双歧杆菌对免疫抑制小鼠白色念珠菌感染的保护作用

为探讨双歧杆菌对白色念珠菌感染的保护作用,作者采用环磷酰胺腹腔注射方法复制了免疫抑制小鼠模型,研究白色念珠菌感染前后两歧双歧杆菌灌饲的保护作用。结果表明：白色念珠菌感染前灌饲两歧双歧杆菌能有效地抑制白色念珠菌在小鼠肠道中的定植,并且保护肠粘膜的完整性。对其机理的研究认为,两歧双歧杆菌可能是通过调整肠道菌群平衡、增加肠道中生理菌群的数量、降低肠道ｐＨ值、以及产生抗菌物质等途径发挥保护作用     

中药903Ⅱ号对由抗生素引起菌群失调患者肠道白色念珠菌的影响

本实验对临床上由抗生素引起菌群失调患者用中药９０３Ⅱ号进行了治疗,在治疗前后分别检测患者肠道白色念珠菌的数量,结果发现菌群失调患者肠道内白色念珠菌数量明显增高,服药后菌群失调得到调整,白色念珠菌数量显著下降。休外实验证明,中药９０３Ⅱ号对白色念珠菌无抑制和杀灭作用。本实验提示,中药９０３Ⅱ号能通过扶植肠道正常菌群间接影响肠道内白色念珠菌。     

双歧杆菌脂磷壁酸对深部白色念珠菌感染小鼠生存状态的影响

目的观察双歧杆菌脂磷壁酸(BLTA)对深部白色念珠菌感染小鼠生存状态的影响。方法通过尾静脉注射白色念珠菌,建立正常免疫力及免疫力低下小鼠深部白色念珠菌感染模型,观察不同剂量BLTA处理对小鼠体重变化、生存时间以及肾组织真菌负荷量的影响。结果深部白色念珠菌感染小鼠经BLTA处理后,生存状态有所改善,体重下降减慢。对于正常免疫力小鼠,BLTA150组的生存率明显高于未处理组(P0.01);而对于免疫力低下小鼠,BLTA100组和BLTA150组小鼠的生存率明显高于未处理组(P0.01)。无论免疫力正常还是免疫力低下小鼠,BLTA100组和BLTA150组的肾组织白色念珠菌菌落计数与未处理组比较均显著降低(P0.01)。结论 BLTA能够有效地改善深部白色念珠菌感染小鼠的生存状态,而且这种作用与BLTA呈剂量依赖关系。     

马齿苋多糖对肠道微生态失调小鼠的调整作用研究

目的研究应用马齿苋多糖对肠道微生态失调小鼠进行调整治疗,达到从微生态学角度防治感染的目的。方法应用林可霉素灌胃建立肠道微生态失调小鼠模型,然后用马齿苋多糖进行治疗,同时设正常对照组、阳性对照组和阴性对照组,于给药7 d后处死小鼠,进行肠道菌群定量、肠内容物挥发性脂肪酸检测及肠黏膜电镜观察。结果林可霉素灌胃3 d后,小鼠肠道菌群失调,肠内容物挥发性脂肪酸含量明显下降,肠黏膜损伤严重。持续7 d治疗后,治疗组小鼠肠道双歧杆菌和乳酸杆菌数量明显上升,肠内容物挥发性脂肪酸含量明显上升,损伤的肠黏膜基本修复。结论应用林可霉素可以成功建立肠道微生态失调动物模型;马齿苋多糖具有扶植肠道正常菌群生长,调整菌群失调,防治感染的作用,是理想的中药微生态调节剂。     

大蒜素对白色念珠菌感染小鼠神经内分泌免疫系统调节作用的研究(英文)

