柴胡及体细胞杂种愈伤组织酯酶同工酶技术的优化

为解决柴胡及其体细胞杂种愈伤组织中次生代谢物多,同工酶粗提液粘稠、杂质多且呈混浊态,同工酶电泳谱带不清晰及易拖尾的问题,通过增加离心次数、调整酶粗提液上样体积等方法,得到了理想的酯酶同工酶电泳谱带。该法广泛适用于其它植物的同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。     

SOD的聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳分离和酶活性显示

SOD的聚丙烯酸胺凝胶电泳技术已被广泛应用于动、植物SOD同工酶的研究。我们改用浓度梯度胶电泳法分离和鉴定SOD,其谱带受杂蛋白干扰少,分辨率和灵敏度比均一胶电泳法高,并能根据电泳相对迁移率较为快速和准确地初步判定SOD同工酶类型。现简介如下：门）SOD浓度梯度胶的制作基本按张龙翔等方法（生化实验方法和技术,北京：人民教育出版社,1982．119）,凝胶梯度为4％～35％。制成的凝胶先预电泳除去残留的过硫酸按,点样后在4C左右电泳,一般SOD港带达到相对稳定需3500～4000V／h。（2）SOD活性染色按罗广华、王爱国方法［植…     

三种瘤背豆象幼虫酯酶同工酶的比较研究

本研究采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板型电泳法 ,分析了 3种瘤背豆象属豆象 :绿豆象 Callosobruchuschinensis L.、灰豆象 C.phaseoli ( Gyllenhal)、鹰嘴豆象 C.analis ( Fabricius)幼虫的酯酶同工酶。从酶谱的酶带数、迁移率、酶活性强弱 (酶带染色深浅 )、酶含量 (酶带宽窄 )等方面的比较发现 ,3种瘤背豆象属豆象幼虫的酯酶同工酶酶谱具有明显的差异。由此探讨利用酯酶同工酶电泳法鉴别豆象的可能性     

SDS-PAGE、同工酶等电聚焦和RAPD标记鉴定两系杂交水稻F1种子纯度对比研究

目的：探讨利用种子贮藏蛋白SDS—PAGE电泳、酯酶同工酶超薄等电聚焦电泳和RAPD分子标记鉴定五个两系杂交水稻组合F_1种子纯度的可行性。方法和结果：利用SDS—PAGE电泳技术未能找到所试五个组合各自的父本特征蛋白质带;利用酯酶同工酶超薄等电聚焦电泳技术和RAPD分子标记可找到所试五个组合的父母本特征酶带和RAPD标记,但酯酶同工酶的多态性同时也受种子萌发时间的影响。酯酶同工酶超薄等电聚焦电泳和RAPD分子标记可用于所试五个两系杂交水稻组合F_1种子纯度的鉴定。     

三种分析水稻F1代幼苗生长过程中酯酶同工酶变化的电泳方法比较

利用聚酯胶片作为凝胶支持物的超薄等电聚焦电泳(UTLIEF)研究水稻F1种子萌发过程中的酯酶同工酶多态性变化的结果表明,UTLIEF相比非变性不连续聚丙烯酰胺电泳(native-PAGE)和常规等电聚焦电泳(IEF)得到的酯酶同工酶图谱更清晰,酶带数目和强弱的多态性变化更高,用pH 2～9的两性电解质时等电聚焦的电泳效果较好.     

利用醇溶蛋白和同工酶鉴别小麦亲本三系及杂种种子的研究

用改良的酸性电泳方法对L型杂种小麦及亲本三系的种子醇溶蛋白进行了研究,结果表明,用醇溶蛋白的酸性电泳可鉴别出杂种与父本及常规种之间的差异,而不能鉴别出不育系及相应保持系之间的明显差异。用酯酶,过氧化物酶,ATP酶的同工酶对供试材料幼苗做进一步检测,发现只有ATP酶同工酶能将L型不育系及相应保持系鉴别出来,单用同工酶法或醇溶蛋白电泳法都不能将L型杂种及亲本三系完全区分开。     

树鼩血清乳酸脱氢酶同工酶的研究

采用0.5％琼脂糖凝胶电泳技术对70例云南树鼩（Tupaia belangeri chinensis）正常血清乳酸脱氢酶（LDH）同工酶进行电泳分析。结果表明,树鼩血清乳酸脱氢酶呈现5种不同分子形式的同工酶表型。其LDH₄至LDH₁同工酶随电泳迁移率的增大依次趋于阳极端,LDH₅同工酶移向阴极端。采用分光光度定量法分别测得雌雄个体血清LDH₁-LDH₅5种不同分子形式同工酶的相对百分含量分别为17.9,14.5,20.6,19.7,27.4,和19.6,15.2,18.3,17.7,29.5,雌雄个体H/M亚基比率分别为0.78和0.79。     

