直接用噬菌体肽进行功能性分析的研究

通过对胰蛋白酶抑制剂的筛选发现,噬菌体肽库不仅可以用于亲和性筛选,而且噬菌体肽可以直接用于对亲和筛选得到的克隆进行胰蛋白酶抑制实验,即所谓的功能性筛选。功能性筛选前后的测序结果表明用噬菌体肽直接进行功能筛选确定能够筛去大部分的非抑制剂克隆。     

天花粉蛋白T18肽片段的溶液构象及T14,TDK和T18肽…

用＾１Ｈ ＮＭＲ法测定Ｔ１８肽在ＤＭＳＯ（ＭＳ１８）和５０％六氟异丙醇（ＦＰ１８）中的溶液构象。ＭＳ１８含有Ｉｌｅ３￣Ｇｌｕ７和Ａｌａ１２￣Ｇｌｎ１６两段β－折叠链;而ＦＰ１８则转变为α－螺旋结构。综合分析Ｔ１４,Ｔ１８和ＴＤＫ三个模型肽的结构性质和稳定性,比较肽链序列和溶剂作用,提出肽链局部优势结构的概念,并据此讨论天花粉蛋白小结构域折叠起始过程。     

大鼠TCF—a修饰16肽的溶液构象

已知大鼠ＴＧＦ－ａ的抗原部位于Ｃ环,且大鼠的ＴＧＦ－ａ（３４－４３）和ＴＧＦａ（４４－５０）均有较强的活性以转化正常细胞。为了提示其结构与功能关系,合成了大鼠ＴＧＦ－ａ修饰１６肽。在前文用二维核磁共振技术归属质子谱并验证其一级结构的基础上,本文测定了不同混合时间的二维ＮＯＥＳＹ谱。根据所得的数据原始斜率法求出距离约束。通过约束分子动力学计算定出该分子溶液构象。其中还用ＤＱＦ－ＣＯＳＹ的数据求出二面     

噬菌体短肽库的构建及其随机短肽的多样性

噬菌体短肽库是将随机合成的寡核苷酸序列通过与单链噬菌体外壳蛋白基因融合,从而将随机短短肽表达于噬菌体的表面,将体外随机化学合成的寡聚核苷酸序列重组到单价噬菌体表达载体,构建了噬菌体短肽库,证明其库容为２×１０＾７集落形成单位,重组率为９３％。     

泛肽系统的组成和功能(一) 一 系统组成 底物识别与蛋白质泛肽化

泛肽(Ubiquitin 简称Ub)是一个由76个氨基酸残基组成的非常保守的小蛋白质。泛肽依赖性的蛋白质降解途径(Ubiquitin-dependebt proteiytic pathway)是目前已知的最重要的、有高度选择性的蛋白质降解途径。泛肽系统由Ub、Ub活比酶、Ub结合酶、Ub-蛋白质连接酶、Ub-C末端水解酶和26S蛋白酶体组成。本文详细地介绍了泛肽系统各个组成部分的种类、结构与功能,蛋白质泛肽化及其降解机制和底物识别模式。     

泛肽系统的组成和功能(一)—系统组成、底物识别与蛋白质泛肽化

泛肽（Ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ,简称Ｕｂ）是一个由７６个氨基酸残基组成的非常保守的小蛋白质。泛肽依赖性的蛋白质降解途径（Ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ＿ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃｐａｔｈｗａｙ）是目前已知的最重要的、有高度选择性的蛋白质降解途径。泛肽系统由Ｕｂ、Ｕｂ活化酶、Ｕｂ结合酶、Ｕｂ＿蛋白质连接酶、Ｕｂ＿Ｃ末端水解酶和２６Ｓ蛋白酶体组成。本文详细地介绍了泛肽系统各个组成部分的种类、结构与功能,蛋白质泛肽化及其降解机制和底物识别模式。     

综述与专论：甘丙肽对抑郁症状的调控作用及其机制的研究进展

甘丙肽(galanin, GAL)作为治疗抑郁症的可能靶点被关注已久,但目前仍未有广泛应用的GAL类抗抑郁药物。GAL可与3种G蛋白偶联受体(GalR1～3)结合,GalR1和GalR3介导促进抑郁的作用,GalR2介导抗抑郁的作用。GAL的N端有生物活性的片段GAL (1-15),通过其受体GalR1-GalR2异聚体(heteromer),介导比GAL更强的调节抑郁效应。GAL (1-15)还可以通过GalR1-GalR2异聚体与5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)相互作用形成GalR1-GalR2-5-HT1AR异聚体的方式,加强5-HT1AR激动剂的抗抑郁效果。此外,GAL及其受体还与去甲肾上腺素、神经肽Y、脑源性神经营养因子、多巴胺等递质或因子交互作用调节抑郁。本文梳理GAL及其受体对抑郁的调节作用及其可能机制,并对以GAL及其受体为靶点开发的药物应用于临床治疗抑郁症的可能性进行探讨。     

