甘蓝型油菜(Eru CMS)与甘蓝种间杂种的同工酶和蛋白质分析

经胚抢救获得甘蓝型油菜（Brassica napus L.）（EruCMS）与甘蓝（Brassica oleracea L.var.capitata L.）种间杂种,前期经过流式细胞仪、柱头染色体数目、花粉活力等分析获得一些真杂种。利用电泳法,对真杂种植株的3种同工酶（SOD、EST、COD）和蛋白质进行详细分析,了解了杂种与亲本的同工酶和蛋白质的特性差异。结果表明,杂种与亲本之间的同工酶和蛋白质存在较明显的差异：杂种的SOD、COD的酶带表现为偏父本甘蓝型;杂种的EST的酶带表现为偏母本油菜型;杂种的蛋白质电泳表现为不仅具有双亲的特征蛋白带,也有其自身特征蛋白带。     

实验红鲫C1HD系的生化遗传标记

目的 建立实验红鲫C1HD系生化遗传标记.方法 采用聚丙烯酰胺梯度凝胶垂直电泳法,分析实验红鲫C1HD系与普通红鲫的苹果酸脱氢酶(MDH)和超氧化物歧化酶(SOD)等同工酶.结果 实验红鲫C1HD系和普通红鲫血清蛋白电泳可分离出25条以上蛋白带,分为A、B、C等3个区段.在A、B区段,实验红鲫C1HD系分别具有SP-A1谱带和SP-B1、SP-B3～8谱带,但缺少SP-A2、SP-A3和SP-B2谱带.实验红鲫C1HD系具有8条SOD同工酶电泳谱带,比普通红鲫多出SOD-3、SOD-8两条特征带.两种红鲫均具备MDH-1、MDH-2和MDH-3电泳谱带,且带型一致;普通红鲫额外具备MDH-4和MDH-5两条电泳谱带.结论 血清蛋白SP-A1和超氧化物歧化酶SOD-3、SOD-8电泳谱带可以作为实验红鲫C1HD系的生化遗传标记.     

魔竽葡苷聚糖凝胶为亲和导析载体与Sepharose 4B的比较研究

将KGM凝胶和Sepharose 4B在同样条件下活化偶联,制成Cu2 金属螯合亲和胶,亲和纯化猪血SOD,并对这两种亲和胶的层析效果帮性能进行了比较,KGM金属螯合胶对猪血SOD吸附量,纯化倍数,纯化SOD的比活力和回收率分别为53000U／ml胶,19倍,12000U/mg蛋白和94．6％,而epharose 4B亲和胶对SOD的吸附量,纯化倍数,纯化SOD的比活力和回收率分别为7992U／ml胶,11倍,10125U/mg蛋白和95．4％,两种亲和胶所纯化的SOD经聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）,活性染色及SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS－PAGE）证明其均为电泳纯,KGM金属螯合胶使用六次后,其对SOD吸附量,去Cu量及SOD的回收率均无明显影响。     

玉米酯酶同工酶和过氧化物酶同工酶的分子量研究

本试验利用聚丙烯酰胺凝胶梯度电泳分步染色法直接对玉米苗期酯酶同工酶和过氧化物酶同工酶各酶带的分子量进行了比较测定。酯酶同工酶 E_1、E_2、E_3~F、E_3~S、a、b、c 各酶带的分子量分别为<20000,35200、33000、38500、29900、28500、34000道尔顿过氧化物酶同工酶 PX_4~F和 PX_4~S酶带的分子量分别为131000和149000道尔顿。根据酶带在均匀胶和梯度胶中的位置变化对各酶带的生化性质作了初步分析,发现 E_3~F和 E_3~S、PX_4~F 和 PX_4~S 在迁移率上的差异主要是分子量的差异。本文为同工酶的分子量测定提供了一个简便的方法。     

5种樱桃属植物的POD、CAT和SOD同工酶分析

采用聚丙烯酰胺垂直平板凝胶电泳技术对5种樱桃属植物的过氧化物酶(POD)同工酶、过氧化氢酶(CAT)同工酶和超氧化物歧化酶(SOD)同工酶的酶谱特征进行分析,结果表明:5种樱桃属植物共电泳出12条POD同工酶酶带、4条CAT同工酶酶带和8条SOD同工酶酶带;其中,POD同工酶酶谱具有5条共同谱带,CAT同工酶4条,SOD同工酶5条。冬季休眠期的樱桃属植物,POD与SOD同工酶谱带的多样性比较丰富,不同植物之间的谱带差异较大;而CAT同工酶谱带差异不明显。     