金针菇品系间酯酶同工酶标记筛选研究

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板状电泳,研究了不同生长发育期,不同组织对金针菇酯酶同工酶电泳表型的影响,筛选出不受生长发育期及常规培养条件等影响的酯酶标记区带。标记区带分所有品系的出现的基本带和部分品系出现的识别带。酯酶同工酶标记区带电泳表型显示出多态性。     

甘蓝型油菜(Eru CMS)与甘蓝种间杂种的同工酶和蛋白质分析

经胚抢救获得甘蓝型油菜(Brassica napus L.)(Eru CMS)与甘蓝(Brassica oleracea L.var.capitata L.)种间杂种,前期经过流式细胞仪、柱头染色体数目、花粉活力等分析获得一些真杂种。利用电泳法,对真杂种植株的3种同工酶(SOD、EST、COD)和蛋白质进行详细分析,了解了杂种与亲本的同工酶和蛋白质的特性差异。结果表明,杂种与亲本之间的同工酶和蛋白质存在较明显的差异:杂种的SOD、COD的酶带表现为偏父本甘蓝型;杂种的EST的酶带表现为偏母本油菜型;杂种的蛋白质电泳表现为不仅具有双亲的特征蛋白带,也有其自身特征蛋白带。     

甘蓝型油菜(Eru CMS)与甘蓝种间杂种的同工酶和蛋白质分析

经胚抢救获得甘蓝型油菜（Brassica napus L.）（EruCMS）与甘蓝（Brassica oleracea L.var.capitata L.）种间杂种,前期经过流式细胞仪、柱头染色体数目、花粉活力等分析获得一些真杂种。利用电泳法,对真杂种植株的3种同工酶（SOD、EST、COD）和蛋白质进行详细分析,了解了杂种与亲本的同工酶和蛋白质的特性差异。结果表明,杂种与亲本之间的同工酶和蛋白质存在较明显的差异：杂种的SOD、COD的酶带表现为偏父本甘蓝型;杂种的EST的酶带表现为偏母本油菜型;杂种的蛋白质电泳表现为不仅具有双亲的特征蛋白带,也有其自身特征蛋白带。     

5种樱桃属植物的POD、CAT和SOD同工酶分析

采用聚丙烯酰胺垂直平板凝胶电泳技术对5种樱桃属植物的过氧化物酶(POD)同工酶、过氧化氢酶(CAT)同工酶和超氧化物歧化酶(SOD)同工酶的酶谱特征进行分析,结果表明:5种樱桃属植物共电泳出12条POD同工酶酶带、4条CAT同工酶酶带和8条SOD同工酶酶带;其中,POD同工酶酶谱具有5条共同谱带,CAT同工酶4条,SOD同工酶5条。冬季休眠期的樱桃属植物,POD与SOD同工酶谱带的多样性比较丰富,不同植物之间的谱带差异较大;而CAT同工酶谱带差异不明显。     

平菇属中-新杂交种及双亲酯酶同工酶的比较研究

采用聚丙烯酞胺凝胶垂直平板电泳和薄层等电聚焦电泳法,以单抱杂交筛选的平菇属中一新杂交种和双亲株[佛罗里达侧耳(Pleurorur flortdo)和姬菇(Pleurotus sp)]为材料,对三种平菇子实休的酯酶同工酶进行比较,结果表明:①三种平菇子实体的酯酶同工酶酶谱丰富,酶带多,菌种酶谱稳定特异,不受环境条件、栽培方式和采样时间的影响,可作为菌种选育、检侧和鉴定的有效指标。②杂交种的酯酶同工酶酶谱体现了双亲的酯酶同工酶基因的杂交组合,一部分酶带可在佛罗里达侧耳中出现,另一部分酶带在姬菇中出现。酶谱中出现了典型的互补酶带。⑧不同的发育阶段中的子实体酪酶同工梅酶带基本相同,而酶活性变化较大。     

