,为40%(10/25)、柯萨奇病毒B组13型(Coxsackievirus B3,CVB3)分离率为24%(6/25)、埃可病毒21型(Enteric cytopathic human orphan virus 21,ECHO21)分离率为16%(4/25)、其他EV株分离率为20%(5/25)。提示,应加强对CVB3和CVB5等other-EVs的监测。     

HPV-16、EB病毒对细胞增殖的影响及与子宫颈癌发病的关系

目的 了解宫颈癌患者人乳头瘤病毒16（HPV 16）、EB病毒（EBV）感染情况,探讨HPV-16、EBV对细胞核增殖性抗原（PCNA）表达的影响及在子宫颈癌发病中的意义。方法 免疫组织化学SP法检测59例宫颈癌和20例非癌性子宫颈上皮细胞中HPV-16、EBV蛋白表达和PCNA表达的情况,并分析它们的表达与病理参数的关系。结果 子宫颈癌和非癌性子宫颈上皮细胞中HPV-16、EBV及PCNA的阳性表达率依次分别为69．49％、57．63％及77．97％和30％、25％及15％;子宫颈癌和非癌性子宫颈上皮细胞中HPV-16、EBV的共同阳性表达率分别为35．59％和0％,子宫颈癌中HPV-16、EBV及PCNA的阳性表达率均高于非癌性子宫颈上皮（P〈0．05）。病理Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级子宫颈癌中HPV-16、EBV、PCNA的阳性表达率分别为65．00％、55．00％、60．00％,69．57％、60．87％、82．61％和75．OO％、56．25％、93．75％。各级子宫颈癌间HPV-16、EBV的阳性表达率差异无显著性,但PCNA的表达率随病理分级的增加显著上升（P〈0．05）。不同期别子宫颈癌问HPV-16、EBV及PCNA的阳性表达率差异无显著性。HPV-16阳性与阴性组子宫颈上皮PCNA的阳性表达率分别为82．98％（39／47）与43．75％（14／32）,两者差异有显著性（P〈0．05）。EBV阳性及阴性组子宫颈上皮PCNA的阳性表达率分别为71．79％（28／39）及42．50％（17／40）,两者差异有显著性（P〈0．05）。HPV-16和EBV共同阳性表达的21例子宫颈癌PCNA阳性表达率均为100％。结论 HPV-16、EBV通过增加PCNA表达的促细胞增生作用可能是子宫颈癌的发生机制之一。     

宫颈癌中p53表达和病毒感染的研究

应用PCR对121例宫颈脱落细胞和组织分别检测HPV-16／18和HSV-2DNA。同时应用免疫组化S-P法检测76例宫颈组织中P53过度表达。结果发现,宫颈癌组织中HPV-16／18和HSV-2阳性率分别为61．3％和32．3％,慢性宫颈炎组HPV-16／18和HSV-2阳性率分别为22．5％和20．0％,与正常宫颈组比较均有显著性差异。宫颈癌中HPV-16／18和HSV-2混合感染率为16．1％。p53过度表达率在慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤变(CIN)、宫颈癌组织中呈梯度递增。另外,宫颈癌组织中P53过度表达与HPV-16／18、HSV-2的感染无相关性。提示：宫颈癌的发生与HPV-16／18关系密切,HSV-2可能与HPV-16／18协同作用导致宫颈癌的发生。宫颈组织中p53过度表达率与宫颈癌的进程有关,这在宫颈癌的防治方面有一定的临床意义。     

宫颈癌中p53表达和病毒感染的研究

应用PCR对121例宫颈脱落细胞和组织分别检测HPV-16/18和HSv-2 DNA.同时应用免疫组化S-P法检测76例宫颈组织中p53过度表达.结果发现,宫颈癌组织中HPV-16/18和HSv-2阳性率分别为61.3%和32.3%,慢性宫颈炎组HPV-16/18和HSV-2阳性率分别为22.5%和20.0%,与正常宫颈组比较均有显著性差异.宫颈癌中HPV-16/18和HSV-2混合感染率为16.1%.p53过度表达率在慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤变(CIN)、宫颈癌组织中呈梯度递增.另外,宫颈癌组织中p53过度表达与HPV-16/18、HSv-2的感染无相关性.提示宫颈癌的发生与HPV-16/18关系密切,HSV-2可能与HPV-16/18协同作用导致宫颈癌的发生.宫颈组织中p53过度表达率与宫颈癌的进程有关,这在宫颈癌的防治方面有一定的临床意义.     