本研究旨在探讨大蒜素对白色念珠菌感染小鼠神经内分泌免疫系统(NEI)的调节作用。将小鼠随机分为三组:正常对照组、模型组、大蒜素组。除正常对照组外,模型组、大蒜素组分别建立小鼠白色念珠菌感染模型。大蒜素组小鼠给予大蒜素灌胃,其余组给予等量生理盐水。连续用药14 d后,各组小鼠取血测定促肾上腺激素(ACTH)、皮质酮(CORT)、β-内啡肽(β-EP)、5-羟色胺(5-HT)的水平,测定胸腺指数及脾脏淋巴细胞增殖活性。实验结果显示,模型组小鼠NEI功能发生紊乱,与正常对照组相比,ACTH、CORT、β-EP水平均明显升高,5-HT、胸腺指数及脾脏淋巴细胞增殖活性均明显下降,差异有显著性(P<0.05)。而大蒜素组小鼠ACTH、CORT、β-EP水平较之模型组明显下降,5-HT、胸腺指数及脾脏淋巴细胞增殖活性明显升高,差异有显著性(P<0.05)。综上所述,本研究提示大蒜素对白色念珠菌感染小鼠紊乱的NEI具有明显的调节作用。     

中药蛴螬多肽Probrelin抗白色念珠菌活性研究

[目的] 研究蛴螬多肽Probrelin对白色念珠菌的抗菌活性。[方法] 采用肉汤稀释法测定蛴螬多肽Probrelin对正常菌株及临床耐药菌株的最小抑菌浓度,同时结合平板计数法测定最小杀真菌浓度;通过不同浓度多肽处理后经平板计数绘制时间-杀菌动力学曲线;通过PI吸收实验检测多肽对白色念珠菌细胞膜完整性的影响;通过核酸阻滞实验检测多肽与核酸间是否具有结合作用;通过扫描电子显微镜检测多肽对白色念珠菌形态的影响;通过结晶紫染色法检测多肽对生物膜生成及成熟生物膜的影响;通过显微镜观察多肽对白色念珠菌菌丝形成的影响;通过棋盘法检测多肽与抗真菌药物间的相互效应;通过小鼠皮下感染模型检测多肽在生理条件下的抗白色念珠菌活性。[结果] 蛴螬多肽Probrelin对正常菌株及临床耐药菌株的最小抑菌浓度均为100 μg/mL,最小杀真菌浓度为100-200 μg/mL,且对白色念珠菌的杀菌动力学具有时间和浓度依赖性;该多肽以浓度依赖性的方式影响白色念珠菌细胞膜的完整性,并通过破坏白色念珠菌细胞壁的结构影响其形态,但与核酸间不具有结合作用;该多肽既可抑制白色念珠菌生物膜的形成,又可清除成熟生物膜,同时还可抑制白色念珠菌菌丝的形成;该多肽与抗真菌药物Clotrimazole间具有协同效应;在小鼠皮下感染模型中,该多肽可以有效杀灭白色念珠菌,进而抑制感染。[结论] 蛴螬多肽Probrelin对白色念珠菌具有良好的抑制杀灭活性,可以作为新的药物分子或模板分子用于抗白色念珠菌药物的研发。     

经肠道播散诱导内源性感染小鼠模型的建立及评价

目的建立经肠道播散诱导发生内源性感染的小鼠模型,为研究肠道微生态与内源性感染的相关机制提供可靠的实验模型。方法24只ICR雌性小鼠随机分为模型组A、模型组B和对照组C。模型组A给予广谱抗生素溶液口服破坏肠道正常菌群后尾静脉注射5-氟尿嘧啶(5-FU)进行免疫抑制。在模型组A的基础上给予白假丝酵母菌灌胃引入机会性致病菌即为模型组B。对照组C同等方法给予生理盐水处理。实验过程中持续观察小鼠粪便菌群变化,平板计数法检测小鼠组织载菌量,HE染色观察小鼠肺、肝、盲肠和大肠组织病理变化,荧光定量PCR法观察小鼠肠道主要菌群定量变化。结果实验终点时模型组A小鼠组织器官均出现细菌感染,模型组B小鼠表现为细菌和真菌混合感染。两模型组小鼠肺和肝脏组织器官均表现为典型的炎症表现,而盲肠和大肠表现为黏膜炎症和屏障完整性被破坏。肠道菌群定量结果显示两模型组肠道主要菌群结构发生紊乱,肠道定植抗力下降,B/E值<1。结论在小鼠肠道菌群紊乱和免疫抑制的条件下,肠道致病菌或机会致病菌突破肠道黏膜屏障引起组织器官感染,该模型能够为从肠道微生态方面预防及控制内源性感染的研究提供可靠的模型基础。     

