尿酸在聚6-甲基香豆素修饰的玻碳电极上的电化学行为

制备了聚6-甲基香豆素修饰玻碳电极,研究了尿酸(UA)在该修饰电极上的电化学行为。实验结果表明:在pH=5.0的磷酸盐缓冲溶液中,扫描速率为50mV/s时,尿酸在修饰电极上于0.352V处产生一个灵敏的氧化峰,在0.278V处有一弱的还原峰。经线性扫描伏安法测定,氧化峰电流与尿酸浓度在2.5×10-6～1.0×10-5mol/L范围内表现出良好的线性关系,检出限为1.0×10-6mol/L。将修饰电极在常温下放置50d及将体系温度升高到75℃时,修饰电极对尿酸的响应电流大体不变,结果满意。     

PGE2、PGF2α和Iloprost对小鼠2-细胞胚胎体外发育的影响

目的研究PGE2、PGF2。以及Hoprost（PGl2的稳定类似物）对小鼠2-细胞胚胎体外发育的影响。方法在含0．5％BSA的mCZB液中分别添加0、10^-4、10^-5和10^-6mol／L的PGE2,0、10^-4、10^-5和10^-6mol／L PGF2α以及0、1×10^-6、2×10^-6和4×10^-6mol/L Iloprost,观察小鼠2-细胞胚胎的体外发育,同时利用H33342染色进行囊胚和孵化囊胚的细胞核计数。结果添加PGE2、PGF2α以及Iloprost的各处理组2-细胞胚胎体外培养的囊胚率和孵化率均显著低于对照组（P〈0．05）,但各处理组与对照组之间在囊胚或孵化胚胎的细胞数上差异不显著（P〉0．05）。结论培养液中添加这三种前列腺素均不利于小鼠2-细胞胚胎的体外发育,但不影响囊胚或孵化胚胎的细胞数。     

可见分光光度法测定人尿中痕量1-萘酚

目的：建立一种可见分光光度法单独测尿中痕量1-萘酚的新方法。方法：在碱性介质中,1-蔡酚（1-NAP）与氯霉素作用生成蓝色物质导致体系的吸光度增加,2-NAP不干扰测定。结果：该蓝色产物的最大吸收波长Amax=472．0nm,其吸光度与1-NAP摩尔浓度在7．64×10^-7mol／L-6．31×10^-4mol／L范围内线性关系良好,线性回归方程为△A=0．3146C＋0．0239,相关系数r=0．9973,检出限为2．29×10^-7mol／L,相对标准偏差RSD为3．25％-6．42％,加标回收率为95．3％-105．7％。结论：本方法灵敏、简单、快速、易于推广,用于人尿中1-NAP含量的单独测定结果满意。     

应用DPV法测定油脂中抗氧化剂PG、BHT含量的研究

目的：PG、BHT是食用油常用的抗氧化剂，本研究基于PG、BHT的电化学性质，探讨建立一种新型的油脂中抗氧化剂添加量快速测定方法。方法：以Nafion修饰玻碳电极作为工作电极，以LiClO4乙腈溶液作为电解质，采用微分脉冲溶出伏安扫描测定法（DPV）测定其含量与峰电流的关系。结果：PG在3.3×10-5～1.65×10-4 mol/L、BHT在1.32×10-4～3.3×10-4 mol/L内加入量与氧化峰电流呈良好的线性关系。结论：在一定浓度范围内通过电化学方法测定油脂抗氧化剂含量的方法是可行的。     

用钴卟啉修饰电极催化测定多巴胺等神经递质

将5, 10, 15, 20－四－（3－甲氧基－4－羟基苯基）卟啉钴（CoTMHPP）修饰在玻碳电极表面,制备成对多巴胶等神经递质有高灵敏度响应的CoTMHPP修饰电极．电极具有灵敏度高、响应快、稳定性好等特点．电极响应时间小于10s,儿茶酚类化合物的检测浓度为10^-6mol／L．     

