酸雨对温州三土羊湿地水体氮营养盐数量的影响

为了解酸雨对温州三羊湿地水体氮营养盐数量的影响,本文测定了三土羊湿地水体中不同形态氮的含量,其中氨氮2.90～10.75 mg·L^-1,平均538 mg·L^-1、硝态氮0.16～0.44 mg·L^-1,平均0.31 mg·L^-1;总氮34.04～63.20 mg·L^-1,平均55.75 mg·L^-1和水体的pH值,6.1～6.5,平均6.4;并测算了近两年通过降水输入到三羊湿地和三羊湿地水体中不同形态氮的数量及其占湿地现有水体中各形态氮的比例,其中输入到三羊湿地氨氮、硝态氮和总氮的量分别为2.48～2.86×10⁴ kg、2.87×10⁴～4.96×10⁴ kg和5.35×10⁴～7.82×10⁴ kg,分别占湿地水体现有量的56%～64%、11.21～19.38倍和12%～17%;直接输送到三羊湿地水体各形态氮的数量0.72×10⁴～0.84×10⁴ kg、0.83×10⁴～1.44×10⁴ kg和1.55×10⁴～2.27×10⁴,分别占现有量的16%～19%,3.24～5.63倍和3%～5%.结果表明,酸雨是三,羊湿地水体氮污染的主要来源之一,对三羊湿地水体富营养化产生重要影响.     

南极长城站微生物区系调查

1992～1993年的夏季,对南极中国长城站的陆地进行了微生物区系的现场调查。先后采集各种类型上样多个。其中对有生态意义的25个样进行了不同类型微生物的分离和计数;中温培养下每克湿土壤菌量为10²～10⁶,用马丁培养基对真菌进行分离培养和计数,每克湿土含菌量为10²～10⁴;0℃下分离计数,发现低温下微生物的数量较中温的多,每克湿土壤含菌为10³～10⁶。对该地区烃氧化菌进行了特别调查,以长城站为中心东西宽0．4Km,南北长1Km的范围内烃氧化菌发育最为活跃,但距长城站距离越远,烃氧化菌数量越少。     

微波辅助提取木豆根中染料木素工艺

以木豆根为原料,利用微波辅助提取技术进行提取,在单因素实验的基础上对提取条件进行了考察,根据BBD(Box-Behnken design)实验设计原理,采用3因素3水平的响应面分析法,以木豆根中主要异黄酮染料木素(genistein)为指标,对提取过程进行优化,得到最佳工艺参数为：提取温度为68℃,固液比为32∶1 mL·g^-1,乙醇浓度为78%,提取功率700 W,提取时间15 min。在最佳提取条件下染料木素的提取率可达到0.465±0.032 mg·g^-1。本研究对于微波提取技术的应用及木豆根的开发和利用都具有显著的意义。     

黄芪多糖超声-微波协同提取研究

本论文采用超声-微波协同提取新工艺,通过单因素实验分别考察提取时间、微波功率、料液比等因素对黄芪多糖提取率及纯度的影响;通过正交实验得出最佳提取工艺参数;通过平行提取实验,与水提法、微波及超声波辅助提取进行比照。得出最佳提取条件为微波功率120 W,提取时间为150 s,料液比1∶25(g/mL)时,黄芪多糖的提取率最高达4.25%,并且证明了超声微波协同提取法的提取效率高于水提法、微波法及超声波法等传统的提取方法。     

