华癸中生根瘤菌共生质粒的定向标记、消除与结瘤功能的鉴定

采用Tn5-mob-sacB转座子对华癸中生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)菌株7653R的共生质粒进行定向标记,获得该质粒标记菌株7653RT14.利用sacB基因对蔗糖的敏感性,对标记质粒进行消除实验,获得7653R的共生质粒消除突变株7653R-1.测得Tn5-mob-sacB转座频率高于10-5.突变株的培养特征与出发菌株基本一致.采用琼脂管法对7653RT14和7653R-1进行回接实验,结果显示7653RT14能正常结瘤固氮,表明Tn5的插入并未影响其共生能力,但失去共生质粒的7653R-1则为不结瘤或只结个别小瘤.稳定性实验结果表明供试菌株的标记质粒在本实验条件下是稳定的,可以作为共生质粒转移的供体菌.     

金针菇品系间酯酶同工酶标记筛选研究

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板状电泳,研究了不同生长发育期,不同组织对金针菇酯酶同工酶电泳表型的影响,筛选出不受生长发育期及常规培养条件等影响的酯酶标记区带。标记区带分所有品系的出现的基本带和部分品系出现的识别带。酯酶同工酶标记区带电泳表型显示出多态性。     

华癸中生根瘤菌HN3015非共生质粒pMhHN3015a的不相容性行为

采用三亲本杂交将Tn5-mob-sacB标记华癸中生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)HN3015的非共生质粒pMhHN3015a分别导入HN308SR和7653R-1SR, 获得2个转移接合子HN308SRN29和7653R-1SRN29。HN308SRN29的质粒图谱显示HN308SR的pMhHN308b被消除, 该结果暗示pMhHN3015a和pMhHN308b不相容。然而, HN308SRN29的质粒消除实验未获得标记质粒消除突变株。pMhHN3015a和pMhHN308a的大小     

聚类分析在金针菇杂交育种中的应用

对12个金针菇菌株两种生化标记（酯酶和可溶性蛋白）进行了筛选研究．采用多元统计方法,进行聚类分析。结果表明,供试菌株可分为四个类群。按照亲本的遗传相似系数,对各杂交组合的杂种优势进行了检测,实际结果表明,不同杂交组合的产量与预测结果基本一致。群内组合为低产组合,群间组合杂种优势较强。     

生物工程专业微生物学教学改革与实践

针对生物工程专业微生物学理论教学与实验教学如何围绕学生工程能力和创新能力的培养组织教学进行探讨,从教材选定,教学内容重组与更新,培养学生的科学精神和综合思考能力,注重理论联系实际以及教学方法、教学手段、实验考核制度的改革等进行了一些有益的尝试,取得了较为满意的效果。     

青蒿素衍生物抗菌机理研究

前期研究从臭蒿中提取分离出臭蒿抗菌流分Fr.5.2主要成分为青蒿素衍生物。为了研究青蒿素衍生物的抗菌机理,测试Fr.5.2和双氢青蒿素(Dihydroartemisinin,DHA)对烟草链格孢菌的抗菌活性、细胞膜完整度、胞内物质的泄露、菌体和孢子的影响。结果发现:Fr.5.2对烟草链格孢菌最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)为1.25 mg/m L,最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)为2.5 mg/m L,DHA对烟草链格孢菌的MIC为10 mg/m L,MBC为10 mg/m L。0.625 mg/m L Fr.5.2和2.5 mg/m L DHA作用于烟草链格孢菌,在0~3 h,细胞膜完整度不断下降,胞内核酸大分子不断流失;SEM观察发现菌丝体细胞膜细小、有空洞,孢子表面也有凹陷;Fr.5.2和DHA还可以抑制麦角甾醇的合成,与空白组相比,麦角甾醇的含量分别降低29.77%,28.99%,孢子平均密度提高,但是萌发率降低。这些实验结果表明,青蒿素衍生物能够抑制真菌麦角甾醇的合成,破坏细胞膜,阻碍真菌细胞的新陈代谢,破坏真菌孢子,能有效的抑制、杀死真菌。     

“代谢工程”课程思政案例的挖掘与运用

“代谢工程”课程是生物类工科专业本科生或研究生的一门重要的专业选修或必修课程,涉及学科领域广、应用性强。加强“代谢工程”课程思政教学是适应教书育人和立德树人的时代需求。文中详细列举了“代谢工程”课程中开展思政教学的一些典型案例,寓思政教育于课程教学环节之中,借此对工科生进行正确的价值引领,从而培育学生的科学精神,加强学生的文化自信和家国情怀,增强学生勇攀科学高峰的信心。     

产气荚膜梭菌前噬菌体的分布特点及遗传进化分析

【目的】分析和研究产气荚膜梭菌中前噬菌体的分布情况、基因组特点及遗传进化关系。【方法】利用PHASTER (phage search tool enhanced release)软件预测产气荚膜梭菌携带的前噬菌体,基于ANI (average nucleotide identity)值对前噬菌体进行分群,利用CARD (comprehensive antibiotic research database)、Res Finder 4.1、VFDB (virulence factors database)和Bac Met(antibacterial biocide&metal resistance genes database)分析前噬菌体携带的耐药基因、毒力基因、抗菌剂/金属离子抗性基因,利用CRISPRCas Finder分析产气荚膜梭菌的CRISPR-Cas系统,利用MEGA 7.0进行前噬菌体的遗传进化关系分析。【结果】产气荚膜梭菌平均携带前噬菌体2.67条,其长度呈双峰分布,平均占基因组2.23%;前噬菌体不携带耐药基因,但携带了α毒素、唾液酶和溶血素等毒力基因以及重金属...     

华癸中生根瘤菌质粒复制基因repC的克隆与鉴定

摘要：【目的】repC为质粒复制必需的起始蛋白基因。本研究旨在对华癸中生根瘤菌菌株HN3015及其质粒消除突变株进行repC基因的克隆和鉴定。【方法】采用通用引物RC1和RC3进行repC基因的PCR扩增,扩增产物克隆到载体pMD-18T,然后测序。利用Southern 杂交对repC基因定位。利用在线软件分析基因的序列特征,BLAST 工具进行同源性搜索;ExPASy推断其氨基酸的序列;ClustalW进行同源核苷酸和氨基酸序列的多重比较分析;PredictProtein 进行蛋白二级结构分析。【结果】