单侧输尿管梗阻法制作大鼠肾间质纤维化模型的改进

目的建立改良的大鼠肾间质纤维化模型。方法用单侧输尿管结扎术建立大鼠肾纤维化模型,动态观察4周。治疗的第12、、3周末检测血肌酐、尿素氮含量等指标,观察肾功能变化;4周末采用HE染色、六胺银(periodic acid-silver methenamine,PASM)染色和丽春红染色观察肾组织病理变化。结果模型组大鼠血肌酐、尿素氮均有明显上升;模型组大鼠大部分肾小球呈玻璃样变,硬化的肾小球周围所属肾小管萎缩、基底膜增厚,部分肾小管消失;少数残存的肾小球肥大并周围肾小管扩张严重;肾间质胶原纤维增生和大量炎细胞浸润。结论该模型有明显的肾间质纤维化特征,且死亡率低,适合肾间质纤维化的实验研究。     

大鼠5/6肾切除慢性肾功能衰竭动物模型的实验研究

观察5/6肾切除大鼠模型中肾功能、肾脏病理改变、肾组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的变化,证明5/6肾切除可制作理想的慢性肾功能衰竭、肾间质纤维化动物模型。方法:大鼠随机分为假手术组(SOR)和5/6肾切除组。随机选取各组中的10只大鼠分别于5/6肾切除术后30、60和90天处死,收集血清与肾组织供生化及病理分析。结果:①5/6肾切除组24小时尿蛋白定量、血尿素氮、血肌酐水平明显高于假手术组(P<0.05)。②残肾的肾重/体重逐渐增加,到术后90天时,几乎接近假手术组大鼠左肾肾重/体重。③5/6肾切除后,残肾肾小球面积和肾小球毛细血管体积增加,肾小球硬化指数(GSI)及肾小管间质损伤评分(TIS)明显高于假手术组(P<0.05)。④免疫组化结果显示,5/6肾切除组肾间质和小管上皮细胞α-SMA表达增加。⑤肾小球面积、GSI、α-SMA表达与血肌酐、蛋白尿水平呈明显正相关性。结论:5/6肾切除可以建立伴慢性肾功能衰竭的肾间质纤维化动物模型。     

STZ诱导糖尿病肾病大鼠模型的建立

目的建立糖尿病大鼠动物模型,探讨其肾脏损害规律。方法用STZ65mg/kg一次性腹腔内注射方式制作糖尿病大鼠模型,设立空白对照组,饲养14周,期间观察大鼠血糖、尿糖及一般情况变化,实验结束时测定血肌酐、尿素氮、尿蛋白、尿白蛋白排泄率,取肾作病理及超微病理检查。结果模型组大鼠出现血肌酐、尿素氮、尿蛋白、尿白蛋白明显升高,出现肾脏肥大,病理显示明显的肾小球、肾小管病变。结论STZ诱导糖尿病大鼠肾脏表现肾小球及小管间质损害,可以用作糖尿病肾病研究的动物模型。     

骨髓间充质干细胞对大鼠急性肾损伤的修复作用

目的:观察外源性骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)对庆大霉素(Gentamycin,GM)诱导的大鼠急性肾损伤是否具有治疗作用,并初探其机制。方法:建立腹腔注射庆大霉素致大鼠急性肾损伤模型实验分为正常对照组、模型组、MSCs治疗组(模型+MSCs)、生理盐水组(模型+生理盐水)。于不同处理后4d分别检测血尿素氮(BUN)和肌酐(Scr)水平,观察肾组织病理改变,免疫印迹及RT-PCR法检测肾组织肝细胞生长因子(Hepatocyte growth factor,HGF)水平。结果:模型组大鼠的BUN及Scr较正常对照组显著升高,且肾小管组织病理损伤严重;而MSCs治疗组大鼠的BUN及Scr水平较生理盐水组显著降低,肾小管组织病理损伤明显减轻。此外,促肾小管损伤修复的肝细胞生长因子(HGF)表达在MSCs治疗组显著高于生理盐水组。结论:MSCs输注可促进庆大霉素所致急性肾小管损伤的修复,改善肾功能,其作用机制可能是与上调肾组织中肝细胞细胞生长因子的表达有关。     