利用正交设计法对叉叶苏铁ISSR-PCR反应体系的优化研究

比较CTAB法和SDS法提取叉叶苏铁（Cycas micholitzii）的总DNA,发现CTAB法是提取叉叶苏铁总DNA的较好方法;对叉叶苏铁ISSR-PCR反应体系中的4个主要因素dNTPs,Taq DNA聚合酶,引物及Mg²⁺进行最优条件筛选;采用单因素法探讨DNA模板量、退火温度和循环次数的最佳反应条件,建立了适合于叉叶苏铁的最佳ISSR-PCR反应体系 （20 μL体系）： 1×Buffer,75 ng DNA模板,dNTPs 250 μmol·L^-1, Taq酶1.0U,引物0.2 μmol·L^-1,Mg2+ 2.5mmol·L^-1,反应程序为：94℃预变性5 min,94℃变性1 min,52℃退火1 min,72℃延伸2 min,循环40次,72℃延伸10 min,4℃保存。本研究结果为苏铁纲植物的分子生物学和分子系统学研究提供理论参考。     

枯草芽孢杆菌BSD-2对黄瓜叶际微生物数量及菌群结构的影响

【目的】阐明枯草芽孢杆菌BSD-2菌株抗菌素、芽孢及发酵液不同施入形式对黄瓜叶际微生物数量及菌群多样性的影响,为该菌株的应用提供理论基础和依据。【方法】以黄瓜为实验材料于室内进行盆栽实验,设置于接种灰霉病原菌前后喷施抗菌素、芽孢、发酵液,单独接种灰霉病原菌和无菌水空白对照,共8个处理。采用传统微生物分离的方法,利用PB、高氏1号和PDA培养基分离并统计叶际可培养细菌、放线菌和真菌的数量;采用Bio-Rad公司的DcodeTM System进行样品的DGGE分析,对条带数量和灰度进行定量分析,采用UPGMA法对各条带进行聚类分析;采用Shannon-Wiener指数、Pielou均匀度指数和丰富度分析可培养微生物和DGGE图谱中的群落多样性;并将条带回收测序。【结果】枯草芽孢杆菌BSD-2抗菌素、芽孢及发酵液以接种灰霉病原菌前喷施的效果最佳,均可提高可培养细菌的数量,降低可培养真菌的数量;可使叶际微生物的Shannon-Wiener多样性指数、Pielou均匀度指数和丰富度指数增加;其中抗菌素处理对叶际微生物种群结构的影响最小。【结论】枯草芽孢杆菌BSD-2的发酵液可有效抑制真菌的数量;芽孢可有效提高细菌及放线菌的数量;抗菌素则利于保持叶际微生物的丰富度及多样性指数。     

Tpb55菌株对烟草赤星病菌的影响及其在烟草叶表的定殖

采用生长速率法及分生孢子萌发法测定了烟草叶围细菌Tpb55菌株对烟草赤星病菌的影响。结果表明：Tpb55能分泌抗菌物质,抑制烟草赤星病菌的菌丝生长和分生孢子萌发,破坏菌丝和分生孢子形态,使菌丝和分生孢子出现细胞原生质收缩、肿大呈泡囊状、细胞壁破损导致原生质外泄等。温室和田间定殖作用测定结果表明：0～30 d内,Tpb55菌株在烟草叶表定殖菌量分别为23×10⁶～189×10⁶ cfu·g^-1鲜质量和1.87×10⁶～179.33×10⁶ cfu·g^-1鲜质量,其中,接种后3～8 d,Tpb55定殖数量较高且基本稳定,随后定殖数量逐渐下降。     

超声波辅助大米草总黄酮提取及抗氧化活性研究北大核心CSCD

应用超声波技术,以大米草为原料提取黄酮类化合物,设计正交实验,研究乙醇浓度、料液比、超声处理温度和提取时间对总黄酮提取效果的影响,分析得出最佳提取工艺条件。并测定大米草黄酮体外抗氧化活性。结果表明:大米草总黄酮提取的最佳工艺条件为:乙醇浓度80%,提取时间20 min,料液比1∶30(g·mL-1),提取温度45℃。影响大米草黄酮提取率的主次因素是:料液比>乙醇浓度>提取温度>提取时间。大米草黄酮总抗氧化活性和抗超氧阴离子活力随着浓度的增加逐渐增加,呈明显的量效关系,并且能有效清除氧化脂质(MDA)。     

