中药蛴螬多肽Probrelin抗白色念珠菌活性研究

目的] 研究蛴螬多肽Probrelin对白色念珠菌的抗菌活性。方法] 采用肉汤稀释法测定蛴螬多肽Probrelin对正常菌株及临床耐药菌株的最小抑菌浓度，同时结合平板计数法测定最小杀真菌浓度；通过不同浓度多肽处理后经平板计数绘制时间-杀菌动力学曲线；通过PI吸收实验检测多肽对白色念珠菌细胞膜完整性的影响；通过核酸阻滞实验检测多肽与核酸间是否具有结合作用；通过扫描电子显微镜检测多肽对白色念珠菌形态的影响；通过结晶紫染色法检测多肽对生物膜生成及成熟生物膜的影响；通过显微镜观察多肽对白色念珠菌菌丝形成的影响；通过棋盘法检测多肽与抗真菌药物间的相互效应；通过小鼠皮下感染模型检测多肽在生理条件下的抗白色念珠菌活性。结果] 蛴螬多肽Probrelin对正常菌株及临床耐药菌株的最小抑菌浓度均为100 μg/mL，最小杀真菌浓度为100-200 μg/mL，且对白色念珠菌的杀菌动力学具有时间和浓度依赖性；该多肽以浓度依赖性的方式影响白色念珠菌细胞膜的完整性，并通过破坏白色念珠菌细胞壁的结构影响其形态，但与核酸间不具有结合作用；该多肽既可抑制白色念珠菌生物膜的形成，又可清除成熟生物膜，同时还可抑制白色念珠菌菌丝的形成；该多肽与抗真菌药物Clotrimazole间具有协同效应；在小鼠皮下感染模型中，该多肽可以有效杀灭白色念珠菌，进而抑制感染。结论] 蛴螬多肽Probrelin对白色念珠菌具有良好的抑制杀灭活性，可以作为新的药物分子或模板分子用于抗白色念珠菌药物的研发。

Activity of the antimicrobial peptide probrelin from traditional Chinese medicine grub against Candida albicans