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人绒毛膜促性腺激素中糖链的结构和功能研究 总被引:1,自引:0,他引:1
人绒毛膜促性腺激素中糖链的结构和功能研究李家大王克夷(中国科学院上海生物化学研究所,上海200031)关键词绒毛膜促性腺激素糖链人绒毛膜促性腺激素(humanchorionicgonadotropin,hCG)是一个来源于胎盘的异源二聚体的糖蛋白激素... 相似文献
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基于超滤膜辅助的糖蛋白全N-连接糖链的富集和质谱解析 总被引:1,自引:1,他引:0
糖基化作为一种常见的蛋白质翻译后修饰,对蛋白质的空间结构、生物功能等具有重要的影响.解析糖蛋白糖链结构有助于更清楚地认识糖蛋白及其功能.本研究建立了一种基于超滤膜富集血清中糖蛋白全N-连接糖链,并利用质谱技术对糖链结构进行分析的方法.根据糖蛋白及其糖链结构之间的分子质量差异,利用Millipore公司的10 ku超滤膜富集血清糖蛋白上酶解(PNGase F)释放的全N-连接糖链,并使用MALDI-TOF/TOF-MS解析糖链结构.通过该技术可以从血清中富集并鉴定到23种独特的N-连接的糖链结构,并且利用二级质谱进行了结构确认.该方法可以被用于从大量生物样本中富集糖蛋白全N-连接糖链,可以达到快速、高通量地解析糖蛋白N-连接糖链的目的. 相似文献
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α1,3—岩藻糖基转移酶及其相关产物 总被引:3,自引:0,他引:3
α1,3┐岩藻糖基转移酶及其相关产物陈继华陈惠黎(上海医科大学卫生部糖复合物重点实验室,上海200032)关键词α1,3-岩藻糖基转移酶Lewis(Le)系抗原细胞表面的糖蛋白或糖脂的一部分含有外链岩藻糖(Fucose,Fuc)化的乙酰乳糖胺糖链,常... 相似文献
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哺乳动物中约有50%以上的蛋白质都发生了糖基化修饰.连接在丝氨酸或苏氨酸上的O-连接糖链是常见的蛋白质糖基化修饰方式之一,其主要功能是维持与其连接的蛋白质部分的空间构象,保护其免受蛋白酶水解及覆盖某些抗原决定簇.糖链结构的解析有助于更清楚地认识糖蛋白及其功能.本研究建立了一种基于超滤膜辅助(FASP)富集细胞、血清和尿液中糖蛋白全O-连接糖链的方法,根据糖蛋白与其糖链结构之间的分子质量差异,利用10 KD超滤膜富集蛋白质样品中由β消除反应释放的全O-连接糖链,将糖链甲基化修饰后再使用MALDI-TOF/TOF-MS进行解析,同时利用二级质谱进行结构确认.通过上述方法可从标准糖蛋白mucin、细胞、血清和尿液样本中分别鉴定到83、29、33和85种O-连接糖链结构,利用该方法可以从复杂样品中富集和解析糖蛋白全O-连接糖链,实现快速、高效、高通量地解析糖蛋白O-连接糖链的目的. 相似文献
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真核细胞中的许多蛋白质是糖蛋白,其寡糖链以共价键连接到特定的氨基酸残基上。糖蛋白糖链的生物学功能是通过糖链对蛋白质功能的修饰、糖缀合物糖链与蛋白质的识别来实现的,糖基化是生物体最常见最主要的蛋白质修饰作用之一。糖链结构及其功能和调控的复杂性制约了其研究的速度,随着生物信息学的快速发展,糖生物学领域的数据库和预测软件也脱颖而出,该文介绍糖基化作用和糖生物学领域的数据库与预测软件。 相似文献
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内质网是一种重要的真核细胞器,糖蛋白的糖基化开始于其中.在内质网中永久性折叠错误糖蛋白或幼稚型糖链糖蛋白,以及突变的糖蛋白被阻止进入高尔基体,而是选择性地被运到胞质,然后在蛋白酶体中被降解.至少两大分子伴侣家族结合蛋白(BiP)和钙联结蛋白(CNX)/钙网蛋白(CRT)参与了糖蛋白折叠的质量控制过程. 相似文献
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以Swaisonine(Sw)作为高尔基体N-糖链加工酶系中α-甘露糖苷酶II的特异抑制剂。研究N-糖链结构和胰岛素受体(Ins-R)功能的关系,发现Sw不影响细胞生长和3H-亮氨酸参入SMMC7721细胞,但明显促进3H-甘露糖参入细胞总糖蛋白和表面糖蛋白,并使后者的ConA强结合组分显著增加,提示Sw使Ins-R的N-糖链变成杂合型及高甘露糖型,胰岛素结合试验后作Scatchard分析,发现S 相似文献
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液相色谱-电喷雾质谱法分析牛胰核糖核酸酶B酶解肽谱,糖基化位点及糖型 总被引:2,自引:0,他引:2