氮离子注入对蒙古黄芪多倍体诱导的影响

利用二倍体蒙古黄芪种子为材料,以低能氮离子束为诱变源,将化学诱导与物理诱变相结合,探索出一套高效的多倍体诱导新方法。研究结果表明：氮离子注入种子后表现出明显的生物学效应;氮离子注入与秋水仙素联合诱导黄芪多倍体的效果很明显。氮离子注入剂量为2.6×10¹⁶ N⁺/cm²,秋水仙素浓度为100 mg·L^-1,培养5 d诱导率最高为44.4%;氮离子注入剂量为5.2×10¹⁶ N⁺/cm², 秋水仙素浓度为150 mg·L^-1,培养10d的诱导率最高为46.2%;二者均高于对照组秋水仙素浓度为100 mg·L^-1培养15 d的最高诱导率13.9%。利用细胞染色体计数鉴定多倍体为四倍体。     

杭州西湖水域可培养异细菌的群落多样性

自2001年10月~2002年10月对杭州西湖水域可培养异养细菌的群落结构和多样性进行了为期1年的调查。水体中可培养异养细菌的年平均值只有510 CFU/mL。从季节变化来看,温度较低的12月和3月其数量相对较多,分别为809和757 CFU/mL,而温度较高的5月和10月只有327和330 CFU/mL。表层底泥中可培养异养细菌的数量平均为2.27×10⁵ CFU /g （以干泥计）,其中长桥湾相对较多,为3.06×10⁵ CFU /g,而湖心泥中只有1.70×10⁵ CFU /g。从季节的变化看,也是冬季的数量比夏季高。调查还发现西湖水域优势菌的优势度高,多样性指数低。在三个湖区连续1年的测定中总共只出现14种类型的菌落,优势菌为假单胞菌属、肠杆菌科和气单胞菌属。水体中优势菌的优势度为36.8%~80.4% ,平均54.5%;多样性指数H介于0.682~1.787之间,平均1.160。底泥中优势菌的优势度为27.7％~72.7% ,平均51.7%;多样性指数H介于0.809~1.774之间,平均1.309。水体中的细菌有95%为革兰氏阴性杆菌,革兰氏阳性菌很少;产色素菌的比例相对较高,其中以产黄色素菌落为主,平均达20.1%;芽孢杆菌所占的比例较低,只有4.24%。而表层沉积物中产黄色素的菌落较少,只有2.07%;芽孢杆菌的比例则相对较高,为14.1%。     

九龙江口秋茄（Kandelia candel）红树林掉落叶自然分解与落叶腐解微生物的关系

 通过对九龙江口秋茄红树林人工模拟凋落叶自然分解过程中落叶腐解与落叶腐解微生物变化的研究,结果表明：1．随落叶分解进程,落叶腐解微生物数量有了显著地变化;就细菌、放线菌和丝状真菌等三大类群微生物数量来看,整个过程以细菌占绝对优势,其数量在200×104一8800×104个／克干重,占三大类群微生物总数量的96—99%以上。这表明细菌是落叶分解起主要作用的微生物类群。2．微生物各生理类群中,以氨化细菌数量最多,在26×104一180×104个／克干重;而亚硝化细菌,反硝化细菌及纤维分解菌分别仅在0.03×104一0.24×104,0.03×104一0.10×104及1.14×104一7.33×104个／克干重。表明氨化细菌是有机物质无机化的主要生理类群。并且氨化作用、亚硝化作用和反硝化作用是同时进行;并随落叶腐解周期的延长(半腐解周期内)而加强,唯强度不一,它反映了该生境干、湿交替的沼泽化特点。纤维分解菌数量的变化较特殊,在落叶腐解第2周时,有了明显增多,至第4周达全周期的最高值,而以后周期都与初始叶面纤维分解菌的数量相近,甚至减少。从微生物活性的变化测定结果来看,与上述微生物生理类群的变化特点是相一致的。3．在该生境中,落叶腐解速度是很快的,当落叶入土1周后将近1／4有机物被腐解,至第6周达半腐解状态。随落叶腐解有机物质无机化程度的加速,残叶中单位叶重的可溶性总糖含量和全磷量都明显地减少,而全氮含量显著地增加。     

Atrazine degradation by aerobic microorganisms isolated from the rhizosphere of sweet flag (Acorus calamus L.)