绞股蓝多糖对糖尿病肾病大鼠肾功能的保护作用及其机制研究

目的:探讨绞股蓝多糖对糖尿病大鼠肾功能的影响及其保护的可能机制。方法:采用大鼠高脂高糖饲料结合腹腔注射链脲佐菌素建立2型糖尿病模型。灌胃给予绞股蓝多糖8周后,测定大鼠空腹血糖(FBG),血清肌酐、血清尿素氮、24 h尿量及尿蛋白等指标;组织病理切片观察肾形态,肾小球体积;Western blot法检测肾皮质NF-κB的表达。结果:绞股蓝多糖(GPS)可剂量依赖性的降低DN组的FBG、血肌酐、24 h尿量和尿蛋白;但血尿素氮模型组与GPS组无统计学差异;中、高剂量GPS治疗后,肾脏指数较模型组明显降低(P0.05);与模型组(149.8±12.2%)比较,高剂量GPS可抑制肾小球体积肥大至108.9±9.6%。进一步研究发现,GPS可剂量依赖性的降低DN组肾脏NF-κB蛋白的表达,高、中剂量组水平与模型组相比有统计学差异(P0.05)。结论:绞股蓝多糖对实验性糖尿病肾病具有保护作用,其机制可能与抑制肾炎症相关通路NF-κB的表达有关。     

IgA肾病组织中巨噬细胞浸润与肾间质纤维化、EMT的关系及临床意义

目的探讨IgA肾病组织中巨噬细胞与肾小管间质纤维化(Tubulointerstitial fibrosis,TIF)及上皮细胞间充质转化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)的关系及其临床意义。方法采用HE、PAS、PASM、Masson染色评估56例IgA肾病肾穿刺组织肾小管间质病理变化,根据肾小管萎缩及间质纤维化程度分为轻度、中度、重度三组,另设对照组5例,来自正常肾脏组织。采用免疫组织化学方法检测CD68、CD206及EMT相关蛋白TGF-β1、Vimentin、SMA、E-Cadherin的水平,并收集患者详细临床资料。结果 CD68、CD206蛋白在TIF重度组中的水平高于中度组,在TIF中度组中的水平高于TIF轻度组;CD68阳性巨噬细胞、CD206阳性巨噬细胞计数与TGF-β1、Vimentin及SMA蛋白的水平正相关;与E-Cadherin蛋白的水平呈负相关;与肾功能指标血肌酐、尿素氮及尿蛋白呈正相关。TGF-β1、Vimentin及SMA的水平与肾小管间质纤维化程度及肾功能指标血肌酐、尿素氮及尿蛋白正相关;E-Cadherin蛋白的表达与肾小管间质纤维化程度及肾功能指标血肌酐、尿素氮及尿蛋白呈负相关。结论巨噬细胞可能参与了IgA肾病的肾小管间质损伤,尤其是TGF-β1诱导的肾小管EMT过程。     

替米沙坦改善糖尿病大鼠肾脏功能机制研究

目的研究替米沙坦对糖尿病大鼠24 h尿蛋白、血肌酐、肌酐清除率(Ccr)和血清尿素氮(BUN)等相关代谢指标的影响,且应用基因芯片探讨替米沙坦改善肾功能的机制。方法 30只SD大鼠,其中随机选取10只为正常对照组(给予等体积生理盐水)。选用20只大鼠,采用STZ法制备糖尿病模型,而后将16只造模成功的糖尿病大鼠随机分为替米沙坦治疗组(给予10 mg/kg/d的替米沙坦,n=8)和糖尿病模型组(给予等体积生理盐水,n=8)。三组大鼠均连续灌胃12周。每4周测定大鼠空腹血糖(FBG)和体重。12周末测定大鼠24h尿蛋白、尿肌酐、血肌酐和BUN水平。12周末处死大鼠,取肾脏组织进行基因芯片实验,并运用real time PCR进行验证。结果糖尿病模型组24h尿蛋白(P<0.01)、血肌酐(P<0.05)和BUN(P<0.01)比对照组显著升高,Ccr较对照组显著降低(P<0.05)。替米沙坦能改善糖尿病大鼠24h尿蛋白、血肌酐、Ccr和BUN水平。基因芯片结果显示替米沙坦组较糖尿病模型组有1541个基因发生显著改变,其中554个上调,987个下调。基因富集分析显示这些差异表达基因集中在氧化磷酸化通路和PPAR通路。Real time PCR证实替米沙坦组较糖尿病模型组ATP合成酶β亚基(Atp5b)、细胞色素c氧化酶亚基VIc(Cox6c)和NADH脱氢酶(辅酶Q)铁硫蛋白3(Ndufs3)基因显著下调。结论替米沙坦能有效改善糖尿病大鼠肾脏功能。替米沙坦的肾脏改善作用可能是通过线粒体氧化磷酸化通路和PPAR-γ通路调节。     