高危型人乳头瘤病毒感染后TopoⅡα和p16INK4A蛋白的表达及诊断价值

目的 探讨高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染后TopoⅡα和p16INK4A在宫颈组织中的表达及其对癌前病变的诊断价值.方法 选取在温州医学院附属二院行宫颈病变诊治的患者135例,包括各级宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈鳞癌(SCC)的患者.随机选取同期就诊的慢性宫颈炎患者30例作为对照.运用第二代杂交捕获法(HC2)检测高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)的表达.活体提取组织,运用免疫组织化学法(SP法)检测宫颈组织中Topo Ⅱα和p16INK4A蛋白表达.结果 在HR-HPV阳性患者的宫颈组织中Topo Ⅱα和p16INK4A表达率高于HR-HPV阴性患者,差异有统计学意义.Topo Ⅱα和p16INK4A在正常宫颈上皮组织、各级CIN和SCC中的表达率逐渐增加,差异有统计学意义.p16INK4A用于筛查宫颈癌前病变(包括SCC)时阳性预测值99.3％.Topo Ⅱα用于筛查宫颈严重病变(CINⅢ和SCC)时阳性预测值67.9％.结论 HR-HPV感染后Topo Ⅱα和p16INK4A蛋白表达明显增高,并且Topo Ⅱα和p16INK4A蛋白表达率随着宫颈癌前病变的严重程度而上调,参与宫颈上皮的异常增殖和恶性转变.p16INK4A免疫组化检测提高了宫颈癌前病变筛查的特异性,Topo Ⅱα免疫组化检测提高了宫颈严重病变筛查的特异性,当Topo Ⅱα蛋白表达阳性,宫颈组织可能已发生不可逆性病变.     

小剂量干扰素对慢性乙型肝炎抗病毒治疗的追踪观察

本文对40例曾经小剂量干扰素治疗、疗程达6个月的慢性乙肝患者进行治后6～20个月的追踪观察。从HBV标志物阴转率来看,抗病毒远期疗效结果为HBeAg治前19例阳性中,12例阴转(63.1％),其中6例并出现抗-HBe转阳。DNA-P治前3例阳性中,2例阴转(66.6％)。HBcAg治前2例阳性者也阴转。HBV-DNA治前3例阳性者仅一例阴转。HBsAg 39例阳性中,7例阴转(17.9％)。其中HBeAg及DNA-p阴转率较突出,分别为63.1％及66.6％。再从抗病毒综合反应来看,远期总有效率达57.5％(23/40),其中3例在治后14、15及20个月观察时:HBsAg、HBeAg、HBcAg、DNA-P及HBV-DNA均阴性。对照组20例HBsAg、HBeAg及DNA-P阴转率分别为0％、22.2％及0％。可见并非自然阴转,而是药物作用所致。由此认为小剂量干扰素对抗慢性乙肝病毒远期疗效是可取的,值得深入研究。     