GB对低温胁迫黄瓜叶绿体及SOD、POD同工酶的影响

采用电镜观察和聚丙烯酰胺垂直板电泳法,研究了GB对低温胁迫下黄瓜幼苗叶绿体超微结构和SOD、POD同工酶的影响。结果表明,低温胁迫下,GB可使黄瓜幼苗叶绿体膜结构保持完好,而对照的叶绿体基粒破坏严重;与对照相比,GB处理对SOD、POD同工酶谱带数目均无影响,但POD同工酶的P2(Rf0．24)、P3(Rf0．30)、P4(Rf0．36)酶带的活性增加,SOD同工酶的S1(Rf0．14)、S5(Rf0．58)酶带活性较高,保持了黄瓜幼苗体内相对较高的抗氧化酶活性。GB可保护膜的完整性和稳定性,从而提高黄瓜幼苗的抗冷性。     

稀土元素对鲤鱼肝胰脏多种酶及MDA含量的影响

目的：探究稀土元素对鱼类肝胰脏抗氧化性及淀粉酶的长期影响。方法：将鲤鱼暴露于0.01、0.1、2、5mg/L的La^3＋溶液中120d,研究分析了La^3＋对鲤鱼肝胰脏POD和SOD活性,MDA含量及SOD和AMY同工酶的影响。结果：表明0.01、0.1、2、5mg/LLa^3＋组与对照组相比,镧对肝胰脏中MDA含量影响不显著,对SOD和POD的活性却表现出了显著抑制（p〈0.05或p〈0.01）。同工酶电泳实验结果表明：鲤鱼肝胰脏SOD酶带,对照组有3条,但处理组各有1条,且酶带亮度弱于对照;0.01、0.1mg/L组La^3＋导致AMY酶带亮度较对照组明显增强,且新增1条酶带。但2、5mg/L组,镧对AMY同工酶影响并不显著。结论：La^3＋能使肝胰脏SOD、POD活性减弱,能使SOD、AMY同工酶酶谱发生显著变化。     

有效分离1kDa分子量环脂肽的电泳方法

目的：建立一种有效分离1kDa分子量环脂肽的电泳方法。方法：针对1kDa分子量环脂肽的特点,对凝胶的组分和比例、凝胶的聚合速度等电泳条件进行了优化。结果：改进凝胶组分和比例,使得浓缩胶为7％T、3％C,夹层胶为12％T、3％C,致密胶为16．5％T、6％C;并在胶中加入尿素和甘油;同时加大APS的量使聚合速度加快。由此得到的环脂肽电泳条带清晰、平稳、紧凑,显示分子量为1．05kDa,与质谱结果吻合。结论：新建立的Tricine—SDS—PAGE是一种有效的分离1kDa分子量环脂肽的电泳方法。     

盐胁迫下胡杨愈伤组织生理生化特性

目的：探讨胡杨愈伤组织的耐盐性与生理生化指标的关系。方法：不同浓度NaCl胁迫下,对胡杨愈伤组织的丙二醛（MDA）含量、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）活性以及酯酶同工酶、过氧化物酶同工酶、超氧化物歧化酶同工酶酶谱进行研究。结果：随着盐浓度的增加,丙二醛（MDA）含量逐渐升高;从三种保护酶活性来看,过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性均呈先上升后下降的趋势,在70mmol/L NaCl胁迫下达到最高值,POD、CAT酶活分别为2748u/g．min和152u/g．min,分别比对照高104％和72％;超氧化物歧化酶（SOD）活性则呈先降低后稍上升的趋势,总体均比对照低。过氧化物酶同工酶的第2、3条酶带在70mmol/L NaCl胁迫下颜色最深,且酶带较宽;超氧化物歧化酶同工酶的第1条酶带仅在未经盐胁迫时存在,说明该酶带所代表的酶对盐很敏感;第4条酶带随盐胁迫浓度加大先消失后出现,可能是愈伤组织逐渐适应盐胁迫的结果。结论：经盐胁迫的胡杨愈伤组织中,POD和CAT酶主要起保护作用;结合同浓度盐胁迫下愈伤组织的形态观察,总体上看,胡杨愈伤组织能较好地耐受70mmol/L NaCl。     