IL-17、IL-8、IL-10水平与早期糖尿病肾病的关系

目的观察糖尿病大鼠肾脏早期IL-17、IL-8、IL-10水平的变化,并分析糖尿病大鼠肾脏早期IL-17、IL-8、IL-10水平与糖尿病肾病的关系。方法健康雄性SD大鼠被随机分为正常对照组和糖尿病模型组,模型组以一次性腹腔注射STZ诱导糖尿病模型;造模成功后在1周、2周、4周、6周,12周时间点分别取两肾,称量两肾的重量及大鼠体重,常规方法检测血清生化指标和尿蛋白含量,ELISA检测IL-17、IL-8、IL-10水平。分析IL-17、IL-8、IL-10水平与糖尿病肾病的关系。结果糖尿病各组大鼠IL-17、IL-8随时间逐渐升高,IL-10随时间逐渐降低,IL-17、IL-8与血糖、CRP、肾脏肥大指数、24小时尿蛋白、肌酐、血尿素氮呈正相关,IL-10与血糖、CRP、肾脏肥大指数、24小时尿蛋白、肌酐、血尿素氮呈负相关,IL-17、IL-8与IL-10呈负相关。结论 IL-17、IL-8可能促进糖尿病大鼠肾病的发展,IL-10可能抑制糖尿病大鼠肾病的进展。     

骨髓间充质干细胞对大鼠急性肾损伤的修复作用

目的：观察外源性骨髓间充质干细胞（Mesenchymal stem cells,MSCs）对庆大霉素（Gentamycin,GM）诱导的大鼠急性肾损伤是否具有治疗作用,并初探其机制。方法：建立腹腔注射庆大霉素致大鼠急性肾损伤模型。实验分为舡常对照组、模型组、MSCs治疗组（模型＋MSCs）、生理盐水组（模型＋生理盐水）。于不同处理后4d分别检测血尿素氮（BUN）和肌酐（Scr）水平,观察肾组织病理改变,免疫印迹及RT-PCR法检测肾组织肝细胞生长因子（Hepatocyte growth factor,HGF）水平。结果：模型组大鼠的BUN及Scr较正常对照组显著升高,且肾小管组织病理损伤严重;而MSCs治疗组大鼠的BUN及Scr水平较生理盐水组显著降低,肾小管组织病理损伤明显减轻。此外。促肾小管损伤修复的肝细胞生长因子（HGF）表达在MSCs治疗组显著高于生理盐水组。结论：MSCs输注可促进庆大霉素所致急性肾小管损伤的修复,改善肾功能,其作用机制可能是与上调肾组织中肝细胞细胞生长因子的表达有关。     

单次尾静脉注射法阿霉素大鼠肾病模型的建立

目的建立阿霉素大鼠肾病模型,并观察模型的动态变化。方法 26只Wistar雄性大鼠随机分为模型组(13只)和空白组(13只),模型组单次尾静脉注射阿霉素6.2 mg/kg,空白组注射等容积生理盐水。检测连续10周12 h尿蛋白定量、终末血生化指标,光镜、电镜下观察各组大鼠肾脏病理改变。结果模型组12 h尿蛋白定量造模后1周与空白组差异有显著性(P0.01),第5周达到高峰;血总蛋白、白蛋白均低于空白组,甘油三酯、胆固醇、血尿素氮均高于空白组(均P0.05),血肌酐差异无显著性(P=0.64)。肾脏病理改变:第5周为微小病变型,第10周为局灶性节段性肾小球硬化。结论单次尾静脉注射6.2 mg/kg阿霉素,可以成功建立渐进性的大鼠肾病综合征模型。     