抗生素所致腹泻大鼠肠屏障功能损伤及乳酸杆菌保护机制的研究

目的探讨抗生素对所致腹泻大鼠肠道屏障功能、肠道菌群结构和肠道细菌移位的影响及乳酸杆菌制剂的保护机制。方法采用细菌培养法动态测定抗生素所致腹泻大鼠肠道菌群变化及肠系膜淋巴结、肝脏、脾脏和结肠组织的移位细菌量;应用光镜和电子显微镜观察肠黏膜组织超微结构变化。结果应用抗生素可致大鼠腹泻,肠道菌群失调,肠黏膜组织受损,发生肠道细菌移位。大肠埃希菌攻击可加重肠道菌群失调和肠黏膜损伤程度,促发细菌移位发生。乳酸杆菌可扶正肠菌群结构,修复损伤的肠黏膜,抑制肠细菌移位发生。结论阐明了抗生素、肠黏膜屏障功能、肠道菌群结构和肠道细菌移位间的互为因果,相互影响的关系。微生态制剂在维持机体微生态平衡、修复肠黏膜方面具有保护作用。     

白色念珠菌在临床标本中的分布

白色念珠菌在临床标本中的分布大连医科大学附属一院大连１１６０２１王永杰大连市友谊医院宋丽娟白色念珠菌常存在于正常人的口腔、皮肤、肠道及阴道粘膜。患者由于广谱抗生素、激素细胞毒性药物的使用,改变了机体对感染的防御能力或机体屏障被破坏,的条件下感染而发病...     

PCR法在小鼠早期念珠菌病诊断中的应用研究

目的探讨PCR法对早期念珠菌病的诊断价值。方法采用Biospin真菌基因组DNA提取试剂盒提取感染小鼠全血白色念珠菌DNA,并与血培养和脾脏、肾脏组织病理检查结果比较。结果白色念珠菌标准菌株和两株临床分离菌株经PCR测定后,均可扩增到分子量大小约为500bp的特异性条带。在小鼠早期念珠菌病的感染中,运用PCR法较血培养和组织病理检查敏感性高。结论PCR法是一种快速、灵敏且特异性高的检查手段,为临床早期检测真菌病提供实验依据。     

Protection of mice from lethal endogenous Candida albicans infection by immunization with Candida membrane antigen

The protective effects of immunization with Candida membrane antigen (CMA) on a systemic infection originating from intestinally colonized Candida albicans were examined. The colonization of orally inoculated C. albicans in the intestinal tract was established in BALB/c mice that had been concomitantly treated with oral doses of antibacterial drugs. In these animals, a systemic dissemination of C. albicans with fatal outcome was induced by a repeated dosing of prednisolone. In this endogenous infection model, the effects of immunization by CMA on the infection were examined. CMA-immunized mice showed a longer lifespan than unimmunized mice. The protective effect of CMA immunization in immunosuppressed mice was also measured by a decrease in body weight loss after treatment with prednisolone and in the number of viable Candida cells in the target organs, the kidneys and livers. However, the CFU of C. albicans in the intestinal tract was not significantly lowered. These results suggest that CMA immunization inhibited the dissemination of systemic Candida infection from the intestinal tract induced by treatment with prednisolone.     

