贝类中不同种类病原生物的快速检测方法

为适应进口鲜活贝类的快速检验需求,有必要建立快速检测多种病原生物的方法.针对进口鲜活水产品中常见的细菌、病毒和原生动物等不同种类的病原生物,设计了退火温度相近的特异PCR引物,建立了能够同时定性检测不同种类病原生物的方法.在此基础上,针对不同病原生物设计了特异的荧光引物,建立了检测贝类中不同病原生物的荧光定量PCR体系,并进行了特异性与重复性试验.与传统的检测方法相比较,该方法检测贝类中的病原生物更为快速准确,结果直观,可以满足口岸进口水产品快速检测的需要.     

病原性因子和DNA诊断总论

<正>为了有效地治疗传染病,有必要对引起炎症的病原微生物进行分离、鉴定以及正确的诊断。但是,就整个分离、鉴定过程而言,需要较长时间。为了达到早期诊断的目的,目前正在开发各种快速的诊断方法。在快速诊断方法中,有对存在于检样中的病原微生物的特定抗原进行免疫学检测的方法和对存在于患者血清中的病原微生物的特异性抗体进行检测的方法等。近年来随着分子生物学手段的逐步普及,DNA诊断法已被各个领域广泛采用,现就DNA诊断法与其它方法进行比较:     

双歧三联活菌对急性细菌性痢疾的后期治疗疗效分析

目的通过对急性细菌性痢疾的后期治疗,以达到减少复发病例,提高患者的生命质量。方法治疗组使用双歧三联活菌胶囊对急性细菌性痢疾患者急性中毒症状控制后进行单盲法随机分组疗效进行分析,对照组使用泰利必妥片,2组用药方法、观察内容及随访时间均相同。结果双歧三联活菌胶囊组有效率达到97.83%,无任何毒副作用;而对照组有效率仅为80%,其中20%副作用较明显,而且经卡方检验,P<0.01,2组差异有非常显著性。结论双歧三联活菌胶囊为众多微生态制剂中的一种,其作为急性细菌性痢疾或其他细菌感染的腹泻性疾病的后期治疗药物,疗效肯定,可以提高患者生活质量。     

间接萤光抗体法在快速检验上的应用

细菌快速检验的方法是目前食品卫生工作中迫切需要解决的问题。近年来我们应用间接萤光抗体法(以下简称“萤光抗体法”)对食品中污染的致病菌进行检验,取得了一定进展,并应用于生产实践中。初步结果表明,萤光抗体法在某些食品细菌的快速检验方面比常规细菌培养方法具有特异性强、敏感性高、快速、工作效率高、节省人力物力等优点。现将方法介绍如下:     

ELISA检测RSV感染的研究

呼吸道合胞病毒(RSV)是婴幼儿呼吸道感染的重要病原之一,早期快速诊断RSV感染是防止本病蔓延,及时采取正确治疗措施的关键;所以,急待寻求快速诊断的方法。本试验建立了酶联免疫吸附测定(ELISA)检测RSV感染的方法。对其敏感性、特异性、重复性进行了检验;并在临床应用上与病毒分离和/或补体     

急性细菌性痢疾960例临床分析

目的:探讨急性细菌性痢疾的临床特点及治疗方法.方法:对960例急性细菌性痢疾进行回顾性分析.便常规采用普通玻片镜检法,末梢血常规采用激光加电阻法,大便培养采用SS、麦康凯培养基.观察患者的性别、年龄、发病原因、病程、发病时间、临床表现、地区分布、辅助检查及治疗预后等.结果:急性细菌性痢疾发病高峰在7～9月,以40岁以下青壮年为主,无性别差异,感染以福氏志贺菌为主,主要临床表现为腹痛、腹泻、发热.结论:细菌性痢疾作为季节性疾病是可以预防的,要及时就诊、合理用药.     

MALDI-TOF质谱技术分析与鉴定病原细菌研究

本文通过基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术分析病原细菌的方法进行研究, 阐明影响分析结果的重要因素, 并建立了MALDI-TOF-MS 分析病原细菌的标准方法。对不同属、种和亚种的12株植物病原细菌进行全细胞分析结果表明：MALDI-TOF-MS能快速而准确的区分和鉴定病原细菌, 分析过程简单、灵敏度高。此法在细菌属、种、亚种和菌株水平上, 可快速、准确地区分和鉴定。     