不同干预方式预防大鼠造影剂肾病的比较研究

目的:对比等渗氯化钠水化、碳酸氢钠水化、大剂量他汀、小剂量他汀、大剂量他汀加等渗氯化钠水化五种干预方式对大鼠造影剂肾病的预防效果,探讨各自的优势及不足,为临床预防造影剂肾病提供可借鉴的方法。方法:选取SD大鼠105只,随机分为7组,每组15只。A组:均为肾功能正常的健康大鼠;B组:即对照组,未给予任何干预方法;L组:采用等渗氯化钠水化干预;T组:采用碳酸氢钠水化干预;S1组:服用大剂量他汀;S2组:服用小剂量他汀;(S1+L)组:服用大剂量他汀加等渗氯化钠水化。干预48小时后测定各组大鼠的尿素氮(BUN)及肌酐(Cr)水平,并与与未给予干预组进行比较。结果:①S1、S2、(S1+L)三组的BUN和Cr水平均低于B组、L组及T组,差异具有统计学意义(P0.05);②S1组、S2组及(S1+L)组之间相互比较,BUN和Cr水平无明显差异(P0.05);③L组与T组之间比较BUN和Cr水平,差别无统计学意义(P0.05)。结论:他汀类药物预防造影剂肾病能够起到一定的作用,但其最终机制尚未明确,我们需在今后的临床实践中进一步研究证实。     

维生素E在青年和老年大鼠肾脏缺血/再灌注损伤中的作用

目的:探讨维生素E(VE)在青年和老年大鼠肾缺血/再灌注损伤(RI/RI)中的作用。方法:采用夹闭双侧肾动、静脉45min后恢复血流的方法制作RI/RI模型,测定血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)浓度,免疫组化检测肾皮质热休克蛋白70(HSP70)表达。流式细胞术检测肾皮质细胞凋亡率。结果:缺血/再灌注(I/R)后BUN、Scr含量明显升高,老年I/R组MDA含量高于青年I/R组,SOD含量低于青年IR组,HSP70、NO以及肾皮质细胞凋亡率高于control组;VE可显著降低RI/RI大鼠BUN、Scr、MDA、iNOS水平,升高NO和SOD水平,增加HSP70的表达,降低肾皮质细胞凋亡率。结论:VE可通过促进肾组织HSP70的表达,增加NO和SOD水平,提高大鼠体内清除自由基的能力,从而对青、老年大鼠肾缺血/再灌注损伤(RI/RI)起到一定的保护作用。     

螺内酯对单肾切除糖尿病大鼠肾脏保护作用研究

目的：研究螺内酯对单肾切除糖尿病SD大鼠的肾脏保护作用及机制。方法：48只雄性SD大鼠随机分为单肾切除对照组C组、单肾切除糖尿病模型组D组、单肾切除糖尿病螺内酯干预组S组（50mg/kg/day灌胃）。给药6周后观察各组大鼠生化指标改变,肾组织形态学改变,RT-PCR及Western Blot检测肾组织中HGF水平的变化。结果：给药6周后,D组与C组相比,血糖、24h尿蛋白定量、尿素氮、血肌酐和肾重/体重显著增高（P〈0.05）,螺内酯治疗后可降低糖尿病大鼠的24h尿蛋白定量和肾重/体重,但对其它指标无明显影响;形态学显示,D组与C组相比肾小球系膜区细胞外基质增多及系膜细胞增生,肾小球基底膜增厚,足细胞足突融合、消失;螺内酯治疗后上述病理改变均有不同程度的减轻;RT-PCT、Western Blot结果显示D组和S组HGF表达均增加（P〈0.05）,而D组HGF表达明显低于螺内酯治疗组。结论：螺内酯可能通过上调HGF的水平从而起到保护糖尿病大鼠肾脏作用。     