In presented study the capability of microorganisms isolated from the rhizosphere of sweet flag (Acorus calamus) to the atrazine degradation was assessed. Following isolation of the microorganisms counts of psychrophilic bacteria, mesophilic bacteria and fungi were determined. Isolated microorganisms were screened in terms of their ability to decompose a triazine herbicide, atrazine. Our results demonstrate that within the rhizosphere of sweet flag there were 3.8 × 10⁷ cfu of psychrophilic bacteria, 1.8 × 10⁷ cfu of mesophilic bacteria, and 6 × 10⁵ cfu of fungi per 1 g of dry root mass. These microorganisms were represented by more than 20 different strains, and at the first step these strains were grown for 5 days in the presence of atrazine at a concentration of 5 mg/l. In terms of the effect of this trial culture, the bacteria reduced the level of atrazine by an average of about 2–20%, but the average level of reduction by fungi was in the range 18–60%. The most active strains involved in atrazine reduction were then selected and identified. These strains were classified as Stenotrophomonas maltophilia, Bacillus licheniformis, Bacillus megaterium, Rahnella aquatilis (three strains), Umbelopsis isabellina, Volutella ciliata and Botrytis cinerea. Culturing of the microorganisms for a longer time resulted in high atrazine degradation level. The highest degradation level was observed at atrazine concentrations of 5 mg/l for S. maltophilia (83.5% after 15 days of culture) and for Botrytis sp. (82% after 21 days of culture). Our results indicate that microorganisms of the sweet flag rhizosphere can play an important role in the bioremediation of atrazine-contaminated sites.     

小麦内生细菌及其对根茎部主要病原真菌的抑制作用

对小麦植株不同生育期、不同器官的内生细菌进行了分离和数量变化分析.结果表明,根、茎、叶及未成熟籽粒等器官中存在大量的内生细菌,鲜组织中平均约含内生细菌5.0×10⁵ CFU·g^-1,其中根系中内生细菌数量达7.8×10⁵ CFU·g^-1,而茎秆、叶片和未成熟籽粒中内生细菌数量分别为4.8×10⁵、3.2×10⁵和2.8×10⁵ CFU·g^-1.内生细菌数量在不同生育期也存在差异,幼苗期平均约为3.1×10⁵ CFU·g^-1、拔节期和灌浆期分别为5.7×10⁵和7.0×10⁵ CFU·g^-1.不同小麦田块之间存在明显差异,长武县一田块植物鲜组织中内生细菌的数量为6.1×10⁵ CFU·g^-1,而大荔县一田块约为3.9×10⁵ CFU·g^-1.试验结果发现,对小麦全蚀病菌具有拮抗作用的内生细菌有51株、对小麦纹枯病菌具有抑制作用的内生细菌有45株.用平板对峙法测定,有71株对两种病原真菌均有拮抗作用,对小麦全蚀病菌抑菌圈直径大于10 mm的有23株,其中来源于根系、茎秆、叶片和籽粒的分别为6株、7株、9株和1株;对小麦纹枯病菌抑菌圈超过10 mm的有20株,其中来源于根系、茎秆、叶片和籽粒的分别为7株、5株、7株和1株,说明从小麦叶片诱捕分离的内生细菌中,对小麦全蚀病菌和纹枯病菌抑菌作用较强的分离株比率最高,其次为茎秆,而根部和未成熟籽粒中比例明显较低.     