基于核酸等温扩增的病原微生物微流控检测技术

病原微生物的快速检测对疫情的预防控制至关重要。基于PCR的病原微生物核酸检测方法克服了传统病原微生物培养方法耗时长、免疫学检测存在窗口期等问题,已成为目前最主要的病原微生物筛查方法。然而,对精确控温热循环仪的依赖却严重限制了其在资源匮乏地区的应用。虽然基于核酸等温扩增的病原微生物检测方法可摆脱对高精度温控设备的依赖,但仍需要进行样本核酸分离提取、扩增与检测等步骤。近年来,微流控技术与核酸等温扩增技术相结合,诞生了多种病原微生物等温扩增微流控检测技术。该技术通过设计芯片结构、优化进样模式及检测方式,实现了病原微生物核酸提取、扩增与检测一体化,并具备多重检测、定量检测等功能,具有对仪器依赖度小、对操作人员要求不高、样本量需求小和自动化程度高等优点,适合于在多种环境下的病原微生物快速检测。本文从核酸等温扩增原理、进样方式、检测方式等方面对核酸等温扩增病原微生物微流控检测技术进行了综述,以期为病原微生物的快速筛查提供更多的方案思路,提升公共卫生领域对传染性疾病的防控能力。     

用间接免疫荧光抗体法快速诊断痢疾志贺氏菌

细菌性痢疾是常见多发的肠道传染病。细菌性痢疾的早期诊断、对及时采取针对性的防治措施有重要的现实意义。我们应用间接免疫荧光抗体技术对痢疾志贺氏菌的快速诊断作了探讨,现将结果报告如下。     

宏基因组学在传染病防控中的应用进展北大核心CSCD

新发突发传染病暴发给全球公共卫生防控带来严峻挑战。快速识别致病病原体是应对新发突发传染病的首要问题,传统病原检测方法难以应对已知变异较大病原或未知病原,基于高通量测序的宏基因组学研究给病原识别鉴定带来了新的方法和思路。核酸提取、高通量测序和数据分析等关键技术方法不断发展,使宏基因组学成为新突发传染病防控的重要研究方向。宏基因组学可对传染病防控中的多种类型样本进行直接测序,获得高通量的测序数据,并结合病原核酸数据库,通过序列比对、变异进化分析等生物信息学方法,通过监测可疑样本对疫情暴发进行预测预警;识别传染病患者感染致病病原,为临床诊治提供指导;构建病原系统发育关系,追溯疫情潜在感染来源,最终实现新突发传染病病原的快速识别、分型、耐药及溯源分析。宏基因组学作为一项新兴技术,在传染病防控领域具有巨大潜力和发展空间。通过对宏基因组学在传染病病原监测、检测及溯源等方面的应用进展进行综述,以期为传染病防控提供新的视角。     

宏基因组学在传染病防控中的应用进展

新发突发传染病暴发给全球公共卫生防控带来严峻挑战。快速识别致病病原体是应对新发突发传染病的首要问题,传统病原检测方法难以应对已知变异较大病原或未知病原,基于高通量测序的宏基因组学研究给病原识别鉴定带来了新的方法和思路。核酸提取、高通量测序和数据分析等关键技术方法不断发展,使宏基因组学成为新突发传染病防控的重要研究方向。宏基因组学可对传染病防控中的多种类型样本进行直接测序,获得高通量的测序数据,并结合病原核酸数据库,通过序列比对、变异进化分析等生物信息学方法,通过监测可疑样本对疫情暴发进行预测预警;识别传染病患者感染致病病原,为临床诊治提供指导;构建病原系统发育关系,追溯疫情潜在感染来源,最终实现新突发传染病病原的快速识别、分型、耐药及溯源分析。宏基因组学作为一项新兴技术,在传染病防控领域具有巨大潜力和发展空间。通过对宏基因组学在传染病病原监测、检测及溯源等方面的应用进展进行综述,以期为传染病防控提供新的视角。     

重组酶介导扩增技术及其在病原微生物快速检测中的应用进展*

建立快速的病原学诊断方法对动物疫病的预防和控制、公共卫生安全等方面具有重要意义。重组酶介导扩增法(RAA)是一种新型恒温体外核酸扩增技术,在体外较低温度下就可以实现对DNA或RNA的快速扩增。RAA具有操作简便、快速、准确、节能、便捷等优点。重组酶、单链结合蛋白和DNA聚合酶是该技术的三大核心物质,利用这三种物质可替代传统PCR的热循环解链过程。该技术将会在病原微生物检测方面发挥重要作用。对RAA技术及其在病原检测方面的应用进行了综述,以期为相关领域的研究提供参考。     

实时荧光PCR检测水产品中副溶血性弧菌

目的探索副溶血性弧菌快速检测法,应用于日常监测及食物中毒的快速查源。方法用副溶血性弧菌实时荧光试剂盒对水产品样本进行检验,以副溶血性弧菌toxR基因为靶序列,设计1对引物和探针,采用热裂解法提取DNA。结果实时荧光PCR从42份水产品样品的增菌液中检出13份样品副溶血性弧菌阳性,与传统培养法相比一致性极好（K=0.943,K〉0.75）。结论实时荧光PCR方法在副溶血性弧菌的检验方面较传统方法具有快速、灵敏、特异性强等优势,具有广阔的应用前景。     