丹参多酚酸盐联合凯时注射液治疗慢性肾功能哀竭的临床疗效观察

目的：观察丹参多酚酸盐联合凯时注射液治疗慢性肾功能哀竭（CRF）的临床疗效,探讨提高CRF临床疗效的措施。方法：选择2010年5月至2012年11月我院收治的CRF患者94例,在患者知情同意的前提下,将其随机均分为对照组（n=47例）和观察组（n=47例）,对照组给予常规治疗措施,观察组在以上治疗基础上加用丹参多酚酸盐联合凯时注射液治疗,治疗4周后比较两组患者肾功能指标、临床疗效及不良反应的发生情况。结果：治疗前,两组患者的BUN、Scr和Ccr比较,差异无统计学意义（均P〉0．05）;治疗4周后,两组的BUN、Scr水平均较治疗前显著下降,Ccr水平较治疗前显著升高,且观察组BUN、Scr水平明显低于对照组,而Ccr水平明显高于对照组,差异均具有统计学意义（均P〈0．05）。两组的临床总有效率分别为76．6％和91．5％,观察组显著高于对照组,差异具有统计学意义（均P〈0．05）。治疗过程中,两组不良反应的发生率比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：丹参多酚酸盐联合凯时注射液辅助治疗CRF可提高临床疗效,且安全性高。     

Ang Ⅱ拮抗剂对慢性肾衰大鼠肾血流量和肾内氧耗的影响

目的观察血管紧张素II(AngⅡ)拮抗剂对5/6(ablation/infarction,A/I)肾切除诱导慢性肾衰竭(CRF)大鼠肾功能、肾血流量及肾内氧耗的影响。方法制备5/6(A/I)肾切除诱导慢性肾衰大鼠模型,设正常组(A组,n=14只),模型组(B组,n=14只),AngⅡ拮抗剂治疗组(氯沙坦钾联合福辛普利钠)(C组,n=14只)。给予相应干预,疗程60 d。分别测量尾动脉收缩压(SBP)、舒张压(DBP),检测大鼠尾静脉血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血红蛋白(Hb),计算内生肌酐清除率(Ccr)。干预60 d后,检测肾血流量(RBF)、腹主动脉和肾静脉血气(AABG and RVBG),左肾静脉压(RVpO2),计算残余肾内氧耗(QO2/TNa)及观察残肾组织病理变化。结果 (1)造模后与A组比较,B、C两组的Scr、BUN和尾动脉SBP、DBP显著增加(P0.01),Ccr、Hb显著降低(P0.01),提示造模成功。(2)干预后与B组比较,C组的Scr、尾动脉SBP、DBP、QO2/TNa明显下降(P0.01),BUN降低(P0.05),Hb、Ccr、RVpO2显著升高(P0.01),RBF升高(P0.05)。(3)残肾组织病理形态学变化显示,C组的肾组织病理变化明显减轻,优于B组。结论 AngⅡ拮抗剂可以增加慢性肾衰大鼠肾血流量,降低肾内氧耗,改善肾功能及减轻肾组织病理变化,其肾脏保护作用机制可能与其调节细胞能量代谢,改善肾内氧耗有关。     

兔慢性肾功能衰竭模型的建立与评价

目的建立兔慢性肾功能衰竭模型,为干细胞移植治疗和相关研究奠定基础。方法普通级大耳白兔随机分为正常对照组和单侧输尿管结扎（unilateral ureteral obstruction,UUO）组。UUO组于输尿管结扎后2、4、6、8周进行血生化肾功能指标检测,并取肾组织观察肾脏病理学改变,通过SPECT动态观察肾小球滤过率的变化,采用免疫组织化学方法观察肾组织转化生长因子-β1（TGF-β1）的表达情况。结果①UUO组术后第2周,出现明显的血肌酐升高,尿素氮术后第8周开始升高（P〈0.01）。②UUO组术后第4周,肾脏组织出现了早期间质纤维化的病理改变,术后第8周肾小球开始出现硬化,间质纤维化明显,皮质明显变薄。术后第12周,肾小球硬化比例增加,肾小管玻璃样变性,间质纤维化进一步加重（P〈0.05）。③SPECT动态观察肾小球滤过率,UUO组第4周GFR值比正常对照组降低,到第8周时,GFR值进一步下降,结扎侧肾脏功能降低甚至丧失。④免疫组织化学染色显示,TGF-β1在术后第4、8、12周均明显增强,并且各时间点表达均有显著差异（P〈0.05）。结论单侧输尿管结扎法成功制作比较稳定的慢性肾功能不全模型,UUO后第8周符合肾脏间质纤维化模型标准。     