甘丙肽对抑郁症状的调控作用及其机制的研究进展

甘丙肽(galanin, GAL)作为治疗抑郁症的可能靶点被关注已久,但目前仍未有广泛应用的GAL类抗抑郁药物。GAL可与3种G蛋白偶联受体(GalR1~3)结合,GalR1和GalR3介导促进抑郁的作用,GalR2介导抗抑郁的作用。GAL的N端有生物活性的片段GAL (1-15),通过其受体GalR1-GalR2异聚体(heteromer),介导比GAL更强的调节抑郁效应。GAL (1-15)还可以通过GalR1-GalR2异聚体与5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)相互作用形成GalR1-GalR2-5-HT1AR异聚体的方式,加强5-HT1AR激动剂的抗抑郁效果。此外,GAL及其受体还与去甲肾上腺素、神经肽Y、脑源性神经营养因子、多巴胺等递质或因子交互作用调节抑郁。本文梳理GAL及其受体对抑郁的调节作用及其可能机制,并对以GAL及其受体为靶点开发的药物应用于临床治疗抑郁症的可能性进行探讨。     

甘丙肽对PC12细胞和B104细胞增殖的不同影响

本实验运用PCI2细胞和B104细胞对甘丙肽（GAL）在神经增殖上的作用进行了研究。运用RT-PCR方法检测GAL及其受体在PCI2细胞和B104细胞中的表达：运用MTT法检测GAL及其受体激动剂、拮抗剂对两种细胞增殖的影响。结果显示：PCI2细胞表达所有三种GAL受体（GalRs）．而不表达GAL;B104细胞表达GAL及两种受体GaIR2和GalR3,而不表达GalRl;GAL及其受体激动剂GAL1-11和GAL2-11能够明显地抑制PC12细胞增殖、却会明显促进B104细胞的增殖。这些效应皆可被非特异性GAL受体拮抗剂M35所阻断。结果说明,GAL可以通过其受体影响细胞的增殖．并且不同受体可能介导不同的作用。     

植物螯合肽合成酶的研究进展

植物螯合肽（phytochelatins,PCs）在植物解除重金属的毒性方面具有重要作用,其结构为（γ-Glu—Cys）n-Gly（n=2—11）,它不是基因的编码产物,而是在植物螯合肽合成酶（phytochelatin synthase,PCS）的催化下以谷胱甘肽（glutathione,GSH）为底物合成的。PCS能够被金属离子激活,高度保守的N-端是催化结构域,而其C-端则是多变的。本文就PCS的结构,功能与催化机制以及PCS的最新研究进行了介绍。     

兔胚泡肽合成片段及其与着床有关的生理功能

本研究测定了兔胚泡肽（ＲＢＰ２）的氨基酸序列,它由５４个氨基酸组成,其序列的第４位氨基酸至第３４位氨基酸与兔子宫珠蛋白Ｎ端氨基酸序列完全相同。用计算机软件系统模拟分析,从５４个氨基酸中选取了抗原性最高的一段氨基酸（ａａ２０－ａａ３４）,然后人工合成了含有１５个氨基酸的小肽片段（ＳＰＦ）。研究表明：用溴脱氧尿嘧啶掺入淋巴细胞的方法测定了ＳＰＦ对细胞增殖作用的影响,当浓度范围在８０μｇ／ｍｌ至３２０μ     

微生物脂肽的结构

根据结构特征,将脂肽分为环状脂肽和线形脂肽;按脂肪酸链和肽链的连接方式不同,进一步将环状脂肽分为3类。在此基础上,对脂肽的产生菌和脂肽结构进行了综述,并对脂肽的活性、作用机理及其应用进行了展望。     

利用合成肽进行丙型肝炎病毒（HCV）的线性抗原表位分析

首先利用固相多肽合成技术对ＨＣＶ多蛋白中可能含有优势抗原表位的１４个肽段进行了化学合成,并用合成肽作包被抗原进行间接ＥＬＩＳＡ试验来分析它们的抗原性,结果表明,所有合成肽中除ＮＳ３区的Ｐ７、Ｐ８和ＮＳ５区的Ｐ１３无抗原性外,其余肽段均具有抗原活性。其中Ｃ区的Ｐ１,ＮＳ４区和Ｐ９和ＮＳ５区的Ｐ１２三个肽段的抗原性较好,与相应的重组蛋白Ｃ２２,Ｃ１００和ＮＳ５Ａ比较,它们之间的抗原性比较接近。随后选择     

以两亲性细胞膜穿透肽为基础的siRNA递送策略

小干扰RNA(si RNA)的发展给针对病理障碍特异性基因的靶向治疗带来了巨大的希望。然而,细胞膜对带负电荷分子的低渗透性,细胞对si RNA的摄取能力差,成为了si RNA临床应用的主要障碍。虽然学者们提出了一系列si RNA递送的方法,但是截止到目前,仍没有递送si RNA的通用方法。细胞膜穿透肽(cell-penetrating peptides,CPPs)的发现为si RNA非侵袭性的进入细胞提供了一种非常有前景的运载工具,已被成功地应用于治疗性si RNA分子的体内和体外实验的递送。最近,一种新的以两亲性CPPs为基础的si RNA递送系统-CADY(a secondary amphipathic peptide,Ac-GLWRALWRLLRSLWRLLWRA-cysteamide)受到了高度关注,它能与si RNA形成稳定的非共价复合物,并在原代和悬浮细胞系中高效地递送si RNA,具有极高的应用前景。