血清降钙素原在鉴别细菌性感染与自身免疫性疾病活动期中的应用价值

目的：探讨血清降钙素原（procalcitonin,PCT）在鉴别诊断自身免疫性疾病活动期与细菌感染中的应用价值。方法：选择析深圳市保健办2011年1月-2012年3月收治的30例自身免疫性疾病活动期和34例细菌感染患者为研究对象,测定其血清c反应蛋白（C-reactive protein,CRP）和PCT的水平。结果：感染组患者CRP水平为（0．1162±0．0873）gm,PCT水平（2．37±7．02）±10^-3gm,自身免疫活动期患者CRP水平（0．0639±0．0687）gm,PCT浓度（0．09±0．08）×10^-3g／L。ROC曲线下面积（AUC）和95％可信区间（CI）分别为0．75和0186,0．61-0．83和0．74-0．94,差异具有统计学意义（P〈0．05）。CRP联合PCT水平预测的AUC为0．82．其与单独PCT水平相比没有显著性差别（P=0．74）。CRP的最佳临界值为0．0722g／L,灵敏度为73．5％,特异性为69．2％;PCT的最佳临界值为0．09×10^-3g/L,其灵敏度为82．1％,特异性为72．5％。结论：在鉴别活动期自身免疫疾病患者与细菌感染时,PCT的灵敏度与特异性比CRP高,但其联合CRP对此类诊断并无显著意义。     

普通小球藻引发水中17β-雌二醇的光降解

研究了普通小球藻引发水中17β-雌二醇(E2)的光降解,结果表明,在250W高压汞灯(HPML,nm)的照射下,藻浓度为4．0×10^10个·L^-1时,17β-雌二醇的光降解率可达37％．藻浓度为4．2×10^10个·L^-1时,17β-雌二醇浓度在1．5×10^-5-6．0×10^-5mol·L^-1范围内,其光降解速率与初始浓度成正比,反应是假一级．另外,还研究光强、藻悬浮液浓度和17β-雌二醇初始浓度等对此反应体系的影响。     

雌激素对成骨细胞增殖及IGF-2表达的调控作用

目的 探讨雌激素对大鼠成骨细胞功能的影响及胰岛素样生长因子2（insulin-like growth factor 2,IGF-2）表达的调控机理。方法应用1×10^-10mol／L、1×10^-8mol／L、1×10^-6mol／L浓度的雌二醇（estradiol,172）分别作用原代培养的新生大鼠颅盖骨成骨细胞24h;采用MTT法和对硝基酚磷酸盐法检测成骨细胞增殖能力和细胞中碱性磷酸酶（ALP）活性;应用实时定量PCR和Western印迹杂交分析成骨细胞中IGF-2的mRNA和蛋白质的表达规律。结果1×10^-6mol／L浓度的磁使大鼠成骨细胞增殖能力和ALP活性分别增加了67％和55％,使IGF-2的mRNA与蛋白质的表达水平分别增加了90％和140％,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论雌激素对成骨细胞中IGF-2基因的表达具有正性调控作用。成骨细胞中IGF-2的高表达可能与雌激素调节成骨细胞增殖和分泌功能相关。     

几种食用菌菌丝体液体培养条件的研究

研究了鲍鱼菇、黑灵芝、猴头菇和羊肚菌等4种食用菌菌丝体的最佳液体培养条件。结果各食用菌适宜的培养条件为：鲍鱼菇：果糖20g／L,酵母浸膏2g／L,KHP040．5g／L,VC0．001g／L,适宜培养温度28℃,pH5;黑灵芝：葡萄糖20g／L,蛋白胨2g／L,K2HP040．5g／L,VB20．001g／L,适宜培养温度35℃,pH6;猴头菇：麦芽糖20g／L,酵母浸膏2g／L,K2HID040．5g／L,MgSO,0．5g／L,VB10．001g／L,适宜培养温度28℃,pH7;羊肚菌：蔗糖20g／L,蛋白胨2g／L,K2HP040．5g／L,VB10．001g／L,适宜培养温度28℃,pH7。     