Avermectin类农药对美洲斑潜蝇的生物活性

Avermectin类农药对美洲斑潜蝇Liriomyzasattvae Blanchard生物活性的室内研究结果表明： 揭阳霉素对美洲斑潜蝇1、2、3龄幼虫的LC₅₀分别是1.54×10^-4 g/L、3.73×10^-4 g/L、1.99×10^-3g/L;害极灭对上述幼虫的LC₅₀分别是1.48×10^-4g/L、3.68x10^-4 g/L和1.97×10^-3 g/L。美洲斑潜蝇幼虫对Avermectln类农药以1龄最敏感,其中揭阳霉素对3龄幼虫的LC₅₀是1龄的12.9倍。揭阳霉素对雌成虫24 h、48 h的LC₅₀分别是3.12×10^-3 g/L和2.08×10^-3 g/L,其对美 洲斑潜蝇取食、产卵拒避持效期分别是4-8天和10天。使用浓度0.005 g/L揭阳霉素处理6天、8天和10天后接虫,幼虫的存活率分别是0、16.13%和28.07%。田间使用浓度0.005 g/L的揭 阳霉素和0.0045 g/L几的害极灭分别处理,6天后的校正虫口减退率分别为91.0%和90.9%,两者差异不显著,而使用浓度0.0067 g/L揭阳霉素处理,6天后校正虫口减退率为93.6%。     

Microbial decomposition of leaf material at 0°C

The microbial decomposition of leaves (both fresh and autumnshed) at 0°C using stream sediment-water was investigated. The maximum rates of loss of leaf carbohydrate and protein at 0°C were considerable, being about 40% of those at 20°C. These rates were only slightly affected by the type of leaf material present being 1.3-fold higher with fresh leaves as compared with autumn-shed leaves. In addition, an epifluorescence microscopic counting technique was developed and utilized to enumerate the microbial populations colonizing the decomposing leaves. The average microbial densities on fresh and autumn-shed leaves after 35 days of incubation were 1.3 × 10⁶ and 9.0 × 10⁵ microorganisms cm^?2 at 0°C as compared with 5.5 × 10⁶ and 3.3 × 10⁶ microorganisms cm^?2 at 20°C, respectively. Antibacterial and antifungal antibiotics were used to estimate the comparative involvement of sediment bacteria and fungi in leaf degradation.     

杨树韧皮部次生代谢产物的提取与分析

通过不同化学方法提取并分析了不同品系杨树韧皮部10种次生代谢产物的含量及含量差别,研究了不同制样方法对单宁、酚类及酚酸产物含量提取结果的影响。研究结果表明：银中杨样品中苯酚及邻苯二酚的含量最高,欧洲黑杨最低;制样温度影响单宁的提取率,75℃下处理的样品最有利于单宁、酚类及酚酸类物质的提取;此外,分析实验结果还表明杨树韧皮部样品中没有生物碱存在或含量极低,超出检测范围。     

保幼激素类似物对斜纹夜蛾核多角体病毒增殖的影响

分别用5×10⁶,1×10⁷,5×10⁷,1×10⁸ PIBs/mL 4种浓度的斜纹夜蛾核多角体病毒(SpltNPV)感染斜纹夜蛾末龄幼虫（第6龄）,并于同龄期以10μg/头的保幼激素类似物(JHA) methoprene分别对各感染组进行点滴处理,以研究JHA对SpltNPV增殖的影响。研究表明,与对照组相比各不同浓度处理组病毒总产量分别提高227.06%、128.71%、52.62%、33.15%,平均单头病毒含量分别提高49.15%、48.40%、36.40%和31.11%,病毒感染死亡率分别提高119.21%、52.72%、12.64%和1.12%。其中以1×10.7 PIBs/mL感染再经JHA处理的病毒总产量和平均单头病毒含量最高,分别为1 701.8×10⁸PIBs和60.1×10⁸ PIBs。各处理组的病毒总产量和平均单头病毒含量均显著高于其对照组。在此基础上,进一步研究了JHA对染毒与未染毒宿主消化生理的影响。结果表明,JHA处理不仅延长了6龄幼虫的寿命,增加了其取食量,而且还显著提高了幼虫的食物转化率和病毒产量。     