双色荧光多重PCR技术及在禽流感病毒检测中的应用

为快速检测7种亚型禽流感病毒,对引物进行双色荧光标记,建立双色荧光多重PCR(DFM-PCR)方法,通过运用DFM-PCR可一次检测出7种禽流感病毒亚型。此方法为应用于病毒或病原等一些要求快速、高通量的检测领域打下基础,而且为禽流感病毒检测以及其他种类病毒等病原检测提供了一种新型方法。     

念珠菌性阴道炎实验诊断方法评价

念珠菌性阴道炎是妇科常见的感染性疾病,曾称为霉菌性阴道炎,多由白念珠菌引起。由于临床抗菌素和激素类药物等的广泛应用,目前该病发病率高达30％～40％,且易复发。临床妇科检查阴道分泌物增多,外观呈白色稠状、白膜状或豆渣状^[1]。阴道分泌物的实验室检测方法有：涂片的直接镜检法、革兰氏染色法、快速凝集法、真菌培养和分子生物学等方法^[2]。为了适合门诊常规检验的快速和准确报告的要求,对现在常用的直接涂片镜检法和快速乳胶凝集法两种检测方法进行结果对比,为临床提供可靠的检验结果。     

水中病原微生物分子检测技术研究进展

基于PCR方法的多种分子检测技术已广泛的应用于水体病原微生物的检测中。而以DNA芯片为代表的微型化、快速化手段将是未来检测技术的发展方向,可实现对病原微生物实时和快速的检测。新检测技术的发展有利于建立水体污染早期预警机制,同时,可靠的病原微生物检测方法可降低有害微生物对人类健康的影响。对水体病原微生物分子检测方法及其在水污染相关疾病风险控制中所扮演的重要角色进行阐述。     

FTA-DNA直接提取法在病原真菌分子鉴定中的应用

目的建立并评价FTA-DNA直接提取法在病原真菌分子鉴定中的应用。方法采用whatman FTA-DNA直接提取法从25个不同种属的45株培养的菌株和6例临床标本中提取病原真菌DNA,用于病原真菌的测序鉴定。配制不同浓度的孢子悬液探索该方法的检测限和安全性。结果 45株菌株扩增后均能得到1条清晰的DNA扩增片段,并成功测序。应用该方法亦成功从腹水、胸水、口腔拭子、宫颈拭子来源的临床标本中直接提取DNA并成功鉴定病原真菌。该DNA提取方法联合降落PCR能检测到1.0×103个cell/mL的孢子悬液,1.0×104个cell/mL及以下浓度的孢子悬液可以被FTA卡完全灭活。结论 FTA-DNA直接提取法可快速有效地从培养的菌株及部分临床标本中提取并保存病原真菌DNA,用于病原真菌的测序鉴定。     

单克隆抗体在植物病理学中的应用及其研究进展

植物病理学家的特殊任务包括植物病害的诊断、病原物的鉴定和检测、病原物的特性研究以及寄主-病原物相互关系的研究。植物病理学家的根本目的在于保持植物健康,也就是防治病害。病害的准确诊断无疑是防治的前提条件。病原物被鉴定得越快速、越准确,就越能快速地实施正确的防治。病害诊断和病原检测的常规方法主要包括病害的症状学、显微镜技术、微生物学技术、生物鉴定技术和血清学技术。免疫化学技术对病害的快速准确的常规诊断极其有用,对植物病原的鉴定和定量分     

乳及乳制品中病原微生物溯源技术研究进展

牛奶营养丰富,素有"白色血液"之称,随着公众对食源性疾病原因和来源问责制的需求增加,准确追踪特定食源性病原微生物在暴发过程中所经过的途径变得越来越重要。微生物溯源研究有助于人们更深入地了解病原微生物种群结构及其多样性的起源和进化,为病原微生物的检验、流行监测、综合防治等研究提供重要的信息资料和科学依据。在牛奶中病原微生物溯源技术研究中,光谱技术、质谱技术、分子方法、全基因组测序等方法均发挥了重要作用。本文根据近年国内外相关文献资料,对检测奶及奶制品中病原微生物常用溯源技术的原理和应用进行了概述。     

婴幼儿腹泻病原微生物检验结果研究

目的:探讨婴幼儿腹泻病原微生物类型,为患儿临床诊治提供依据。方法:对来院诊治260例腹泻病患儿相关资料分析,对患儿进行病原微生物检验,分析患儿微生物检验结果。结果:1-5个月阳性率为60%,6-12个月阳性率63.92%,1-3岁阳性率为66.67%,3-6岁阳性率为52.94%,不同年龄段阳性率差异显著(P0.05);轮状病毒比率为39.23%,大肠埃希菌比率为18.46%,沙门菌属比率为14.23%,志贺菌比率为6.54%。结论:临床上加强病原微生物检验能够有效的定位到致病微生物,并根据检验结果选择恰当药物治疗,提高患儿治疗效果。