白念珠菌临床分离调查及基因分型研究

目的 了解白念珠菌临床分离情况,并探讨其药敏结果与基因分型的相关性.方法 回顾性分析本院2011年3～11月间临床分离白念珠菌分布及耐药性;随机选取232株,采用PCR方法扩增白念珠菌25S rDNA基因内含子区进行基因分型研究;采用ATB真菌药敏试剂条进行药敏分析;统计分析药敏结果与基因分型的相关性.结果 期间共检出酵母样真菌973例,占病原菌阳性样本数比率为15.7％ (973/6196);其中分离白念珠菌562株,占58％ (562/973),主要分布科室为呼吸科(39.1％)、老年科(13.2％)、ICU(7.7％)、神经内科(7.5％)、免疫科(6.0％)以及其他科室(26.5％);标本类型以下呼吸道为主(81.7％),其次为尿路(9.4％)、血液(1.8％)等.对氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑及伏立康唑的耐药率分别为0.9％、0％、1.4％、1.6％和1.1％.随机选取的232株白念珠菌经PCR方法可分为3型:A型125株,B型96株,C型11株.各型在5种药物的耐药性上并无差异.结论 临床分离酵母样真菌以白念珠菌为主,感染部位以下呼吸道为主;临床分离株对5种抗真菌药物敏感度较高,主要基因型为A和B型,不同基因分型间药敏结果并无统计学差异.     

大鼠白念珠菌支气管肺感染时肺组织Toll样受体2的表达及意义

目的 探讨Toll样受体2(TLR2)在白念珠菌支气管肺感染大鼠肺组织模型中的表达及意义.方法 建立白念珠菌支气管肺感染大鼠模型,观察感染后肺组织病理形态学改变,采用免疫组织化学法观察感染后不同时间(第3天、第7天)白念珠菌支气管肺感染大鼠肺组织TLR2的表达,并与未感染组进行比较.结果 大鼠白念珠菌支气管肺感染后肺组织TLR2表达水平明显升高.结论 白念珠菌支气管肺感染肺组织TLR2表达增高可能参与感染的炎症反应.     

Low dose of Concanavalin-A enhances innate immune response and prevents liver injury in mice infected with Candida albicans

The mechanisms through which Candida albicans is recognized by immune cells and how it triggers host defence are not completely understood. In this study, we evaluated the effect of Concanavalin-A on the clearance of C. albicans by infected mice and their production of proinflammatory cytokine tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha). Subgroups of 5 animals were pretreated with Con-A (250 mug mL(-1) PBS) and after 96 h were infected intraperitoneally with 10(7) cells of C. albicans CR15 (an isolate from a HIV+ person); 30 min, 2, 6, 24 or 72 h after infection the mice were sacrificed. Phagocytosis of C. albicans by peritoneal macrophages increased 30 min after infection in mice pretreated with Con-A. The liver presented the greatest number of CFUs, and this number was reduced by pretreatment with Con-A. Control animals infected with C. albicans presented a significant increase in plasmatic alanine aminotransferase, which was not observed in mice treated with Con-A. Two hours after infection the production of TNF-alpha in the liver of mice pretreated with Con-A was significantly increased. These results suggest that a single dose of Con-A caused a beneficial modulating action of the inflammatory response during infection with C. albicans.     

Role of TLR1 and TLR6 in the host defense against disseminated candidiasis

Toll-like receptor-1 (TLR1) and TLR6 are receptors of the TLR family that form heterodimers with TLR2. The role of TLR1 and TLR6 for the recognition of the fungal pathogen Candida albicans was investigated. TLR1 is not involved in the recognition of C. albicans, and TLR1 knock-out (TLR1-/-) mice showed a normal susceptibility to disseminated candidiasis. In contrast, recognition of C. albicans by TLR6 modulated the balance between Th1 and Th2 cytokines, and TLR6 knock-out mice displayed a defective production of IL-10 and an increased IFN-gamma release. Production of the monocyte-derived cytokines tumor necrosis factor, IL-1, and IL-6 was normal in TLR6-/- mice, and this was accompanied by a normal susceptibility to disseminated candidiasis. In conclusion, TLR6 is involved in the recognition of C. albicans and modulates the Th1/Th2 cytokine balance, but this results in a mild phenotype with a normal susceptibility of TLR6-/- mice to Candida infection.     