超薄平板微型聚丙烯酰胺凝胶的等电聚焦电泳方法——介绍一种高效、快速的生物同工酶分析方法

介绍了一种简易、高效、快速的生物同工酶分析方法－－超薄平板微型聚丙烯酰胺凝胶的等电聚焦电泳 方法。该方法与目前国内外市场销售的同种用途等电聚焦产品（如ＢＩＯ－ＲＡＤ公司的ｍｏｄｅｌ１１Ｍｉｎｉ ＩＥＦ Ｃｅｌｌ）相比,具有以下优点：实验操作灵知,用途更广;谱带清晰;每次可实验的样本量大;电泳所需时间短;实验费用低;适用于多种酶系统的同工酶和等位酶分析;凝胶干燥不需任何设备且能长期保存;样本用量少。     

半夏种内不同居群酯酶和超氧化物歧化酶同工酶酶谱特征分析

对栽培在同一生境下的16个半夏〔Pinellia ternata（Thunb.）Breit.〕居群同一生长期叶片中酯酶（EST）和超氧化物歧化酶（SOD）同工酶酶谱进行了比较分析,结果表明：EST和SOD同工酶酶谱在各居群间,甚至在同一居群内除少数共有的特征谱带外存在着较为明显的频率差异。EST同工酶在半夏各居群中最多可显示12条谱带,其中在慢区的第5（弱带）和快区的第10（强带）2条谱带为各居群所共有的特征谱带;SOD同工酶在半夏各居群中最多显示9条谱带,其中在慢区的第2（弱带）、快区的第5（强带）和第9（强带）3条谱带为各居群所共有的特 征谱带。     

杂交水稻金优63幼苗期SOD和POD特性研究

对杂交水稻金优63幼苗不同时期的根、茎、叶进行SOD同工酶电泳分析,并测定SOD、POD活性。结果表明,自播种后第7天到第13天,幼苗的SOD同工酶在根、茎、叶中有明显的器官特异性,且SOD活性叶 >茎 >根。相同器官不同时期的SOD同工酶电泳谱带条数及SOD活性都有变化,且SOD活性强弱与SOD同工酶电泳谱带中有无Mn-SOD同工酶带有一定的关系。幼苗的POD活性在根、茎、叶中也有明显的器官特异性,茎中POD活性明显高于根和叶,且POD活性变化与SOD活性变化有一定的关系。     

磁处理水对鲫鱼血清蛋白和乳酸脱氢酶同工酶的影响

本试验采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,比较分析了经磁处理水饲养的鲫鱼血清蛋白谱带和ＬＤＨ同工酶谱带。结果表明：其血清蛋白和乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）同工酶的电泳谱带与对照相比有明显差异。血清蛋白谱带平均变化率为３２．５％,ＬＤＨ同工酶谱带平均变化率为１０％。两种谱带均以饲养１０ｄ的变化率最高。结果提示了磁处理水对鲫鱼最佳影响时期。     

常规聚丙烯酰胺凝胶电泳快速检测胰蛋白酶抑制剂的方法

ＳＤＳ—ＰＡＧＥ－　明胶电泳是检测蛋白酶抑制剂的常用方法,基本原理为：聚丙烯酰胺凝胶中加入ＳＤＳ和明胶,　　ＳＤＳ使蛋白酶抑制剂发生可逆变性。电泳完毕,用　Ｔｒｉｔｏｎ　Ｘ－　１００恢复凝胶板中蛋白酶抑制剂的活性,凝胶板置于蛋白酶溶液里保温,含蛋白酶抑制剂部位的明胶不被蛋白酶水解而呈现蛋白染色带。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ一明胶电泳检测蛋白酶抑制剂时,在同一块凝胶板上可同时检测酸性、碱性及中性的蛋白酶抑制剂,但电泳后处理（包括复性,酶解,漂洗和染色）时间长（约２０ｈ）,而且对于同一样品中分子量相近的蛋白酶…     