奥帕曲拉对内皮素-1诱导的心脏成纤维细胞增殖的影响

目的：探讨奥帕曲拉（omapatrilat,OMA）对内皮素-1（ET-1）诱导的心脏成纤维细胞（CFs）增殖的干预作用及可能机制．方法：经差速贴壁法培养的新生大鼠CFs,随机分为7组：对照组,ET-1组,OMA组,ET-1＋OMA10^-9mol／L组,ET-1＋OMA10^-8mol／L,ET-1＋OMA10^-7mol／L组．ET-1＋OMA10^-6mol／L组.采用四氮唑盐（MTT）比色法测定CFs数目,流式细胞分析仪（FCM）检测CFs细胞周期,液体闪烁计数仪测定CFs^3H-脯氨酸掺入率,硝酸还原酶法测定细胞培养上清液中NO含量：结果：与对照组相比,10^-7mol／LET-1能显著增加CFs的吸光度A190值及[^3H]-Pro掺入率,降低CFs生成NO的量（均P〈0．01）,10^-9-10^-6mol／L OMA呈浓度依赖性的降低ET-1诱导的A190值和[^3H]—Pro掺入率升高（均P〈0．01）,促进CFsNO的生成（均P〈0．05）;细胞周期分析表明ET—1能显著提高S期细胞百分率（P〈0．01）,10^-7mol／LOMA抑制ET-1诱导S期细胞百分率上升（P〈0．01）.结论：OMA对ET-1诱导的CFs增殖及胶原合成有抑制作用,该作用可能和NO生成有关.     

植物次生物质和杀虫剂对分月扇舟蛾谷胱甘肽S-转移酶的抑制作用

本论文采用分光光度计法研究了植物次生物质和杀虫剂对分月扇舟蛾Closteraanastomosis(L.)谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)的体外抑制作用。结果表明各植物次生物质和杀虫剂对分月扇舟蛾GSTs活性的体外抑制作用存在差异。当植物次生物质和杀虫剂终浓度为8.34×10-5mol/L时,槲皮素和单宁酸对分月扇舟蛾GSTs活性抑制作用最强,分别为64.41%和58.61%;三唑磷、毒死蜱、辛硫磷、氟铃脲、氟虫腈和哒螨灵都有较强的抑制作用,对GSTs活性抑制率超过20%;氧化乐果、水胺硫磷、丙溴磷、马拉硫磷、灭多威、联苯菊酯、高效氯氰菊酯、甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、吡虫啉和啶虫脒对分月扇舟蛾GSTs有中等抑制作用;其他杀虫剂对分月扇舟蛾GSTs有较弱(或没有)抑制作用。此外,在一定的浓度范围内,槲皮素、单宁酸和辛硫磷对分月扇舟蛾GSTs活性的抑制作用存在明显的剂量效应关系。槲皮素、单宁酸和辛硫磷对分月扇舟蛾GSTs的抑制中浓度分别为2.19×10-5,2.62×10-5,1.49×10-4mol/L。因此,此研究明确了槲皮素和单宁酸作为防治分月扇舟蛾的新型防治剂或增效剂具有很好的潜力。     