膦甲酸钠对宫颈高危HPV持续感染患者 病毒载量的影响

目的探讨抗病毒药物膦甲酸钠对宫颈高危型人乳头瘤病毒(HPV)持续感染患者的病毒载量及HPV转阴率的影响,指导临床实践。方法选择2015年1月至2015年6月112例宫颈高危型HPV持续感染患者为研究对象,在充分知情同意的前提下,患者自愿选择进入治疗组或观察组,治疗组患者随机分成膦甲酸钠组和干扰素组。最终分组情况为:观察组43例,膦甲酸钠组34例,干扰素组35例。观察组患者不采取任何干预措施仅随访观察,治疗组患者分别予以膦甲酸钠静脉滴注3.0 g/次,1次/d,连用14 d;重组人干扰素a2b肌肉注射300万U/次,隔日1次,总共10次。于治疗后第1、3、6个月采用二代杂交捕获术(HC-2)对患者进行HPV DNA半定量分析,比较各组患者病毒载量的变化及HPV转阴率。结果第1、3、6个月治疗组患者HPV病毒载量较治疗前明显下降,HPV转阴率显著高于观察组;膦甲酸钠组患者HPV病毒载量下降幅度显著大于干扰素组;观察组患者各时间点HPV病毒载量无明显变化。治疗后第1、3、6个月,膦甲酸钠组患者有效率分别为47.06%、61.76%、79.41%,均显著高于观察组及干扰素组(P0.01)。在随访过程中,观察组患者未发现HPV转阴病例,治疗组转阴率为30.04%,差异有统计学意义(P0.05);膦甲酸钠组患者转阴率为35.29%,干扰素组为25.71%,两组差异无统计学意义(χ2=0.75,P=0.27)。结论宫颈高危HPV持续感染患者自然清除率低,建议采取积极干预措施,膦甲酸钠能降低HPV病毒载量,促进HPV转阴,对持续性高危HPV感染患者有一定治疗意义。     

宫颈癌HPV-16感染对P53蛋白表达的影响

目的探讨宫颈癌HPV-16感染对P53蛋白表达的影响.方法采用免疫组化SP法分别检测75例宫颈癌和81例宫颈炎组织的HPV-16蛋白和P53蛋白表达情况.结果HPV-16蛋白在宫颈癌组织的表达率(73.3%,55/75)与宫颈炎组织(81.5%,66/81)差异无显著性;P53蛋白在宫颈癌组织的表达率(46.7%,33/75)高于宫颈炎组织(29.6%,24/81)(P＜0.05).宫颈癌组织HPV-16阳性组的P53蛋白阳性率(49.1%,27/55)高于HPV-16阴性组(40.0%,8/20)(P＜0.05);宫颈炎组织HPV-16阳性组的P53蛋白阳性率(36.4%,24/66)高于HPV-16阴性组(0%,0/15)(P＜0.05).宫颈癌和宫颈炎组织HPV-16蛋白与P53蛋白表达呈正相关(P＜0.05).结论HPV-16感染在宫颈癌和宫颈炎组织普遍存在,突变型P53蛋白的表达上调可作为宫颈癌发生的预警信号,HPV-16可能通过导致p53基因突变促使宫颈癌发生.     

外用重组人干扰素α2a凝胶剂研究

研究重组人干扰素α2a凝胶剂以应用于临床。重组人干扰素α2a以卡波普940NF为基质,加入保湿剂、保护剂、防腐剂制成外用凝胶,用于治疗单纯疱疹、带状疱诊、尖锐湿疣等病毒性皮肤病。稳定性试验结果表明,4℃保存有效期可达2a;药效学试验表明,rhIFNα2a(20万IU/g)对HSVⅠ病毒抑制效价>103.0,HSVⅡ病毒抑制效价>104.0;毒理学试验表明,该品对皮肤无毒,无刺激性,无红斑、水肿现象。临床试验结果表明,重组人干扰素α2a凝胶剂可应用于临床治疗单纯疱疹及预防尖锐湿疣的复发。     

一种包装AAV2/5的重组单纯疱疹病毒的构建

为了得到一种可以包装AAV2/5和表达绿色荧光蛋白的重组单纯疱疹病毒,设计并构建了一个由AAV2rep基因和AAV5cap基因嵌合而成的rep2cap5基因,然后,利用一套携带HSV1基因组的粘粒系统(cos6、cos28、cos14、cos56、cos48),将rep2cap5基因插入cos6粘粒上HSV1基因组片段的UL2基因中,而将EGFP的表达单位插入cos56粘粒上HSV1基因组片段的UL44基因中,用这2个重组粘粒与其它3个粘粒(cos14、cos28、cos48)共转染BHK-21细胞获得了重组病毒HSV1-r2c5-EGFP并进行了空斑纯化。HSV1-r2c5-EGFP病毒能够在BHK-21细胞连续传代,并且可以观察到几乎所有的感染细胞都能产生绿色荧光。用PCR方法以及Southern杂交方法表明所获得的HSV1-r2c5-EGFP中携带有rep2cap5基因,用HSV1-r2c5-EGFP感染携带报告基因LacZ的AAV载体细胞株,获得了具有感染性的重组AAV2/5-LacZ。结果表明,所获得的重组单纯疱疹病毒HSV1-r2c5-EGFP可提供AAV2/5载体包装所需的全部辅助功能,是一种能简便、高效制备重组AAV2/5病毒的通用性辅助病毒。     

