hIL-6·hIL-6Rα·gp130三元复合物的结构预测

通过Ｄｅｌｐｈｉ方法分析人白介素６（ｈｕｍａｎ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－６,ｈＩＬ－６）／人白介素６受体α亚基（ｈｕｍａｎ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－６ ｒｅｃｅｐｔｏｒ α ｓｕｂｕｎｉｔ,ｈＩＬ－６Ｒα）复合物、ｇｐ１３０（βｓｕｂｕｎｉｔ）的空间构象的表现静电分布,利用分子对接方法研究ｇｐ１３０和ｈＩＬ－６／ｈＩＬ－６Ｒα复合物作用成三元复合物的空间构象,经过分子力学优化、分子动力学常温动态模     

人白介素6受体胞外区三维结构的同源模拟

IL-6受体是造血因子超家族成员,其胞外区细胞因子结合结构域（CBD）是受体结合配基和偶联gp130转导IL-6信号的功能域.据预测,IL-6R功能域的β片层折叠模式和人生长激素受体（hGH-R）及CD₄的晶体结构十分相似.应用计算机同源模拟技术,以hGH-R和CD₄的三维结构为模板,模建了hIL-6R功能域（106～322位）的三维结构,初步描述了其结构保守区的构象特征.文章研究模建的hIL-6R三维结构模式为探讨可溶性IL-6R点突变的结果,以及进行三维定量分析IL-6R胞外区功能域的构效关系提供了空间结构基础.     

IL－6受体结构与功能的研究进展

IL-6是一个多功能的细胞因子,其生物学作用在很大程度上受IL-6受体(IL-6R)结构和功能的影响.IL-6R由两条多肽链组成,即配体结合链gp80和信号传导链gp130.它们在结构和功能上既有分工又有合作.两种亚基组成的高亲和力IL-6R是介导细胞效应所必需的.IL-6Rα中的造血功能区属于造血因子受体超家族成员,它决定着结合IL-6的能力.然而gp130则是多种细胞因子共用的信号传递分子,其胞内段含有与酪氨酸激酶活化有关的保守成分.IL-6+IL-6R复合物通过诱导gp130的聚合来活化胞内的多种激酶分子和转录因子并最终导致有关基因的表达.     

人白介素6与其受体结合特定结构域的预测

借助人白介素6的核磁共振构象, 以人生长因子受体为模板同源模建的人白介素6受体空间构象, 通过表观静电势分析, 结合空间构象的互补性对人白介素6与其受体进行分子对接, 在分子力学优化、分子动力学动态模拟的基础上获得稳定的复合物结构, 从理论上预测人白介素6与其受体相互作用的结构域, 进一步确定影响人白介素6与其受体相互作用的特定位点, 为确定靶蛋白人白介素6的活性部位、利用计算机寻找和辅助设计新的拮抗剂提供理论依据.     

重组人白介素6受体功能区片段的功能鉴定

用生物素标记重组人白介素6受体功能区片段rIL6R-28及其二联体蛋白rIL6R-53．竞争ELISA表明重组蛋白可以与配基IL-6特异结合．流式细胞术检测结果表明IL-6与生物素标记的重组蛋白所形成的复合物能够与7TD1细胞表面的gp130结合．而7TD1细胞生长分析则表明,重组蛋白可以增强IL-6对7TD1．细胞的生长刺激作用．     

hIL-6与其受体作用的结构基础及拮抗剂的研究进展

通过对大量的分子生物学实验及晶体衍射结果的分析 ,从分子水平揭示人白细胞介素 6(hIL 6 )与其受体相互作用的结构模式及结合表位 .hIL 6属于促红细胞生成素受体超家族 ,首先和hIL 6受体α低亲和力结合 ,两者形成的复合物再与hIL 6受体 β(gp130 )的胞外区相互作用形成高亲和力三聚体 ,但是hIL 6不能单独和gp130结合 ,需要借助于hIL 6受体α的桥梁作用才能将二者联系起来进而促进六聚体的形成 .hIL 6是一种能够介导细胞表面信号转导 ,调节机体免疫及造血干细胞增殖和分化的细胞因子 ,许多疾病的发病机理及发展进程都和hIL 6过表达有关 .基于对hIL 6与其受体相互作用方式的探究 ,为hIL 6小分子拮抗剂的药物设计提供了理论模型 ,在此基础上已研究开发了许多不同种类的hIL 6新型分子拮抗剂 ,其中部分拮抗剂已应用于临床指导 .     