柴半六合汤对慢性肾衰竭模型大鼠血清胃泌素、胃动素及生长抑素的影响(英文)

目的:观察柴半六合汤对慢性肾衰竭(CRF)模型大鼠血清胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)、生长抑素(SS)水平的影响,探讨其作用机制。方法:采用5/6肾切除的方法复制CRF大鼠模型,设立假手术组、模型组、柴半六合汤高剂量组、低剂量组、尿毒清对照组,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)及生长抑素(SS),取胃粘膜行HE染色,光镜下观察其组织病理变化。结果:用药各组大鼠治疗后Scr、BUN低于模型组;柴半六合汤高剂量组大鼠Scr、BUN、GAS、MTL低于低剂量组、SS高于低剂量组;柴半六合汤高、低剂量组大鼠GAS、MTL低于尿毒清对照组、SS高于尿毒清对照组。结论:柴半六合汤通过降低CRF模型大鼠GAS、MTL水平、SS升高水平,改善胃肠道症状。     

缬沙坦胶囊联合肾炎康复片治疗糖尿病微量蛋白尿的研究

目的：研究缬沙坦联合肾炎康复片治疗糖尿病微量蛋白尿的疗效及安全性。方法：采用随机、对照原则将60例有微量蛋白尿期糖尿病患者分为缬沙坦对照组（A组）和缬沙坦联合肾炎康复片治疗组（B组）,每组各30例。A组给予缬沙坦160mg,每日1次口服;B组给予肾炎康复片（薄膜衣片）每次5粒,每日3次口服和缬沙坦160mg,每日1次口服。疗程均为12w。比较2组治疗前、治疗第4、8和12w尿白蛋白排泄率（UAER）及治疗前、后肾功能、24h尿蛋白定量等生化指标的变化及肌酐50％倍增率。结果：2组治疗后血压、Scr、CRP指标均低于治疗前（P〈0．05）,而血FBG、PBG、HbAlc、Alb、BUN、24h尿蛋白定量指标变化无差异（P〉0．05）;B组治疗后与对照组比较,B组有较低Scr、CRP值（P〈0．05）,而余生化指标及血压变化无差异（P〉0．05）,B组第8、12w时尿蛋白排泄率下降幅度低于A组（P〈0．05）,B组治疗中12w的肌酐50％倍增率低于A组（P〈0．05）。结论：缬沙坦胶囊联合肾炎康复片治疗糖尿病微量蛋白尿是有效安全的。     

罗格列酮和强的松对博来霉素诱导大鼠肺纤维化中FIZZ1表达的影响

目的：观察Fizzl在肺组织中的动态表达及其意义,并比较罗格列酮与强的松对Fizzl表达的影响。方法：90只雄性SD大鼠随机分为对照组,模型组,强的松干预组,罗格列酮干预组,强的松＋罗格列酮干预组,模型组和干预组大鼠气管内一次性注入博来霉素构建大鼠肺纤维化模型,对照组给予等量生理盐水。造模24小时后各干预组给予相应药物灌胃。各组动物于7、14、28d随机处死6只,测肺系数,取肺组织病理切片行HE和Masson染色,观察肺泡炎和纤维化程度,测肺组织羟脯氨酸含量,免疫组化法检测Fizzl在肺组织中的表达情况。结果：干预组各时期肺纤维化程度均较模型组轻。Fizzl表达呈动态性变化,第7天表达最高,14d,28d表达减弱。干预组各时期Fizzl表达水平较模型组降低,其中罗格列酮和强的松联合干预组早期对Fizz的下调水平更大。结论：Fizzl的表达上调可能参与博来霉素诱导的肺纤维化形成;罗格列酮、强的松均可下调Fizzl表达减轻博来霉素诱导的肺纤维化程度,减少肺组织胶原的沉积,提示Fizzl可成为肺纤维化治疗的新靶点,罗格列酮和强的松联用治疗较单用强的松效果更好,对Fizzl的下调水平更大。