Polypeptide composition of flacherie viruses of the silkworm

The purified flacherie viruses of the silkworm, Bombyx mori, (FVS I, FVS II, FVS III, and FVS IV) were iodinated by using chloramine-T. The iodinated FVSes were purified by sucrose density gradient centrifugation or 2.4% polyacrylamide gel electrophoresis. FVS IV was found in the sedimentation analysis of FVS I, FVS II, and FVS IV. Electrophoretic patterns of FVS IV showed that it was a mixture of components having identical mobilities with FVS I, EVS IIa, and FVS IIb. FVS IV was a decomposed particle of FVS I, FVS II, and/or FVS III. All of these particles contained three polypeptides with molecular weights of about 51,000, 31,000, and 12,000 daltons. FVS I composed of six polypeptides with molecular weights of 67,000, 51,000, 39,000, 31,000, 14,000, and 12,000 daltons. The maturation process of FVS I was discussed and was suggested as the following process, FVS IIb→FVS IIa→FVS I. It is not clear whether FVS III is an intermediate for FVS IIa to convert into FVS I, or FVS III is a decomposed particle of FVS I.     

肝炎病毒与EB病毒重叠感染

为探讨肝炎病毒（ＨＶ）与ＥＢ病毒（ＥＢＶ）重叠感染的状况和后果,我们用免疫酶法对１５４例各型病毒性肝炎患者作了ＥＢＶＩｇＡ抗体检测。结果发现,急性肝炎、慢性轻度肝炎、慢性中度肝炎、肝炎肝硬化、慢性重型肝炎和原发性肝癌ＶＧＡ－ＩｇＡ抗体的阳性率分别为２４．０％、３０．０％、５３．３％、６３．３％、４０．０％和７２．７％,与健康人（５．３％）比较,有非常显著升高（Ｐ＜０．０１）;原发性肝癌又较急性肝炎和慢性轻度肝炎高,并有非常显著意义差异（Ｐ＜０．０１）。ＨＢＶ和ＨＡＶ＋ＨＢＶ感染者比较,前者又较后者低（Ｐ＜０．０１）。重叠感染者的临床表现均为“肝炎型”,未见咽炎、腺热、胃肠、肺炎、肾炎、神经等类型。重叠感染者的ＣＤ＋３及ＣＤ＋４Ｔ细胞下降,ＣＤ＋８Ｔ细胞及ＩｇＧ,ＩｇＭ升高,与健康人比较差异非常显著意义（Ｐ＜０．０１）。结果提示：ＨＶ感染,不仅因免疫失调易感ＥＢＶ,又可因重叠感染而进一步使免疫功能失调;对病毒性肝炎的处理应强调免疫调节治疗。     

Evidence for plant viruses in the region of Argentina Islands, Antarctica

This work focused on the assessment of plant virus occurrence among primitive and higher plants in the Antarctic region. Sampling occurred during two seasons (2004/5 and 2005/6) at the Ukrainian Antarctic Station 'Academician Vernadskiy' positioned on Argentina Islands. Collected plant samples of four moss genera (Polytrichum, Plagiatecium, Sanionia and Barbilophozia) and one higher monocot plant species, Deschampsia antarctica, were further subjected to enzyme-linked immunosorbent assay to test for the presence of common plant viruses. Surprisingly, samples of Barbilophozia and Polytrichum mosses were found to contain antigens of viruses from the genus Tobamovirus, Tobacco mosaic virus and Cucumber green mottle mosaic virus, which normally parasitize angiosperms. By contrast, samples of the monocot Deschampsia antarctica were positive for viruses typically infecting dicots: Cucumber green mottle mosaic virus, Cucumber mosaic virus and Tomato spotted wilt virus. Serological data for Deschampsia antarctica were supported in part by transmission electron microscopy observations and bioassay results. The results demonstrate comparatively high diversity of plant viruses detected in Antarctica; the results also raise questions of virus specificity and host susceptibility, as the detected viruses normally infect dicotyledonous plants. However, the means of plant virus emergence in the region remain elusive and are discussed.     