人白介素6受体结合功能域的构效关系研究

以分子对接（docking）方法研究人白介素6受体胞外区配基结合功能域“WSXWS”区氨基酸残基定点突变对受体与配基人白介素6结合时的相互作用能量、分子间相互作用的影响,从分子力学、分子动态学分析了人白介素6受体胞外区功能域关键氨基酸残基在受体与配基结合中的构象变化以及与人白介素6间的相互作用.     

靶向人白介素-6蛋白的治疗性单克隆抗体研究进展*

白介素-6(interleukin-6,IL-6)作为一种多效的细胞因子,参与机体内众多生理与病理过程。研究表明,IL-6首先与自身受体(IL-6R、gp130)形成异源六聚体复合物,进而激活下游信号转导通路,最终发挥生物学功能。 IL-6信号通路异常活化及功能失调与多种疾病密切相关,如自身免疫疾病、慢性炎症、恶性肿瘤等。另外IL-6的异常表达在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)细胞因子风暴综合征(CSS)中也扮演重要角色。一般而言,阻断IL-6信号通路上的各关键节点,均可用于IL-6相关疾病的治疗。有别于阻断IL-6R或gp130等公共受体分子,阻断IL-6蛋白的治疗性单克隆抗体特异性更高,在临床研究中,部分品种显示出其独有的治疗特点及有益的疗效。现阶段只有1个靶向IL-6蛋白的单克隆抗体药物获美国FDA批准上市,以及超过8个治疗性单克隆抗体在临床研究阶段。重点对国内外靶向人IL-6蛋白的治疗性单克隆抗体及其临床应用进行综述。     

人IL—6及其受体拮抗剂的研究进展

人IL－6及其受体拮抗剂的研究主要集中于两个方面：单克隆抗体和突变体,针对人IL－6和人IL－6R的活性区域构建的单克隆抗体对于临床治疗多发性骨髓瘤显示出了很好的短期疗效,根据与生长激素（GH）及其受体复合物GH／（GHbp)2的结构对比,推测人IL－6和IL－6Ra的活性位点,结合定点突变技术,设计IL－6突变体,IL－6R突变体和IL－6突变体－IL－6Ra融合蛋白,它们对天然hIL-6的生物活性显示出了明显的拮抗作用。     

白介素-6保护小脑颗粒神经元抗谷氨酸的神经毒性作用

目的：探讨白介素-6（IL-6）对谷氨酸诱导的神经元损伤的防治作用及其作用机制。方法：用IL-6慢性预处理培养的小脑颗粒神经元,然后后用谷氨酸急性刺激小脑颗粒神经元。用噻唑兰（MTT）比色法和末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位缺口末端标记（TUNEL）法分别观察神经元的功能和凋亡的变化;用激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）和逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）法分别检测神经元内Ca^2＋浓度的动态变化和IL-6信号转导蛋白gp130 mRNA的表达。结果：IL-6（2．5、5和10ng／ml）慢性预处理培养的小脑颗粒神经元,可浓度依赖性地改善谷氨酸诱导的神经元活性降低;并可明显减少谷氨酸诱导的神经元凋亡;还可显著抑制谷氨酸激发的神经元内Ca^2＋超载。此外。经IL-6慢性预处理的小脑颗粒神经元表达gp130mRNA明显低于未经IL-6预处理的神经元。结论：IL-6能保护神经元抵抗由谷氨酸诱导的兴奋毒性作用,IL-6的这种神经保护机制可能与它抑制神经元内Ca^2＋超载密切相关,而且可能由gp130细胞内信号转导途径介导。     