赤拟谷盗的磷化氢敏感和抗性品系体内羧酸酯酶的活性比较

本文比较测定了赤拟谷盗Tribolium castaneum(Herbst)的磷化氢抗性(Rf=327)和敏感品系害虫的羧酸酯酶活性,研究了该害虫同一品系不同个体间羧酸酯酶的活性差异,比较了两品系害虫在系列磷化氢浓度下熏蒸24h和6.94×10-2mg/L磷化氢浓度下熏蒸不同时间的羧酸酯酶活性。主要结果为:未熏蒸的抗性害虫幼虫和蛹体内的羧酸酯酶活性分别高于敏感品系的1.37和1.16倍;敏感和抗性害虫同品系内不同个体间羧酸酯酶活性分布频率都存在明显差异,抗性害虫中酶活性大的个体数量占的比例较大;磷化氢浓度分别为0.69×10-2、2.78×10-2、5.56×10-2、8.33×10-2和11.11×10-2mg/L时都可导致敏感害虫羧酸酯酶的活性降低,但活性受抑制的程度不因浓度高低呈相应的增减。浓度分别为5.56×10-2、11.11×10-2、13.89×10-2、20.83×10-2和27.78×10-2mg/L的熏蒸中抗性害虫体内酶活性增加,且活性增高的程度与浓度增减也不呈对应变化。在6.94×10-2mg/L磷化氢浓度下熏蒸不同时间的结果中,敏感害虫的酶活性随时间延长而下降,抗性害虫的活性则随时间延长而增大。研究表明赤拟谷盗对磷化氢的抗性可能与羧酸酯酶的活性增加有关。     

Fabrication of an Electrochemical Sensor Based on Gold Nanoparticles/Carbon Nanotubes as Nanocomposite Materials: Determination of Myricetin in Some Drinks

In this paper, the electrochemical behavior of myricetin on a gold nanoparticle/ethylenediamine/multi-walled carbon-nanotube modified glassy carbon electrode (AuNPs/en/MWCNTs/GCE) has been investigated. Myricetin effectively accumulated on the AuNPs/en/MWCNTs/GCE and caused a pair of irreversible redox peaks at around 0.408 V and 0.191 V (vs. Ag/AgCl) in 0.1 mol L⁻¹ phosphate buffer solution (pH 3.5) for oxidation and reduction reactions respectively. The heights of the redox peaks were significantly higher on AuNPs/en/MWNTs/GCE compare with MWCNTs/GC and there was no peak on bare GC. The electron-transfer reaction for myricetin on the surface of electrochemical sensor was controlled by adsorption. Some parameters including pH, accumulation potential, accumulation time and scan rate have been optimized. Under the optimum conditions, anodic peak current was proportional to myricetin concentration in the dynamic range of 5.0×10⁻⁸ to 4.0×10⁻⁵ mol L⁻¹ with the detection limit of 1.2×10⁻⁸ mol L⁻¹. The proposed method was successfully used for the determination of myricetin content in tea and fruit juices.     

用BIAcore系统研究西妥昔单克隆抗体与表皮生长因子受体的结合

目的：应用基于表面等离子体共振技术的BIAcore3000系统研究国产西妥昔单克隆抗体（cetuximab）C225与可溶性重组人表皮生长因子受体（EGFR）的结合能力,并与国外已上市的西妥昔单抗Erbitux相比较。方法：在CM5传感器芯片上设置2个通道,一个氨基偶联重组人EGFR作为检测通道,另一个不固定EGFR作为空白参比通道;以HBS溶液作为工作液,流速为10μL／min;活化与封闭芯片;再以10μL／min的流速分别以梯度浓度进样C225和Erbitux,每个浓度级别检测2次;获得结合动态图谱,拟合处理后用软件模块进行参数计算。结果：C225与可溶性重组人EGFR的结合动力学常数K^为4．00×10^8L／mol,KD为2．50×10^-9mol／L;而Erbitux与可溶性重组人EGFR的结合动力学常数KA为4．25×10^8L／mol,KD为2．35×10^-9mol／L。结论：在与可溶性重组人EGFR的结合能力上,C225与Erbitux有相似的结合动力学特性。     