杨树的同工酶变异及早期选择的研究

用单相聚丙烯酰胺凝胶不连续缓冲系统水平平板电泳法,分离了杨树1年生扦插苗的酯酶和过氧化物酶同工酶。根据两种同工酶表型,从11个欧美杨无性系区分出9个无性系和1个遗传群。将过氧化物酶同工酶表型与8-11年生采条母树单株平均材积比较,发现1年生扦插苗的过氧化物酶同工酶带数特别是迁移率快的A区同工酶的带数与成龄树材积成一定正相关,从而可用过氧化物酶同工酶的带数作为亲本相近的杨树速生性的预测指标,使难以选择的数量遗传问题变成易于选择的质量遗传问题。在实践中,利用同工酶技术进行杨树的早期选择可能是一种多快好省的途径。     

白细胞酯酶同工酶对胃癌诊断价值的探讨

本文应用薄平板等电聚焦电泳法对15例未经手术治疗的胃癌患者进行了外周血白细胞酯酶同工酶的分离.结果:正常人外周血白细胞酯酶同工酶显示12条带,等电点(PI)为3.73～7.80.胃癌患者显示11条带,与正常相比第十二条带缺如,PI为3.80～7.90.同工酶各分带与正常相比,酶活性发生明显异常(P<0.01).提示;胃癌患者酯酶同工酶的改变可能是胃癌早期诊断的酶学指标.     

实验红鲫C1HD系的生化遗传标记

目的 建立实验红鲫C1HD系生化遗传标记.方法 采用聚丙烯酰胺梯度凝胶垂直电泳法,分析实验红鲫C1HD系与普通红鲫的苹果酸脱氢酶(MDH)和超氧化物歧化酶(SOD)等同工酶.结果 实验红鲫C1HD系和普通红鲫血清蛋白电泳可分离出25条以上蛋白带,分为A、B、C等3个区段.在A、B区段,实验红鲫C1HD系分别具有SP-A1谱带和SP-B1、SP-B3～8谱带,但缺少SP-A2、SP-A3和SP-B2谱带.实验红鲫C1HD系具有8条SOD同工酶电泳谱带,比普通红鲫多出SOD-3、SOD-8两条特征带.两种红鲫均具备MDH-1、MDH-2和MDH-3电泳谱带,且带型一致;普通红鲫额外具备MDH-4和MDH-5两条电泳谱带.结论 血清蛋白SP-A1和超氧化物歧化酶SOD-3、SOD-8电泳谱带可以作为实验红鲫C1HD系的生化遗传标记.     

分子遗传标记技术在蜻蜓目昆虫研究中的应用

分子生物学技术应用于昆虫系统学研究在近些年发展相当迅速。目前已出现了几十种分子遗传标记。该文简述了酯酶同工酶电泳、核酸序列分析以及AFLP、RAPD、核酸探针等分子生物学技术在蜻蜓目昆虫研究中的应用情况。     

甘蔗愈伤组织在分化过程中过氧化物酶同工酶的活性变化

一、前言王熊等曾指出,烟草愈伤组织在分化前后,其过氧化物酶同工酶的酶谱没有变化。我们在甘蔗愈伤组织中也发现同样的情况。但愈伤组织在分化过程中酶活性是否发生变化。则很少研究。我们利用电泳和扫描技术,定量的测定了甘愈伤组织在分化过程中过氧化物酶同工酶的相对活性。     

北京鸭乳酸脱氢酶同工酶的研究 Ⅰ.薄层等电聚焦电泳分离北京鸭LDH同工酶

采用薄层等电聚焦电泳方法,把北京鸭乳酸脱氧酶同工酶区分为11条电泳区带,发现它们是一组等电点十分邻近的、范围在pH 6.0至8.0的中性蛋白质。     

漆树漆酶割漆季节活性变化及同工酶研究

采用分光光度法、SDS-PAGE电泳及等电聚焦电泳法分析了陕西平利县高八尺和大红袍2个品种漆树漆酶的活性变化规律及同工酶组成.结果表明:漆酶的活性在割漆季节中呈现6～7月下降,7～9月上升,并且高八尺漆酶的活性高于大红袍漆酶活性;确定漆酶的分子量为110 kDa;分离得到4种漆酶同工酶组成,而这4种同工酶组成在两个品种中存在差异,可以作为漆树品种鉴定的生化指标.     

不同性别黄鳝六种组织中LDH同工酶电泳谱的初步研究

本文报告了运用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳研究不同性别黄鳝的血清、心肌、骨骼肌、肝、肾和生殖腺等六种组织器官中ＬＤＨ同工酶。结果表明六种不同组织中ＬＤＨ同工酶谱各不相同,具有明显的组织特异性。在不同性别中某些同一种组织的ＬＤＨ同工酶谱也发生变化,这说明决定黄鳝ＬＤＨ同工酶表达的因素在不同性别中有差异。