阴道白色念珠菌致病株与携带株两相性与毒力关系研究

目的探讨阴道白色念珠菌致病株和携带株菌丝相和酵母相分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶活性以及与其毒力的关系。方法分别采用牛奶平板和卵黄培养基法检测白色念珠菌致病株和携带株200株分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶的活力,分别将致病产酶株的菌丝相和孢子相菌悬液（5×10^6CFU／ral）注射小鼠尾静脉,1个月内观察小鼠死亡率及平均存活时间,以平均存活时间评价菌株毒力。结果白色念珠菌致病株和携带株分泌型酸性蛋白酶检出率分别为83．3％和35．7％（P〈0．01）;细胞外磷脂酶阳性率分别为87．5％和39．3％（P〈0．01）。动物实验结果表明,白色念珠菌致病株菌丝相分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶的活力均显著高于孢子相（P〈0．01,P〈0．005）;注射菌丝相白色念珠菌的小鼠死亡率高于注射孢子相的小鼠（P〈0．01）,且平均存活期短于注射孢子相的小鼠（P〈0．01）。结论分泌型酸性蛋白酶和细胞外磷脂酶是白色念珠菌重要毒力因子,致病株毒力高于携带株,菌丝相毒力高于酵母相。     

LAAE-14, a new anti-inflammatory drug, increases the survival of Candida albicans-inoculated mice

LAAE-14, a lipidic acid-amido ether derivative, has been recently described as a new anti-inflammatory drug. We have studied the effect of treatment with this compound on the susceptibility of mice to in vivo experimental Candida albicans infection. ICR mice orally treated with LAAE-14 (25 mg kg(-1)) and experimentally intravenously infected showed a significantly increased survival as compared to control mice. In vitro, the compound did not inhibit the growth of C. albicans yeast cells or the yeast-to-hyphal transition. The in vitro production of prostaglandin E2 by peritoneal macrophages in response to the yeasts and hyphae of C. albicans was significantly decreased upon treatment with LAAE-14, in a dose-dependent manner. Thus, reduced prostaglandin production during fungal infection could be an important factor in controlling fungal colonisation and infection.     

紫外线对白念珠菌的影响

紫外线作为重要的环境因子之一,能显著影响包括白念珠菌在内的多种生物的生长及生理过程.研究发现白念珠菌受紫外线照射后菌丝形成被抑制,孢子形成增多且没有向光性;脉冲紫外线辐射可通过多靶点程序使白念珠菌失活;rad 51缺陷株比rad 52缺陷株更易受紫外线损害,同时紫外线可导致白念珠菌杂合性丢失.研究还发现UVC治疗可明显减少烧伤后真菌微生物感染,核黄素/UVA治疗可明显抑制白念珠菌生长.因此紫外线对白念珠菌有一定的抑制作用.     

三颗针对白假丝酵母的抑制作用

目的研究三颗针对白假丝酵母的抑制作用。方法采用溴化噻唑蓝四唑法(MTT)和琼脂平板法测定三颗针对白假丝酵母的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MFC);利用倒置荧光显微镜观察三颗针对白假丝酵母菌丝形成的影响;采用MTT法测定三颗针对白假丝酵母菌丝萌发不同时期的抑制率。结果三颗针对白假丝酵母具有较强的抑制作用。其中,采用琼脂平板法测得三颗针抑制该菌的MIC为2mg/mL,MFC为4mg/mL。三颗针能减缓该菌的生长速度或使其停止生长,且浓度越高作用效果越明显。其中4mg/mL的三颗针作用白假丝酵母6h后,能够完全抑制菌丝形成。对于24h后已经萌发为菌丝态的白假丝酵母,三颗针可抑制菌丝的继续生长,与对照组相比,4mg/mL的三颗针对于萌发2h后的白假丝酵母的菌丝抑制率为76.7%(P0.01)。结论三颗针能抑制白假丝酵母菌丝的生长和萌发。