魔竽葡苷聚糖凝胶为亲和层析载体与Sepharose 4B的比较研究——Ⅰ.KGM金属螯和层析分离纯化猪血SOD

将KGM凝胶和Sepharose 4B在同样条件下活化偶联,制成Cu~(2 )金属螫合亲和胶,亲和纯化猪血SOD,并对这两种亲和胶的层析效果和性能进行了比较。KGM金属螫合胶对猪血SOD吸附量、纯化倍数、纯化SOD的比活力和回收率分别为53000U/ml胶、19倍、12000U/mg蛋白和94.6％,而Sepharose 4B亲和胶对SOD 的吸附量、纯化倍数、纯化SOD的比活力和回收率分别为79920U/ml胶、11倍、10125U/mg蛋白和95.4％。两种亲和胶所纯化的SOD经聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、活性染色及SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)证明其均为电泳纯。KGM金属螯合胶使用六次后,其对SOD吸附量、去Cu量及SOD的回收率均无明显影响。     

中华姬鼠与大林姬鼠的同工酶差异

中华姬鼠（Ａｐｏｄｅｍｕｓｄｒａｃｏ）和大林姬鼠（Ａｐｏｄｅｍｕｓｐｅｎｉｎｓｕｌａｅ）是形态学上十分相似的两种鼠类。为了对两种姬鼠的分类提供生物化学方面的依据,采用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳方法比较和分析了两种姬鼠的ＬＤＨ同工酶、ＥＳＴ同工酶和ＳＯＤ同工酶的差异。结果表明,两种姬鼠的ＬＤＨ同工酶酶谱基本相似,而ＥＳＴ同工酶和ＳＯＤ同工酶酶谱则存在明显的种间差异。根据ＥＳＴ同工酶Ａ２带的有无和ＳＯＤ同工酶主带等电点的差别,能将两种姬鼠很容易区分开来。     

甜椒雄性不育两用系AB91不育株与可育株花药同工酶分析

通过聚丙烯酰胺凝胶电泳法（PAGE）对甜椒核雄性不育两用系AB91不育株与可育株的花药过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）和酯酶（EST）同工酶谱带的分析,以及对其超氧化物歧化酶（SOD）同工酶活性的分析结果表明,这几种同工酶的活性和谱带均与不育性有一定的关系,具体表现为POD、CAT、EST在不育株谱带数少,而可育株谱带数多;POD、SOD的活性不育株高于可育株,而CAT、EST的活性则是可育株高于不育株。     

海藻中清除氧自由基的物质

新鲜海藻的提取液含有超氧物歧化酶（SOD）活性物质,能清除超氧自由基（O2-）。海藻的SOD活性通常为60—280Ug-1FW,而在孔石莼（Ulvapertusa）、江蓠（Gracilariaverrucosa）和凤尾菜（G．eucheumoices）中活性较高,约为300Ug-1FW。一般来说,海藻的SOD活性和稳定性为：绿藻＞红藻＞褐藻。绿藻的SOD以CuZn-型为主,而蓝藻的SOD以Fe-型为主。以江蓠琼枝（Eucheumagelatinae）提取液作PAGE并SOD活性染色时,除了观察到SOD同工酶带之外,还发现在前沿指示剂附近有一区域,此区域与高效自由基清除剂SPD（Superphycodismutas）的电泳行为和对氮蓝四唑（NBT）负染色的抑制相同,可能两者为同一种物质。     

三种瘤背豆象幼虫酯酶同工酶的比较研究

本研究采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板型电泳法 ,分析了 3种瘤背豆象属豆象 :绿豆象 Callosobruchuschinensis L.、灰豆象 C.phaseoli ( Gyllenhal)、鹰嘴豆象 C.analis ( Fabricius)幼虫的酯酶同工酶。从酶谱的酶带数、迁移率、酶活性强弱 (酶带染色深浅 )、酶含量 (酶带宽窄 )等方面的比较发现 ,3种瘤背豆象属豆象幼虫的酯酶同工酶酶谱具有明显的差异。由此探讨利用酯酶同工酶电泳法鉴别豆象的可能性     

铅对蟾蜍肝、肾过氧化物酶和酯酶同工酶的影响

以腹腔注射法对蟾蜍 (Bufobufogargarizans)给铅 ,处理 7d后 ,使用聚丙烯凝胶垂直平板电泳法 ,研究了不同浓度 (按铅计 1、2、4、8mg·kg-1 体重 )的铅对蟾蜍肝脏、肾脏过氧化物酶和酯酶同工酶的影响。结果表明 ,不同浓度的铅均可使肝、肾组织过氧化物酶同工酶带强弱发生明显变化 ;对肝、肾酯酶同工酶的影响表现出一定的组织差异性 ,且在一定范围内主要表现为应激性 ,即低剂量的铅可诱导酶活性的提高。