人hIL-24Δ103重组腺病毒感染诱导A549细胞凋亡

白细胞介素24（interleukin 24,IL-24）是近年来新发现的1个IL-10家族细胞因子,具有明显的抗肿瘤活性．为了研究开发高活性、低分子量的IL-24,并探讨其用于肿瘤靶向治疗的可能性,本研究在前期基础上,进一步构建并制备了缺失N端103个氨基酸残基的IL-24（hIL-24Δ103）重组腺病毒,并观察了其对A549细胞生长增殖和凋亡的影响．首先,采用PCR技术扩增IL-24第104位至第206位氨基酸区域的编码序列,制备hIL-24Δ103重组腺病毒．用Ad-hIL-24Δ103重组腺病毒感染肺癌A549细胞. MTT分析结果表明,Ad-hIL-24Δ103感染显著抑制了A549细胞的生长．Hoechst 33258染色和流式细胞仪分析结果表明,Ad-hIL 24Δ103感染导致细胞凋亡．Western 印迹分析结果表明,Ad-hIL-24Δ103感染导致了PKR和eIF-2α蛋白的表达上调与磷酸化激活,提示PKR和eIF-2α参与了hIL-24Δ103导致的细胞生长抑制和细胞凋亡过程的调节．关键词 人白介素24;腺病毒;细胞增殖;细胞凋亡     

白细胞介素6及其受体结构与功能关系研究进展

白细胞介素6(IL-6)的多种生物学功能是通过其特异性受体白细胞介素6受体(IL-6R)和公共受体gp130共同传递的。近年来,对IL-6、IL-6R及gp130的结构与功能进行了大量的研究工作,为进一步揭示它们之间作用的分子机制以及该系统拮抗剂设计提供了思路。     

利用大肠杆菌外膜蛋白A分泌表达人IL-6R突变体

白介素6(IL-6)是一种多功能的细胞因子,但其过高表达又往往与许多疾病的发生和发展有关,因而有必要构建白介素6受体(IL-6R)拮抗剂,用于拮抗IL-6的作用。可溶性IL-6R(sIL-6R)只能起IL-6激动剂作用,而与IL-6结合但不能与gp130相互作用的sIL-6R突变体则有可能拮抗IL-6的作用。为此,我们构建了sIL-6Rα亚基的突变体分子,并利用大肠杆菌外膜蛋白A(ompA)分泌信号肽分泌表达了双突变体C277D/H280I。     

蒲公英多糖对溃疡性结肠炎大鼠IL-6/STAT3信号通路的影响

目的：观察蒲公英多糖对溃疡性结肠炎大鼠模型IL-6/STAT3信号通路的调控作用。方法：清洁级SD大鼠40只,雌雄各半,随机分为4组（n=10）：空白组、模型组、阳性对照组、蒲公英多糖组。采用2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）诱导结肠炎大鼠模型,阳性对照组采用美沙拉嗪10 mg/kg·d灌胃,蒲公英多糖组采用蒲公英多糖10 mg/kg·d灌胃,治疗4周后处死,观察大鼠结肠粘膜病理改变,检测大鼠血清白介素-6（IL-6）含量、结肠髓过氧化物酶（MPO）、白介素-6受体（sIL-6Rα）、糖蛋白130（gp130）、转录活化因子3（STAT3）、IL-6 mRNA表达。结果：与正常组比较,模型组大鼠血清IL-6含量明显升高（P<0.01）,MPO阳性密度明显增高（P<0.01）,sIL-6Rα、gp130含量明显增高（P<0.01）,肠组织STAT3、IL-6 mRNA相对表达量明显增高（P<0.01）;与模型组比较蒲公英多糖组、美沙拉嗪组大鼠血清IL-6含量明显降低（P<0.01）,MPO阳性密度明显降低（P<0.01）,sIL-6Rα、gp130含量明显降低（P<0.01）,肠组织STAT3、IL-6 mRNA相对表达量与模型组比较明显降低（P<0.05）。结论：蒲公英多糖能够降低溃疡性结肠炎大鼠IL-6水平,下调IL-6/STAT3通路中sIL-6Rα、gp130蛋白表达量,进而下调大鼠肠组织STAT3、IL-6 mRNA的转录水平,缓解结肠组织的炎症状态,保护和修复粘膜组织,起到治疗溃疡性结肠炎的作用。     