糖蛋白分析一直是蛋白质分析鉴定的难点, 为建立准确灵敏的糖蛋白分析方法。采用液相色谱电喷雾质谱法(LCESIMS) 对糖蛋白———牛胰核糖核酸酶B(RNase B)的酶解肽谱进行分析, 证实其一级结构。通过比较糖苷酶处理酶解肽段前后的肽谱, 确定糖基化位点, 并通过串联质谱( MS/MS) 解析了Asn 连接的糖型结构及去糖后肽段的氨基酸序列。糖型结构经α甘露糖苷酶处理和质谱分析确定为高甘露糖型。此外, 还对糖型不均一造成的几种糖肽进行了相对定量。这一方法在pmol 水平上, 同时分析糖蛋白的一级结构和糖结合位点及糖型, 对含N糖链的糖蛋白的分析具有普遍意义。 相似文献
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张旭 《中国生物工程杂志》1995,15(2):30-35
蛋白质糖基化工程张旭综述黄秉仁审校(中国医学科学院基础医学研究所生化室)引言生物体内大多数蛋白质为糖蛋白。[14]特别是随着基因工程产品的开发,蛋白上糖链的结构与功能愈来愈受到关注,以每年测定六百个新寡糖链顺序的速度增长。从美国国家生物技术信息中心(CCSD)得知,目前已获得9200个独特的寡糖链。预计到1994年底将增加到12000个。 相似文献
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应用能断糖蛋白N-糖链合成的衣霉素(TM),研究了N-糖链缺失对HT1080细胞分泌纤连蛋白(Fn)以及纤连蛋白受体(FnR)与配体结合的影响。结果表现,1μg/ml的TM可抑制N-糖链的合成(此时,3H-甘露糖掺入下降63%),但细胞分泌Fn的量仅下降3%,这主要是由于蛋白合成受TM抑制(25%)而引起。因而,N-糖链缺失可能并不影响Fn的分泌,而在同样条件下,单个细胞结合125I-Fn的量显著 相似文献
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各种已知结构的糖蛋白是复合糖和糖结合蛋白研究中必需的工具。由于天然糖蛋白中糖链结构的复杂性和不均一性,不适宜作为研究的工具。人工合成拟糖蛋白(neoglycoproteins)为糖的结构和功能的研究及凝集素和其它糖结合蛋白的研究提供了重要工具,同时为内源性凝集素(endogenous lectin,EL)介导的糖蛋白——药物靶向治疗进一步临床使用提供了物质基础。本文报道以牛血清白蛋白(BSA)和 相似文献
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糖组学:破解生命信息的第3种途径 总被引:6,自引:0,他引:6
糖组学是随着糖生物学而兴起的研究糖链的表达、调控和生理功能的科学。糖链由于结构的多样性和复杂性而成为细胞的信息分子,是生物体基因组信息的延续,因此糖组学研究是后基因组时代阐明基因功能的必由之路。糖组学的内容主要包括对糖链的结构研究和在细胞信号传递、细胞识别方面的功能分析,以及通过糖蛋白组建糖组学数据库,从而建立起一套从基因组蛋白组到糖组的研究体系,对糖链的生物学功能的认识将有助于基因组学和蛋白质组学的研究。 相似文献
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应用能阻断糖蛋白N-糖链合成的衣霉素(TM),研究了N-糖链缺失对HT1080细胞分泌纤连蛋白(Fn)以及纤连蛋白受体(FnR)与配体结合的影响。结果发现,1μg/ml的TM可抑制N-糖链的合成(此时,3H-甘露糖掺入下降63%),但细胞分泌Fn的量仅下降33%,这主要是由于蛋白合成受TM抑制(25%)而引起,因而,N-糖链缺失可能并不影响Fn的分泌。而在同样条件下,单个细胞结合125I-Fn的量显著下降,显示N-糖链的缺失可能导致了膜上FnR总量或其与配体结合的亲和力的改变。TM处理组的FnR的内吞率与对照组相比较无明显差异,提示受体分子中的N-糖链缺失不影响其内吞过程. 相似文献
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利用标记N-糖链的凝集素亲和层析法研究了佛波醇肉桂酸乙酸酯(PMA)对人肝癌细胞SMMC-7721表面糖蛋白上N-糖链结构的影响,发现100nmol/L的PMA处理5天后,可使细胞表面N-糖链中高甘露糖型和杂合型以及四天线、C2C2,6三天线复杂型的比例增高,而二天线复杂型降低。此结果与我们曾报道的视黄酸(RA)和双丁配环磷酸腺苷(db-cAMP)对该细胞表面N-糖链的影响相反。因RA和db-cAMP是SMMC-7721细胞的分化诱导剂,可抑制细胞生长;而PMA是该细胞的增殖促进剂,故细胞表面N-糖链的变化与细胞的分化和增殖密切相关。 相似文献