应用斑点法检测植物病毒的研究

应用斑点法检测了病叶粗汁液中的芜菁花叶病毒(TuMV)、大豆花叶病毒(sMV)和黄瓜花叶病毒(CMV),病叶粗汁液可被检测的最大稀释度分别为1:5120、1:2560和1:1280。提纯的大豆花叶病毒和黄瓜花叶病毒可检测的最低限量分别为1.7ng和1.2ng。以牛血清白蛋白、吐温和聚乙烯吡咯啉酮作封闭液,均可获得满意的结果。应用斑点法检测芜菁花叶病毒和大豆花叶病毒时,其抗血清稀释1:500倍可获得满意效果,稀释2000倍仍可用于检测。     

寨卡病毒及其疫苗研究

寨卡病毒与黄热病毒、登革热病毒、日本脑炎病毒、西尼罗病毒等都属于蚊媒传播的黄病毒属病毒。寨卡病毒分离于1947年,但由于分布区域有限,所致寨卡热症状较轻,很长一段时间并没有引起太多的关注。最近一些年,特别是2015年后,巴西的寨卡疫情暴发及其与新生儿小头畸形的关联,引起了全球越来越多的关注。疫苗是应对寨卡疫情的重要手段,目前全球有30余个机构在进行寨卡病毒疫苗的研发。本文综述了寨卡病毒的生物学、流行病学、临床特征以及当前不同类型寨卡病毒疫苗研发现状,同时对其他几种黄病毒属病毒批准和临床阶段疫苗情况进行了概述,以为相关研究人员提供参考。     

Early onset of virus infection and up-regulation of cytokines in mice treated with cadmium and manganese

A substantial database indicates that a large number of environmental pollutants, chemicals and therapeutic agents to which organisms are exposed cause immunotoxicity. The suppression of immune functions may cause increased susceptibility of the host to a variety of microbial pathogens potentially resulting in a life-threatening state. Evaluation of the immunotoxic potential of chemical xenobiotics is of great concern and, therefore, we have investigated the impact of exposure of inorganic metals, specifically cadmium (Cd) and manganese (Mn) on Encephalomyocarditis virus (EMCV), Semliki Forest virus (SFV), and Venezuelan Equine Encephalitis virus (VEEV) infection. Pretreatment with a single, oral dose of Cd or Mn increased the susceptibility of mice to a sub-lethal infection of these viruses as observed by increased severity of symptoms and mortality compared to untreated controls. An early onset of virus infection was found in brains of Cd and Mn treated animals. Histopathological observations of the brain indicate evidence of inflammation and greater tissue pathology in Cd-or Mn-exposed mice compared to control animals. Meningitis and vascular congestion was seen in virus infected mice in all the metal treated groups, and further, the perivascular inflammation appeared earlier in treated mice compared to control. Encephalitis was maximum in Cd pretreated mice. Widespread environmental contamination of metals and the potential for their exposure and subsequent infection of humans or animals is indicative that further studies of these and all other metals are important to understand the effect of environmental pollution on human health.     

RNA viruses in the sea

Viruses are ubiquitous in the sea and appear to outnumber all other forms of marine life by at least an order of magnitude. Through selective infection, viruses influence nutrient cycling, community structure, and evolution in the ocean. Over the past 20 years we have learned a great deal about the diversity and ecology of the viruses that constitute the marine virioplankton, but until recently the emphasis has been on DNA viruses. Along with expanding knowledge about RNA viruses that infect important marine animals, recent isolations of RNA viruses that infect single-celled eukaryotes and molecular analyses of the RNA virioplankton have revealed that marine RNA viruses are novel, widespread, and genetically diverse. Discoveries in marine RNA virology are broadening our understanding of the biology, ecology, and evolution of viruses, and the epidemiology of viral diseases, but there is still much that we need to learn about the ecology and diversity of RNA viruses before we can fully appreciate their contributions to the dynamics of marine ecosystems. As a step toward making sense of how RNA viruses contribute to the extraordinary viral diversity in the sea, we summarize in this review what is currently known about RNA viruses that infect marine organisms.