红树植物老鼠簕内生细菌数量的时空动态变化

【目的】了解红树植物老鼠簕内生细菌数量的时空动态变化。【方法】分别用荧光显微计数法和平板计数法对老鼠簕内生细菌总量和可培养内生细菌总量进行周年动态测定。【结果】老鼠簕根、茎、叶部内生细菌总量年平均分别为12.25×107、7.59×107和5.72×107 ind./g(FW);而可培养内生细菌总量年平均分别为3.98×103、3.70×103和2.18×103 CFU/g(FW)。【结论】老鼠簕植株体内含有大量的内生细菌,根部含量最高,茎部次之,叶部最少。但分离的可培养内生细菌占比极少(仅为0.000 2%-0.146 8%)。老鼠簕内生细菌总量及可培养内生细菌总量均随采样季节不同而呈现波动性变化,内生细菌总量最大值出现在夏季(7月),可培养内生细菌总量最大值出现在春季(3月)。     

Comprehensive two‐dimensional gas chromatography–mass spectrometry analysis of volatile constituents in Thai vetiver root oils obtained by using different extraction methods

Introduction – Vetiver root oil is known as one of the finest fixatives used in perfumery. This highly complex oil contains more than 200 components, which are mainly sesquiterpene hydrocarbons and their oxygenated derivatives. Since conventional GC‐MS has limitation in terms of separation efficiency, the comprehensive two‐dimensional GC‐MS (GC × GC‐MS) was proposed in this study as an alternative technique for the analysis of vetiver oil constituents. Objective – To evaluate efficiency of the hyphenated GC × GC‐MS technique in terms of separation power and sensitivity prior to identification and quantitation of the volatile constituents in a variety of vetiver root oil samples. Methodology – Dried roots of Vetiveria zizanioides were subjected to extraction using various conditions of four different methods; simultaneous steam distillation, supercritical fluid, microwave‐assisted, and Soxhlet extraction. Volatile components in all vetiver root oil samples were separated and identified by GC‐MS and GC × GC‐MS. The relative contents of volatile constituents in each vetiver oil sample were calculated using the peak volume normalization method. Results – Different techniques of extraction had diverse effects on yield, physical and chemical properties of the vetiver root oils obtained. Overall, 64 volatile constituents were identified by GC‐MS. Among the 245 well‐resolved individual components obtained by GC × GC‐MS, the additional identification of 43 more volatiles was achieved. Conclusion – In comparison with GC‐MS, GC × GC‐MS showed greater ability to differentiate the quality of essential oils obtained from diverse extraction conditions in terms of their volatile compositions and contents. Copyright © 2009 John Wiley & Sons, Ltd.     

山茶花叶片DNA提取及RAPD反应体系的研究

山茶花（Camellia japonica L.）是我国特产的名贵花卉之一,由于其品种繁多,在系统分类和品种鉴定上存在一定的难度。本研究针对山茶花的DNA提取方法和RAPD扩增体系进行了摸索,旨在为山茶花在DNA水平的分类鉴定和分子生物学方面研究打下一定的基础。实验采用改进的CTAB法提取山茶花叶片DNA,得到的DNA纯度较高,OD₂₆₀/OD₂₃₀值为1.90～2.0,OD₂₆₀/OD₂₈₀值为1.80～1.83,得率也较高,一般在150～200 μg·g^-1左右,片段完整性较好,大于20 kb,符合分子遗传实验的要求;在山茶花RAPD扩增条件的研究中,发现20 μL反应体系中加入100 ng DNA、125 μmol·L^-1 dNTP(each)、1.2 μmol·L^-1 Mg²⁺、1×Buffer、0.5 μmol·L^-1引物、1 U Taq酶最为合适,退火温度一般设为37℃左右,扩增产物的电泳条带数多、清晰、明亮。