黄芪多糖对炎性微环境中BMSCs的IL-6R、TNFR及肿瘤相关基因表达的影响

该文旨在观察黄芪多糖(astragalus polysaccharide, APS)对IL-6和TNF-α所致炎性微环境中骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells, BMSCs)白介素-6受体(IL-6 receptor, IL-6R)、肿瘤坏死因子受体(tumor necrosis factor receptor, TNFR)表达的影响,探讨IL-6和TNF-α导致BMSCs炎性损伤的可能物质基础。首先运用100 ng/mL IL-6和50 ng/mL TNF-α建立炎性微环境。设立对照组(control组)、模型组(D组)和50μg/m L黄芪多糖干预组(H组)。之后,应用ELISA法检测s IL-6R的表达水平。免疫荧光法检测IL-6R、gp130、TNFR I、TNFR II的表达水平。Western blot技术检测抑癌基因P53、PTEN和原癌基因Ras、C-myc的蛋白表达水平。检测结果显示,与对照组比较,模型组细胞上清液中的s IL-6R含量降低,模型组细胞IL-6R、gp130、TNFR I、TNFR II、Ras、C-myc表达均升高, P53、PTEN表达均降低。与模型组比较,黄芪多糖组细胞上清液sIL-6R含量升高,细胞IL-6R、gp130、TNFR I、TNFR II、Ras、C-myc表达均下降,而P53、PTEN表达均升高。结果提示,黄芪多糖能够减弱炎性微环境对刺激BMSCs表达IL-6R、TNFR的影响作用,并且维护肿瘤相关基因表达的相对稳定性。     

IL-6、IL-23在肠易激综合征患者肠黏膜的表达及意义

目的：研究肠易激综合征（irritable bowel syndrome,IBS）患者回肠末端及升结肠黏膜组织中白介素-6（interleukin-6,IL-6）、白介素-23（interleukin-23,IL-23）的表达。方法：70例腹泻型和40例便秘型IBS患者及30例健康人,用免疫组化法测定回肠末端及升结肠肠黏膜中IL-6及IL-23水平。结果：IL-6及IL-23在腹泻型及便秘型IBS患者回肠末端及升结肠的表达均高于对照组（P〈0.05）。结论：IBS患者回肠及升结肠黏膜炎性细胞因子表达水平升高,可能与IBS症状有关。     

人白介素6受体拮抗剂的构建及其在大肠杆菌中的表达

白介素6的过高表达往往与一些疾病的发生和发展有关,如一些自身免疫性疾病、增生性疾病和某些恶性肿瘤。这种情况下就有必要拮抗或抑制IL-6的作用以达到治疗的目的。一般来说,细胞因子的可溶性受体作为细胞因子结合蛋白(CBPs)可以拮抗相应因子的作用,但IL-6的可溶性受体(sIL-6R)却不同,它与IL-6形成的复合物仍然能与信号转导子gp130结合,介导IL-6的效应,起到IL-6激动剂的作用,因而有必要构建具拮抗效应sIL-6R的突变体分子,以用于IL-6相关疾病的治疗研究。     

白介素-6细胞因子家族新成员：心肌营养素-1

心肌营养素-1(cardiotrophin-1, CT-1)是一个新发现的白介素-6家族细胞因子,小鼠CT-1的mRNA长约1.4 kb,编码蛋白由203个氨基酸组成,以gp130和LIFR为受体.CT-1对心肌细胞既有肥大诱导作用,又有保护作用;能改变交感神经元的递质表型,促进多巴胺神经元、睫状神经元和运动神经元的存活;还能抑制骨髓白血病细胞M1的生长;诱导肝细胞急性相反应;小鼠腹腔注射给药可增加血小板、红细胞记数和血红蛋白浓度.     

gp130介导的信号转导通路在哺乳动物着床中的作用

IL—6相关细胞因子家族成员包括LIF、IL-6、IL-11以及它们的共同受体gp130,在哺乳动物的着床过程中起着重要的作用。LIF敲除的小鼠不能着床。IL—11Rα敲除的小鼠不能完全发生蜕膜化,从而导致妊娠的失败。IL—6敲除的小鼠着床数和着床胚胎的存活率均降低。这些细胞因子通过与受体结合,激活下游信号分子STAT,从而形成了gp130/Jak／STAT信号转导通路,并且STAT3基因敲除的小鼠也不能着床。这些细胞因子通过gp130/Jak／STAT信号转导通路在着床过程中起着重要的作用。了解此信号通路在看床中的作用对解决一些不明原因的不孕症,以及开发着床相关的避孕药物等具有重要意义。