福辛普利对血管紧张素Ⅱ下调大鼠肾小管上皮细胞klotho基因表达的干预作用

目的:研究福辛普利(fosinopril,Fos)对klotho基因表达的影响,探讨Fos对AngⅡ下调klotho基因表达的影响机制。方法:大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)与干预药物共培养。按Fos时间梯度0(对照组),3,6,12,24h和浓度梯度0(对照组),10-9,10-8,10-7,10-6,10-5mol/L分组培养,用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测klotho mRNA表达水平;设A.对照组,B.AngII(10-7mol/L)组,C.Fos(10-5mol/L)组,D.Fos(10-5mol/L)+AngII(10-7mol/L)组,E.Fos(10-5mol/L)干预12h后+AngII(10-7mol/L)共培养组,培养24h,用RT-PCR和免疫组化法检测klotho mRNA和蛋白表达。结果:①Fos对klotho mRNA表达呈时效依赖关系(P0.05),而量效关系不明显(P0.05);②AngII可抑制klotho mRNA和蛋白表达,给予Fos和AngII共同作用,或Fos预先干预后均能抑制AngII下调klotho mRNA表达,组间比较差异具有显著性意义(P均0.05)。结论:Fos对klotho mRNA表达存在时效依赖关系,Fos可能对klotho mRNA和蛋白表达起上调作用,并能抑制AngⅡ对klotho mRNA和蛋白的下调表达。     

BRL-37344对离体人肺脏肺泡液体清除的作用

目的探讨β1肾上腺素能受体激动剂BRL-37344对离体人肺脏肺泡液体清除率（AFC）的作用及其机制。方法首先将（10^-4-10^-8）mol／L的BRL-37344分别灌注到离体人肺脏肺泡腔内,测定AFC的变化。然后将10^-5moL／LBRL-37344分别与α受体阻滞剂酚妥拉明、13。受体阻滞剂阿替洛尔、β2受体阻滞剂ICI-118551、β3受体阻滞剂SR59230A、钠通道阻断剂氨氯吡咪、Na^＋-K^＋-ATP酶阻断剂哇巴因混合后灌注到离体人肺脏肺泡腔内,测定AFC的变化。结果10^-8mol／L的BRL-37344对离体人肺脏肺泡液体清除率没有影响,（10^-7-10^-4）mol／L的BRL-37344能够显著提高离体人肺脏肺泡液体清除率。BRL-37344增加离体人肺脏AFC的作用能够被SR59230A、氨氯吡咪和哇巴因抑制。结论BRL-37344主要通过调节Na^＋／K^＋-ATP酶的活性增加离体人肺脏肺泡液体清除能力,促进肺水肿液的吸收。     

Electrochemiluminescence determination of codeine or morphine with an organically modified silicate film immobilizing Ru(bpy)3(2+).

An ECL approach was developed for the determination of codeine or morphine based on tris(2,2'-bipyridine)ruthenium(II) (Ru(bpy)(3)(2+)) immobilized in organically modified silicates (ORMOSILs). Tetramethoxysilane (TMOS) and dimethyldimethoxysilane (DiMe-DiMOS) were selected as co-precursors for ORMOSILs, which were then immobilized on a surface of glassy carbon electrode (GCE) by a dip-coating process. Ru(bpy)(3)(2+) was immobilized in the ORMOSIL film via ion-association with poly(p-styrenesulphonate). The ORMOSIL-modified GCE presented good electrochemical and photochemical activities. In a flow system, the eluted codeine or morphine was oxidized on the modified GCE and reacted with immobilized Ru(bpy)(3)(2+) at a potential of +1.20 V (vs. Ag/AgCl). The modified electrode was used for the ECL determination of codeine or morphine and showed high sensitivity. The calibration curves were linear in the range 2 x 10(-8)-5 x 10(-5) mol/L for codeine and 1 x 10(-7)-3 x 10(-4) mol/L for morphine. The detection limit was 5 x 10(-9) mol/L for codeine and 3 x 10(-8) mol/L for morphine, at signal:noise ratio (S:N)=3. Both codeine and morphine showed reproducibility with RSD values <2.5% at 1.0 x 10(-6) mol/L. Furthermore, the modified electrode immobilized Ru(bpy)(3)(2+) was applied to the ECL determination of codeine or morphine in incitant samples.